Материал: ПромБТ_2020 0 Фундамент
Требования к буферным растворам
1.Обладать достаточной буферной емкостью в требуемом диапазоне значений рН. – ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ!
2.Обладать высокой степенью чистоты. - ДА
3.Хорошо растворяться в воде и не проникать через биологические мембраны. – ДА / от задачи
4.Обладать устойчивостью к действию ферментов и гидролизу. – от задачи
5.рН буферных растворов должен как можно меньше зависеть от их концентрации, температуры и ионного или солевого состава среды. – ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ!
6.Не оказывать токсического или ингибирующего действия. – от задачи
7.Комплексы буфера с катионами должны быть растворимыми. – от задачи
8.Не поглощать свет в видимой или ультрафиолетовой областях спектра.
– от задачи
Буферные растворы
•Ацетатный, цитратный, боратный
•Аммиачный, ТРИС
•Фосфатный, гидрокарбонатный
Буферные растворы
Фосфатный буфер
Na2 HPO4 2Na HPO42
NaH PO Na H |
PO |
H PO |
H HPO2 |
|||
2 |
4 |
2 |
4 |
2 |
4 |
4 |
|
|
2 |
|
|
||
pH pKa |
lg |
HPO4 |
|
|
pKa |
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
||
|
|
H2 PO4 |
|
|
||
|
Na2 HPO4 |
|
|
lg |
|
||
|
NaH PO |
|
|
|
2 4 |
|
|
Диаграмма распределения форм фосфорной кислоты
|
|
H PO |
|
H PO - |
HPO - |
PO - |
|
|
|
4 |
|||||
|
1 |
3 |
2 |
4 |
4 |
4 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
12 |
14 |
pH
ТРИС
Трис (tris) — сокращённое название трис (гидроксиметил) аминометана.
Является главным компонентом буферных растворов, широко применяющихся в биохимии и молекулярной биологии.
Наиболее распространённые буферы на основе триса — TAE (трис — ацетат — ЭДТА) и TBE (трис — борат — ЭДТА).
Трис биологически инертен и не вступает в реакции, катализируемые большинством ферментов.
pKa = 8,6, что позволяет готовить на его основе буферы в диапазоне pH от 7,0 до 9,2. Физиологические значения pH (7,35—7,45) попадают в этот диапазон.