Примечание. М - среднее арифметическое значение; m - стандартная ошибка среднего арифметического; n - количество животных; * р2-1 ? 0,05 при U= 0; ** р3-1 ? 0,05 при U = 0; *** р1-4 ? 0,05 при U = 0.
Иммобилизационный стресс, создаваемый по методу Ю.И. Добрякова [8], нередко используется для оценки адаптогенных возможностей новых биологически активных соединений, а также для создания острого нейрогенного эрозивного или язвенного воспаления слизистой или стенки желудка. Механизмы этих повреждений полностью определяются стрессорными нейрогуморальными факторами [15, 16]. Исследовали спиртовой экстракт ряски, который вводили мышам в дозах 100 и 200 мг/кг. Согласно полученным данным экстракт ряски дозозависимо уменьшал в стенке желудка количество изъязвлений (р < 0,05; табл.2), что отразилось на индексе Паулса. Если в контроле последний составлял 5,8 балла, то в опытах с экстрактом ряски он был в 2 раза меньше. Следовательно, экстракт ряски продемонстрировал способность ослаблять нейрогенные деструктивные повреждения в стенке желудка в условиях иммобилизационного стресса.
Острые деструктивные повреждения в стенке желудка моделировали также по методу Shay [9] на крысах. В отличие от предыдущей серии такая модель воспалительных язвенных поражений сочетает в своем генезе нейродистрофический процесс и пептический фактор [15] и является более жесткой моделью язвенного воспаления. В контрольных исследованиях было обнаружено по 2-3 язвы у каждого животного, причем в основном полосовидные и точечные, размером менее 1 мм. У крыс, получавших 5 дней подряд экстракт ряски, количество точечных язв было увеличено в 2 раза (р < 0,05) и индекс Паулса - также в 2 раза (табл.3). Таким образом, экстракт ряски не способен подавлять деструктивный воспалительный процесс в стенке желудка, связанный с острым пептическим повреждением.
В условиях острой пептической язвы определяли кислотность желудочного сока по концентрации свободных ионов водорода. Согласно результатам, представленным в табл.4, экстракт ряски существенно не изменял кислотность желудочного сока крыс в указанных условиях.
Таблица 2. Влияние экстракта ряски на деструктивные повреждения в стенке желудка в условиях иммобилизационного стресса
|
Препарат |
Доза, мг/кг |
Количество изъязвлений (М ± m) |
Индекс Паулса |
Противоязвенная активность |
|
|
Интактная группа, n = 6 |
- |
- |
- |
||
|
Физиологический раствор внутрь, n = 8 |
5,8 ± 1,7 |
5,8 |
- |
||
|
Экстракт ряски внутрь, n = 9 |
100 |
2,0 ± 0,7* |
2 |
2,88 |
|
|
Экстракт ряски внутрь, n = 10 |
200 |
1,8 ± 1,8** |
1,3 |
4,56 |
Примечание. М - среднее арифметическое значение; m - стандартная ошибка среднего арифметического; n - количество животных; * р3-2 ? 0,05 при U= 0; ** р4-2 ? 0,05 при U= 5.
Таблица 3. Влияние экстракта ряски на деструктивные повреждения в стенке желудка крыс с перевязкой пилорического отдела
|
Экспериментальные серии |
Количество изъязвлений M±m |
Индекс Паулса |
Противоязвенная активность |
|
|
Контроль, n = 6 (с лигатурой) |
2,2 ± 0,48 |
1,8 |
||
|
Физиологический раствор внутрь + лигатура, n = 7 |
2,3 ± 0,66 |
1,9 |
0 |
|
|
Экстракт ряски 200 мг /кг внутрь + лигатура, n = 7 |
4,5 ± 0,76* |
4,5 |
0 |
Примечание. М - среднее арифметическое значение; m - стандартная ошибка среднего арифметического; n - количество животных; * р3-1 ? 0,05 при U= 2; ** р3-2 ? 0,05 при U= 1.
Таблица 4. Влияние экстракта ряски на протеолитическую активность и концентрацию свободных ионов водорода в желудочном соке крыс с перевязкой пилорического отдела желудка
|
Экспериментальные серии |
[aH+], мкМ/мл, (M ± m) |
Протеолитическая активность мкМ/мл, (M ± m) |
|
|
Контроль (с лигатурой), n = 6 |
0,08 ± 0,004 |
83,1 ± 18,56 |
|
|
Физиологический раствор внутрь + лигатура, n = 7 |
0,09 ± 0,004 |
82,3 ± 17,46 |
|
|
Экстракт ряски 200 мг/кг внутрь + лигатура, n = 7 |
0,08 ± 0,004 |
184,4 ± 5,79**# |
Примечание. М - среднее арифметическое значение; m - стандартная ошибка среднего арифметического; n - количество животных; ** р3-1 ? 0,05; # р3-2 ? 0,05 при U = 2.
Однако, как свидетельствуют полученные данные, экстракт ряски увеличивал на 121% протеолитическую активность желудочного сока у крыс с перевязкой пилорического отдела, что объясняет механизм возникновения деструктивных поражений слизистой (табл.3,4). Таким образом, экстракт ряски в исследуемой дозе, не оказывая влияния на кислотность желудочного сока, увеличивал его протеолитическую активность.
Заключение
Таким образом, проведенные исследования биологической активности экстракта ряски показали, что в дозе 100 и 200 мг/кг препарат при пероральном введении в организм мышей в течение 5 дней оказывал противовоспалительное действие на моделях каррагенинового и стрессорного воспаления. Однако на модели пептических деструктивных повреждений стенки желудка крыс экстракт ряски оказался не только неэффективным, но даже увеличивал количество пептических язв. При этом препарат, не изменяя кислотность желудочного сока, значительно повышал его протеолитическую активность.
С одной стороны, это объясняет механизм увеличения под его влиянием количества деструктивных повреждений стенки желудка в условиях перевязки пилорического отдела и накопления протеолитических ферментов в желудочном соке.
С другой стороны, полученные результаты указывают на стимуляцию препаратом главных клеток желудка, вырабатывающих пепсиноген. Возможно, экстракт ряски усиливал гастриновый контроль секреции пепсиногена [13, 14]. На основании проведенных исследований трудно сказать что-либо более определенное относительно механизма такой стимуляции. Это требует дальнейших всесторонних исследований.
Статья посвящена памяти декана фармацевтического факультета Сибирского государственного медицинского университета профессора С.Е. Дмитрука.
Литература
1. Елина Г.А. Аптека на болоте: путешествие в неизвестный мир. СПб.: Наука, 1993.322 с.
2. Кортиков В.Н., Кортиков А.В. Лекарственные растения. М.: Рольф; Айрис-пресс, 1998.768 с.
3. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. М.: Медицина, 1988.464 с.
4. Никифоров Л.А., Дмитрук С.Е. Изучение биоэлементного состава Lemna minor и Lemna trisulca // Микроэлементы в медицине. 2008. Т.9, № 12. С.23-24.
5. Никифоров Л.А., Охотина Н.С., Дмитрук С.Е. Сравнительный анализ изучения химических и фармакологических свойств растений рода Lemna // VII Межрегиональная научно-практическая фармацевтическая конференция "Биологически активные соединения в профилактике заболеваний и укреплении здоровья нации". Новосибирск, 2007. С.24-26.
6. Никифоров Л.А. Изучение противогрибковой активности, сорбционных свойств и биоэлементного состава Lemna minor и Lemna trisulca // Медицина в Кузбассе. 2009. № 7 (Спецвыпуск). С.59-60.
7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / В.П. Фисенко, Е.В. Арзамасцев, Э.А. Бабаян, В.М. Булаев и др. М.: Ремедиум, 2000. С.234-242.
8. Добряков Ю.И. Скрининговый метод оценки антистрессорного действия препаратов // Стресс и адаптация. М., 1978. С.33-36.
9. Shay H., Komarov S. A., Fells S. S. A single method for the uniform production of gastric ulceration on the rats // Gastroenterologie. 1945. Vol.5, № 1. P.43-61.
10. Уголев А.М. Исследование пищеварительного аппарата у человека. Л.: Наука, 1969.216 с.
11. Канищев П.А., Коваленко Л.Г. О темпе желудочной секреции водородных ионов // Лабораторное дело. 1977. № 12. С.707-710.
12. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов. М.: Высшая школа, 1990.352 с.
13. Гайтон А.К., Холл Д.Э. Медицинская физиология. М.: Логосфера, 2008.1256 с.
14. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Петров В.И. Рецепторы. Москва; Волгоград: Семь ветров, 1999.640 с.
15. Комаров Ф.И., Заводская И.С., Морева Е.В. Нейрогенные механизмы гастродуоденальной патологии. М.: Медицина, 1984.239 с.
16. Кузнецов А.П. Желудочно-кишечный тракт и стресс. Курган: Изд-во Курган. гос. ун-та, 2004.254 с.