Статья: Исследование собак на носительство бордетелл

Размещено на http: //www. allbest. ru/

ФГБОУ ВО Ульяновская ГСХА г. Ульяновск, Россия

FGBOU VO Ulyanovsk GSHA Ulyanovsk, Russia

Исследование собак на носительство бордетелл

Study dog carrier bordetella

Минибаев Т.Т., Мухин Е.Б., Феоктистова Н.А.

Minibaev T.T., Mukhin E.B., Feoktistova N.A.

Бордетеллёз домашних животных в нашей стране является малоизученным заболеванием и диагностируется как патология невыясненной этиологии [1-25]. Методы выделения Bordetella bronchiseptica не разработаны, что создает определённые сложности в своевременном и точном выявлении заболевания у домашних животных [2, 5, 7, 9].

В связи с этим целью нашего исследования исследование собак на наличие бордетеллоносительства.

Материалы и методы. Исследования проводили в лаборатории НИИЦМиБ кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ и на базе приюта для животных «Лапа помощи» Ульяновской ГСХА.

Для типирования, выделенных от животных микроорганизмов использовали определитель бактерий Берджи [11].

Собак фиксировали при взятии проб из носовой полости в стоячем или сидячем положениях, удерживая голову одной рукой за кожную складку на шее, а другой - за челюсти. При взятии проб из глотки в стоячем или сидячем положениях, разводя челюсти руками или с помощью инструментов.

Для типизации Bordetella bronchiseptica использовали среды: бордетелагар, Эндо, МПА, триптико-соевый бульон, МПБ, набор сахаров Гисса, тесты на подвижность, оксидазу, индол, микроскопию с окраской по Граму.

Схема опыта №1 включала взятие проб - мазков из назальной впадины собак. Для этого использовали стерильные ватные палочки и ТСБ. Палочки помещали в носовые ходя собак на глубину 2-4 см и совершали несколько вращательных движение, касаясь внутренней стенки носовой полости. После взятия материала пробы подращивали в термостате при t 37°С в течение суток. Затем осуществляли оценку роста на ТСБ и проводили посев на плотную питательную среду - бордетелагар с суточной инкубацией при t 37°С в термостате. На 2-3 сутки оценивали рост колоний, выделяли чистые культуры методом посева штрихом и изучали морфологические, биохимические и культуральные свойства выделенных микроорганизмов.

Схема опыта №2 включала взятие проб из глотки собак. Для этого использовали стерильные ватные палочки и селективную среду - бордетелагар. Мазок брали с задней стенки глотки собак, совершая несколько вращательных движений. После взятия материала пробы подращивали в термостате при t 37°С в течение 1-2 суток. Затем выделяли чистые культуры и комплексно изучали их свойства.

При проведении первого опыта были получены следующие результаты. Результаты посева суточных бульонных культур на бордетелагар с суточной инкубацией при t 37°С в термостате не дали положительных результатов выделения Bordetella bronchiseptica. Выросшие колонии отнесли к родам: Candida, Mucor.

При проведении опыта №2 были получены следующие результаты.

Оценка роста выделенных культур в жидкой питательной среде представлена в таблице 1. 6 из 9 исследуемых культур, вызывали равномерное помутнение ТСБ с последующим образованием осадка и пристеночного поверхностного кольца, что характерно для рода бордетелл.

Таблица 1 Оценка роста микроорганизмов на триптико-соевом бульоне

Результаты культивирования отдельных колоний на плотной селективной среде - бордетелагаре представлены в таблице 2.

Таблица 2 Оценка колоний на бордетелагаре

На селективной среде характерный рост для рода Bordetella (маленькие, блестящие, полупрозрачные, серовато-белые колонии диаметром 0,22,5 мм) показали 7 культур.

Результаты изучения морфологических и культуральных свойств колоний представлены в таблице 4. По морфологическим и культуральным свойствам роду Bordetella соответствовали 4 культур. Они представляли собой овоидные, коккобациллярные грамотрицательные палочки, окрашивающиеся биполярно, располагающиеся одиночно, парами, редко короткими цепочками. Все исследуемые образцы были подвижны и хорошо росли на простых и селективных питательных средах.

Таблица 3 Морфологические и культуральные свойства полевых штаммов

Результаты изучения биохимических свойств, выделенных колоний представлены в таблице 3.

Таблица 4 Биохимические параметры полевых штаммов

По биохимическим тестам роду Bordetella соответствовало 5 культур, которые не ферментировали сахара, не образовывали индол и продуцировали оксидазу.

бордетеллез собака коклюшный палочка

Выводы и предложения

В результате комплексного изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств у 4-х исследуемых собак было установлено бордетеллоносительство.

Библиографический список

1. Васильев Д.А. Бордетеллёз животных: характеристика заболевания и воз-будителя, разработка методов диагностики / Д.А. Васильев, Ю.Б. Васильева, А.В. Мастиленко, Д.Г. Сверкалова, Е.Н. Семанина, О.Ю. Борисова, С.Н. Золотухин, И.Г. Швиденко И.Г. - Ульяновск, 2014.

2. Васильев Д.А. Индикация Bordetella bronchiseptica из объектов внешней среды и клинических образцов / Д.А. Васильев, Ю.Б. Васильева, Е.Н. Семанина, Е.Г. Семанин / Материалы V Международной научнопрактической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения». Ульяновская ГСХА - 2013. - С. 18-22.

3. Васильева Ю.Б. Алгоритм использования тecт-cистемы индикации и идентификации бактерий B. bronchiseptica / Ю.Б. Васильева, А.В. Мастиленко, Д.А. Васильев, Р.Р. Бадаев, С.В. Мерчина, И.Г. Швиденко, Е.И. Суркова / Современные проблемы науки и образования. - 2014. - № 5. - С. 606.

4. Васильева Ю.Б. Биотехнологический подход в разработке метода идентификации Bordetella bronchiseptica / Ю.Б. Васильева, Д.А. Васильев, Е.Н. Семанина, Е.Г. Семанин / Материалы V Международной научнопрактической конференции. Ульяновская ГСХА «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения». - 2013. - С. 15-18.

5. Васильева Ю.Б. Детекция бактерий Bordetella bronchiseptica в мультиплексной полимеразно-цепной реакции / Васильева Ю.Б., Мастиленко А.В., Семанин А.Г., Скорик Д.С., Суркова Е.И. / Сборник статей «Аграрная наука - сельскому хозяйству». - 2014. - С. 253-257.

6. Васильева Ю.Б. Наборы для детекции бактерий вида В. Bronchiseptica / Ю.Б. Васильева, А.В. Мастиленко, Д.А. Васильев, А.Г. Семанин, Е.И. Суркова, А.С.Скорик, А.Н. Пирюшова, Н.Р. Уралов / Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 55-летию ВНИИВВиМ «Актуальные в опросы контроля инфекционных болезней животных». - 2014. - С. 48-53.

7. Васильева Ю.Б. Разработка методов выделения и селекции бактериофагов Bordetella bronchiseptica / Ю.Б. Васильева, Д.А. Васильев, Е.Н. Семанина / Материалы Международной научно-практической конференции «Бактериофаги: теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности». - 2013. С. 28-32.

8. Васильева Ю.Б. Технология конструирования диагностического биопрепарата на основе бактериофагов Bordetella bronchiseptica и перспертивы его применения / Ю.Б. Васильева, Д.А. Васильев, Е.Н. Семанина / Материалы Международной научно-практической конференции «Бактериофаги: теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности». - 2013. - С. 99-103.

9. Васильева Ю.Б. Эффективность иммунохимических методов для анализа антигенного состава Bordetella bronchiseptica / Ю.Б. Васильева // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 10-1. - С.100-104.

10. Васильева Ю.Б. Эпизоотология и инфекционные болезни животных / Васильева Ю.Б., Богданов И.И. - Ульяновск. - 2015. - 25 с.

11. Ломакин А.А. Чувствительность к антимикробным средствам бактерий вида Bordetella bronchiseptica / А.А. Ломакин, А.В. Мастиленко, Ю.Б. Васильева / Материалы I международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования по приоритетным направлениям биоэкологии и биотехнологии». - 2014. - С. 144-147.

12. Мастиленко А.В. Подбор праймеров для выявления генов бактерий вида Bordetella bronchiseptica / А.В. Мастиленко, Ю.Б. Васильева, Н.А. Феоктистова / Материалы I международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования по приоритетным направлениям биоэкологии и биотехнологии». - 2014. - С.109-112.

13. Мастиленко А.В. Разработка методики серологической идентификации Bordetella bronchiseptica с помощью иммуноэлетрофореза / А.В. Мастиленко, Д.Г. Сверкалова, Е.Г. Семанин, Ю.Б. Васильева / Материалы III-й Международной научно-практической конференции молодых ученых «Молодежь и наука XXI века». - 2010. - С. 47-49.

14. Мастиленко А.В. Разработка протокола проведения ПЦР для детекции бактерий вида Bordetella bronchiseptica / А.В. Мастиленко, Ю.Б. Васильева, Н.А. Феоктистова / Материалы I Международной научнопрактической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования по приоритетным направлениям биоэкологии и биотехнологии». - 2014. - С. 113-116.

15. Мастиленко А.В. Определение эффективности разработанных зондов в реакции ОТ-ПЦР для повышения специфичности выявления Bordetella bronchiseptica / А.В. Мастиленко, Д.А. Васильев, Ю.Б. Васильева, Д.Г. Сверкалова // - Инфекция и иммунитет. - 2013. - Т.3. - № 2. - С.152.

16. Никульшина Ю.Б. Выделение бактерий рода Bordetella brovchiseptica от домашних животных / Ю.Б. Никульшина, Д.Г. Сверкалова, Е.Н. Никулина, Д.Н. Хлынов / Материалы Международной научно-практической конференции «Роль молодых ученых в реализации национального проекта "Развитие АПК"». - 2007. - С. 281-284.

17. Никульшина Ю.Б. Культивирование Bordetella bronchiseptica на различных селективных средах / Ю.Б. Никульшина, Д.А. Сверкалова, А.В. Мастиленко, Д.Н. Хлынов, Д.А. Васильев / Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 65-летию Ульяновской ГСХА «Актуальные вопросы аграрной науки и образования». - 2008. - С. 57-59.