Всем пациентам при поступлении в медицинскую организацию первоначально был выставлен диагноз «сибирский клещевой тиф».
Новый метод диагностики клещевых риккетсиозов, впервые предложенный Parola P. с соавторами в 2013 г. [4], показал его перспективность: забор смывов с первичного аффекта не травматичен для больных, прост и удобен для медицинских работников. Простота исполнения и высокая диагностическая чувствительность доказывают преимущество метода перед применяемым до этого времени методом биопсии очага некроза [2, 4]. Кроме того, с помощью тест-системы «РеалБест ДНК Rickettsia sibirica/Rickettsia heilongjiangensis» в режиме реального времени можно проводить лабораторную диагностику сразу двух риккетсиозов, возбудители которых, как показало наше исследование, циркулируют порой в одних и тех же очагах (например, в Майминском районе Республики Алтай).
Следует отметить, что генетические маркеры других возбудителей клещевых трансмиссивных инфекций в пробах от больных не были обнаружены.
Образцы смывов от пациентов, содержащие ДНК R. heilongjiangensis, были секвенированы по фрагментам трех генов: gltA, ompB и sca4. Полученные нуклеотидные последовательности были полностью идентичны друг другу для каждого из трех проанализированных генов. Частичные последовательности генов gltA, ompB и sca4 для изолята от одного из пациентов были депонированы в GenBank: изолят R. heilongjiangensis Gorno-Altaysk-2017 (MN537884, MN537885, MN537886).
Впервые клинические случаи заражения R. heilongjiangensis были выявлены в Китае, в провинции Хэйлунцзян в 1992 г., где за 10 лет до этого (в 1982 г.) в клещах D. silvarum был обнаружен возбудитель этого заболевания [5].
В России клинико-эпидемиологическую характеристику клещевого риккетсиоза, вызываемого R. heilongjiangensis, дал О.Ю. Медянников, показавший распространенность этой инфекции на юге Хабаровского края [6, 7]. Позже появилась публикация о случае этого клещевого риккетсиоза в Японии [8].
В Западной Сибири клинические случаи клещевого риккетсиоза, ассоциированного с R. heilongjiangensis, были выявлены почти одновременно в Алтайском крае [9] и в Республике Алтай [2], которые являются сопредельными территориями. В указанных регионах распространены клещи H. concinna основные переносчики этого риккетсиоза. Не исключено также инфицирование людей при присасывании клещей D. silvarum и I. persulcatus, зараженность которых R. heilongjiangensis была установлена [5, 10] и которые также расселены в этих регионах, отличающихся видовым разнообразием иксодид.
Лабораторная диагностика клещевых риккетсиозов в Сибири и на Дальнем Востоке является актуальной проблемой, так как на этих территориях сибирский клещевой тиф превалирует в общей структуре клещевых трансмиссивных инфекций. Данная работа показала, что под маской СКТ может скрываться другой клещевой риккетсиоз, возбудителем которого является R. heilongjiangensis. Не исключено также заражение недавно описанными риккетсиями Rickettsia raoultii и Candidatus Rickettsia tarasevichiae [11]. Одним из современных методов, позволяющих идентифицировать и дифференцировать случаи клещевых риккетсиозов, является метод ПЦР-исследования смывов с первичного аффекта. Набор реагентов для идентификации R. sibirica и R. heilongjiangensis методом ПЦР-РВ (АО «Вектор-Бест»), который был использован нами в вышеописанном исследовании, в настоящее время рекомендован для лабораторной диагностики клещевых риккетсиозов Референс-центром по мониторингу за риккетсиозами, созданным в 2018 г. на базе ФБУН «Омский НИИ природно-очаговых инфекций» Роспотребнадзора [12].
Выводы
Исследование показало, что клещевой риккетсиоз, вызываемый R. heilongjiangensis, распространен в предгорных районах Республики Алтай, где находятся очаги заболевания с участием клещей H. concinna и I. persulcatus. Выявление клещевого риккетсиоза, вызываемого R. heilongjiangensis, в Республике Алтай закономерно поднимает вопросы лабораторной диагностики заболевания и его дифференциальной диагностики с сибирским клещевым тифом. Апробирование метода ПЦР-исследования смывов, забранных у пациентов с места присасывания клеща, показало его удобство для практического применения и эффективность, поэтому он может стать ведущим методом диагностики клещевых риккетсиозов, так как позволяет с высокой точностью идентифицировать возбудителей (при условии наличия у пациента первичного аффекта).
Список литературы
1. Рудаков Н.В., Шпынов С.Н., Транквилевский Д.В., Пакскина Н.Д., Савельев Д.А., Самойленко И.Е., Решетникова Т.А., Кумпан Л.В., Пеньевская Н.А. Особенности эпидемической ситуации по сибирскому клещевому тифу и другим клещевым риккетсиозам в Российской Федерации, прогноз на 2019 г. // Проблемы особо опасных инфекций. 2019. № 1. С. 89-97.
2. Карань Л.С., Мокрецова Е.В., Щучинова, Л.Д., Неталиева С.Ж., Григорьева Я.Е., Федорова М.В., Журенкова О.Б., Томилка Г.С., Малеев В.В. Сравнительный анализ эффективности выявления ДНК риккетсий группы клещевых пятнистых лихорадок в разных видах клинического материала и возможность видовой идентификации возбудителя методом ПЦР // Инфекционные болезни. 2015. № 2. С. 25-29.
3. Бондаренко Е.И., Щучинова Л.Д., Тимофеев Д.И., Мишенова Е.В., Зверева Н.Г., Мокрецова Е.В., Иванов Л.И., Гафарова М.Т., Андаев Е.И., Яковчиц Н.В., Шульковская И.В., Мурмило В.С., Леонова Г.Н., Малышкин М.Ф., Офицеров В.И. Выявление генетических маркеров возбудителей клещевых риккетсиозов в ПЦР с помощью наборов реагентов «РеалБест ДНК Rickettsia species» и «РеалБест ДНК Rickettsia sibirica/ Rickettsia heilongjiangensis» // Новости Вектор-Бест. 2018. №1 (87). С. 2-10.
4. Parola P., Paddock C.D., Socolovschi C., Labruna M.B., Mediannikov O., Kernif T., Abdad M.Y., Stenos J., Bitam I., Fournier P.E., Raoult D. Update on tick-borne rickettsioses around the world: a geographic approach. Clinical Microbiology Reviews. 2013. N 26 (4). P. 657-702.
5. Zhang J.Z., Fan M.Y., Wu Y.M., Fournier P.E., Roux V., and Raoult D. Genetic classification of “Rickettsia heilongjiangii” and “Rickettsia hulinii,” two Chinese spotted fever group rickettsiae. Journal of Clinical Microbiology. 2000. N 38. P. 3498-3501.
6. Медянников О.Ю. Клинико-эпидемиологическая характеристика клещевого риккетсиоза, вызываемого Rickettsia heilongjiangensis, на Дальнем Востоке России. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. Москва, 2004; 24.
7. Mediannikov O.Y., Sidelnikov Y., Ivanov L., Morkretsova E., Fournier P.E., Tarasevich I., Raoult, D.l. Acute tick-borne rickettsiosis caused by Rickettsia heilongjiangensis in Russian Far East. Emerging Infectious Diseases. 2004. N10. P. 810-817.
8. Ando S., Kurosawa M., Sakata A., Fujita H., Sakai K., Sekine M., Katsumi M., Saitou W., Yano Y., Takada N., Takano A., Kawabata H., Hanaoka N., Watanabe H., Kurane I., Kishimoto T. Human Rickettsia heilongjiangensis infection, Japan. Emerging Infectious Diseases Emerg. Infect. Dis. 2010. N 16 (8). P. 1306-1309.
9. Гранитов В.М., Арсеньева И.В., Бесхлебова О.В., Дедков В.Г., Карань Л.С., Васильева О.А., Шпынов С.Н. Первый клинический случай клещевого риккетсиоза, вызванного Rickettsia heilongjiangensis, на территории Сибири // Инфекционные болезни. 2014. № 3. С. 91-94.
10. Igolkina Y., Bondarenko E., Rar V., Epikhina T., Vysochina N., Pukhovskaya N., Tikunov A., Ivanov L., Golovljova I., Ivanov М., Tikunova N. Genetic variability of Rickettsia spp. in Ixodes persulcatus ticks from continental and island areas of the Russian Far East. Ticks Tickborne Dis. 2016. N7. P. 1284-1289.
11. Рудаков Н.В., Шпынов С.Н., Самойленко И.Е., Оберт А.С. Клещевой риккетсиоз и риккетсии группы клещевой пятнистой лихорадки в России. Омск: Омский научный вестник, 2011. 232 с.
12. Рудаков Н.В., Шпынов С.Н., Савельев Д.А., Самойленко И.Е., Решетникова Т.А., Кумпан Л.В., Пеньевская Н.А. Результаты и перспективы работы референс-центра по мониторингу за риккетсиозами ФБУН «Омский НИИ природно-очаговых инфекций» Роспотребнадзора // Бюллетень медицинской науки. 2019. № 2 (14). С. 4-8.