Раствор индикатора – 2,6-дихлорфенолиндофенола (краска Тильманса) приготавливают путем растворения 200 мг краски в 1 л дистиллированной воды; затем раствор фильтруют и к нему добавляют несколько кристалликов NаНСО3. Титр полученного раствора устанавливают по кристаллической аскорбиновой кислоте. Раствор краски неустойчив, его титр определяют непосредственно перед опытом.
Около 1,0–1,5 мг аскорбиновой кислоты растворяют в 50 мл 1 %-й серной кислоты. 5 мл этого раствора титруют краской из микробюретки. Затем такой же объем раствора аскорбиновой кислоты титруют из другой микробюретки 0,001 н. раствором КJО3 (0,03568 г КJО3, высушенного в течение 2 ч при 102 С, растворяют в 1 л воды) с добавлением перед титрованием нескольких кристаллов (не больше 0,1 г) КJ и пяти капель 1 %-го раствора крахмала. Расчет титра краски по аскорбиновой кислоте производят по следующей формуле, исходя из того, что 1 мл 0,001 н. раствора йода (иодата) эквивалентен 0,088 мг аскорбиновой кислоты, мг:
Т
=
,
где а – 0,001 н. раствора КJО3, мл; – объем раствора краски, мл.
Таким образом определяют, какому количеству (в миллиграммах) аскорбиновой кислоты соответствует 1 мл краски.
Студенты разбиваются на три группы и определяют содержание витамина С в различных плодах. Например:
– первая группа – в бананах;
– вторая группа – в фейхоа;
– третья группа – в киви.
Каждой группе выдается по три плода и баночке соответствующего конфитюра, приготовленного в ходе лабораторной работы № 3.
Плоды тропических и субтропических культур выбираются одинаковыми по размеру, форме и окраске. Плоды киви, бананов, фейхоа очищают от кожицы; хурму не очищают.
В стаканчик на 100 мл мерным цилиндром приливают 20 мл смеси 1 %-х растворов щавелевой и соляной кислот. Затем стаканчик с содержимым взвешивают на технических весах, массу с записывают. После этого из трех плодов пробником берут пробу массой примерно 15 г, конфитюра – 20 г.
При взятии проб из плодов следует учитывать, что аскорбиновая кислота распределяется в плодах неравномерно: в кожице ее в шесть раз больше, чем в сердцевине. Поэтому среднюю пробу желательно составлять так, чтобы в ней всегда было одно и то же соотношение всех частей плода. Для этой цели используют специальные пробники. Пробником может служить любая металлическая трубка с поршнями из нержавеющего материала диаметром от 0,5 до 0,7 см.
Проба выталкивается из пробника поршнем непосредственно в стаканчик со смесью кислот и взвешивается (определяется b). Определяется масса пробы g:
g = b – с.
Все содержимое стаканчика переносят в ступку и растирают пробу с небольшим количеством песка. Затем переносят содержимое ступки в колбу на 100 мл. Ступку тщательно обмывают раствором кислоты, затем водой. Обмывающие жидкости сливают в ту же мерную колбу или цилиндр и доводят до метки. После этого колбу энергично встряхивают в течение 3–5 мин. После перемешивания вытяжку фильтруют через складчатый фильтр. Из фильтрата берут 10 мл прозрачной и почти бесцветной вытяжки в стаканчик на 50 мл и титруют из микробюретки (пипетки) стандартизированным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до появления стойкого слаборозового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин. Титрование повторяют не менее трех раз. В таблицу вписывают количество краски С, пошедшее на титрование.
Параллельно проводят контрольный опыт. В мерную колбу на 100 мл наливают 20 мл смеси соляной и щавелевой кислот и доводят до метки. Затем берут 10 мл исследуемого раствора в коническую колбу на 50 мл и титруют краской Тильманса до появления слаборозового окрашивания, записывают количество раствора 2,6-дихлор-фенолиндофенола, затраченного на титрование при контрольном опыте Со.
Полученные результаты записывают в таблицу.
|
Название плодов и конфитюров |
с, г |
b, г |
g, г |
С, мл |
Сo, мл |
|
Бананы |
|
|
|
|
|
|
Киви |
|
|
|
|
|
|
Фейхоа |
|
|
|
|
|
|
Банановый конфитюр |
|
|
|
|
|
|
Конфитюр из киви |
|
|
|
|
|
|
Конфитюр из фейхоа |
|
|
|
|
|
Содержание аскорбиновой кислоты в 100 г тропических и субтропических плодов рассчитывается по следующей формуле:
,
где Х – количество аскорбиновой кислоты в 100 г плодов, мг; С–Со – количество раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола, затраченного на титрование вытяжки, за вычетом поправки на контрольный опыт, мл;
Т – титр раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола по аскорбиновой кис-лоте, мг; Е – общее количество вытяжки, полученное при добавлении к навеске экстрагирующей жидкости, мл; 0,088 – количество аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл 0,001 н. раствора 2,6-дихлор-фенолиндофенола, мг; h – количество вытяжки, взятой непосредственно для титрования, мл; g – навеска, г.
ВЫВОДЫ
В заключение работы делаются выводы о количественном содержании аскорбиновой кислоты в тропических и субтропических плодах. Совместно со студентами всех подгрупп обсуждаются полученные результаты и составляется отчет.
Отчет о работе должен содержать:
1. Теоретические предпосылки.
2. Цель работы и ее краткое содержание.
3. Краткий ход проведения анализа.
4. Таблицу опытных данных.
5. Вывод по результатам работы.
1. Гамидуллаев С.Н. и др. Товароведение и экспертиза продовольственных товаров: Учеб. пособие. – СПб.: Альфа, 2000. – 432 с.
2. Досон Р. и др. Справочник биохимика. – М.: Мир, 1991. – 544 с.
3. Ермаков А.И. Методы биохимического исследования растений. – Л.: Колос, 1972. – 456 с.
4. Щербаков В.Г. и др. Биохимия. – СПб.: Гиорд, 2003. – 440 с.
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ 5
ЦЕЛЬ РАБОТЫ 8
ПОРЯДОК ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ 10
ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ЭКСПЕРИМЕНТА 12
ВЫВОДЫ 13
Оформление работы 13
Список литературы 13
Колодязная Валентина Степановна
Кипрушкина Елена Ивановна
Кременевская Марьяна Игоревна
Методические указания к лабораторной работе № 4 «Определение биологически ценных веществ в тропических и субтропических плодах и продуктах их переработки» для студентов специальности 270800
Редактор Е.О. Трусова
Корректор Н.И. Михайлова
Компьютерная верстка Н.В. Гуральник
_________________________________________________________________________
Подписано в печать 7.09.2005. Формат 6084 1/16
Печать офсетная. Усл. печ. л. 0,93. Печ. л. 1,0. Уч.-изд. л. 0,81
Тираж 000 экз. Заказ № C 74
________________________________________________________________________
СПбГУНиПТ. 191002, Санкт-Петербург, ул. Ломоносова, 9
ИПЦ СПбГУНиПТ. 191002, Санкт-Петербург, ул. Ломоносова, 9