Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов.
•Взятие исследуемого материала осуществляется шприцем с притертым поршнем, после чего материал вносят в пробирку с транспортной средой.
•Выделение чистой культуры проводится со строгим соблюдением анаэробных условий на всех этапах исследования.
1-й этап – получение изолированных колоний.
•Готовят ряд разведений исследуемого материала и делают посев на чашки Петри со средой КАБ или другой питательной средой для культивирования анаэробов.
•Посевы инкубируют в микроанаэростатах, заполненных газовой смесью, при температуре 37 °С в течение 48-72 часов.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов.
2-й этап - получение чистой культуры анаэробов.
На этом этапе:
1.Изучают морфологические и культуральные свойства выросших колоний.
2.Проводят параллельный рассев каждой отобранной колонии на две чашки Петри с питательной средой.
Одну чашку инкубируют в аэробных условиях, другую - |
в |
анаэробных условиях. |
|
3. Для дальнейшего исследования отбирают культуры, |
|
выросшие только в анаэробных условиях (так исключают |
|
факультативные анаэробы). |
|
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Схема выделения чистой культуры облигатных анаэробов.
3-й этап - идентификация выделенных облигатных анаэробов.
• Проводят биохимическую идентификацию в микротест-
системе, например АР1-20А. Суспензию выделенной культуры засевают на пластину АР-20А с набором биохимических тестов, инкубируют в анаэробных условиях в течение 48 часов, учитывают биохимические свойства культуры по изменению окраски индикаторов системы и определяют ее родовую и/или видовую принадлежность.
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Рисунки к занятию 5
Sarcina
Латинское морфологическое название |
Латинское морфологическое название |
|
выделенной культуры |
||
бактерий из колонии |
||
|
Метод выращивания анаэробов по Фортнеру
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов
Доцент КГМУ, Г.Н. Наумов