Лейкоцитарная формула

При проведении клинического анализа крови на ее мазках осуществляется дифференциальный подсчет относительного содержания лейкоцитов отдельных видов. Результаты такого подсчета регистрируются в табличной форме в виде так называемой лейкоцитарной формулы, в которой содержание клеток каждого вида представлено в процентах по отношению к общему количеству лейкоцитов, принятому за 100% (табл.3).

Таблица 3

Лейкоцитарная формула здорового человека

Гранулоциты нейтрофилы

Нейтрофилы составляют 40-75% от общего количества лейкоцитов. На мазке крови диаметр 10-12 мкм. В костном мозге образуются в течение 7 суток, в кровотоке находятся 8-12 часов, а затем выходят в соединительную ткань, где и выполняют основные функции.

Продолжительность жизни – 8 суток.

Выделяют 3 основных возрастных стадии дифференцировки:

1. Юные (0-0,5%) – метамиелоциты – характеризуются бобовидным ядром.

2. Палочкоядерные (3-5%) – незрелые, с подковообразным ядром.

3. Сегментоядерные (60-65%) – зрелые клетки с ядром, состоящим из 3-5 сегментов, соединенных тонкими перемычками. Хроматин сильно конденсирован.

У женщин в ядрах имеются тельца Барра (барабанная палочка), половой хроматин (Х-хромосома).

В клинике оценивают сдвиги лейкоцитарной формулы. Если количество незрелых форм (юных и палочкоядерных) увеличивается, такое состояние называется сдвигом формулы влево, что имеет место при воспалительном процессе.

В цитоплазме имеется 2 вида гранул. В процессе дифференцировки первыми появляются азурофильные гранулы, которые являются лизосомами, и поэтому называются первичными, а затем появляются специфические гранулы (вторичные). В световой микроскоп специфические гранулы окрашиваются в фиолетовый цвет, так как имеют сродство к кислым и основным красителям одновременно.

1). Азурофильные гранулы. Диаметр 0,4-0,8 мкм (рис.5)

Маркеры:

• кислая фосфатаза и пероксидаза.

• миелопероксидаза – усиливает бактериальную активность нейтрофилов.

• арилсульфатаза

2). Специфические гранулы (80-90% всех гранул). Диаметр 0,1-0,3мкм

Маркеры:

• щелочная фосфатаза и катионные белки.

• лактоферрин - обладает бактериостатическим действием

• лизоцим, фагоцитин – обладают антибактериальной активностью

Функции:

1. И.И. Мечников назвал их микрофагами, так как они обладают высокой способностью к фагоцитозу и первыми приходят в очаг воспаления («клетки – разведчики») (макрофаги приходят только вслед за нейтрофилами). Активированные нейтрофилы продуцируют биологически активные вещества простогландины, тромбаксаны, лейкотриены.

2. В течение первых секунд после стимуляции нейтрофилы увеличивают поглощение кислорода и расходуют большое его количество, происходит респираторный (кислородный) взрыв. При этом выделяется перекись водорода, супероксид кислорода, гидроксильный радикал, которые обладают токсическим действием для микроорганизмов.

Рисунок 5. Электронограмма нейтрофила. Ядро состоит из 3-5 сегментов, соединенных тонкими перемычками. В цитоплазме – минимальное количество органелл, но много гранул гликогена. Нейтрофилл содержит небольшое количество азурофильных гранул (специализированных лизосом) и многочисленные более мелкие специфические гранулы.

Эозинофилы

Количество составляет 1-5%.

Диаметр на мазке крови 12-14 мкм. Количество меняется в течение суток (максимально ночью и минимально утром). 3-8 часов циркулируют в крови, а затем переходят в ткани.

Продолжительность жизни - 8-14 дней.

Стадии дифференцировки:

1. юные – незрелые, имеют бобовидное ядро

2. палочкоядерные – незрелые, имеют подковообразное ядро

3. сегментоядерные – зрелые с ядром, состоящим из 2 крупных сегментов, соединенных перемычкой в виде пенсне.

Гранулы эозинофилов делятся на:

1. Специфические:

• эозинофильные гранулы (окрашиваются в розовый цвет), окраска обусловлена наличием белка, богатого аргинином, который образует кристаллоид, выявляемый на электронограмме эозинофила. Диаметр гранул 0,5-1,5 мкм (рис.6) Содержат пероксидазу, гистаминазу, гидролитические ферменты, кислую фосфатазу, цинк, коллагеназу. Являются разновидностью лизосом.

2. Неспецифические (диаметр 0,1-0,5 мкм). Содержат арилсульфатазу, кислую фосфатазу, пероксидазу, катионные белки (стадия развития специфических гранул).

Рисунок 6. Электронограмма эозинофила. Ядро эозинофила обычно образует два крупных сегмента, соединенных тонкой перемычкой. Содержит умеренное количество типичных органелл, гликоген. Крупные гранулы овальной формы содержат электроплотный материал – кристаллоид. Клетка образует цитоплазматические выросты, при помощи которых мигрирует в тканях.

Функции:

1. Участвуют в паразитарных реакциях:

• выделяют содержимое гранул и липидные медиаторы ( простогландины, тромбоксаны, лейкотриены) – оказывают повреждающее действие на паразитов.

2. Участвуют в аллергических и анафилактических реакциях:

• эозинофилы вырабатывают фактор-ингибитор, блокирующий дегрануляцию тучных клеток

• фермент гистаминаза инактивирует гистамин.

• не обладают способностью синтезировать гистамин.

• накапливают гистамин, выделенный базофилами и тучными клетками.

• адсорбируют гистамин на своей поверхности благодаря рецепторам к гистамину.

• арилсульфатаза расщепляет анафилаксин.

Эозинофилия встречается при аллергических реакциях и глистных инвазиях у детей.

Эозинопения – её вызывает возрастание уровня глюкокортикоидных гормонов (кора надпочечников).

3. Участвуют в воспалительных реакциях, обладают фагоцитарной активностью, но в меньшей степени, чем нейтрофилы.

Базофилы

Количество составляет 0,5 - 1 %.

Диаметр на мазке крови человека 11-12 мкм. В крови циркулируют 1-2 суток. Основные функции выполняют в тканях. Обладают способностью к амебоидному движению.

В цитоплазме имеют два вида гранул:

1. Специфические базофильные гранулы. Имеют волнистую ультраструктуру. (рис.7). Диаметр 0,5-1,2 мкм. Обладают метахромазией – свойство клеток окрашиваться в тон, отличный от цвета красителя. Это связано с наличием в гранулах гепарина. Содержат гепарин, гистамин, серотонин, пероксидазу, кислую фосфатазу, гистидиндекарбоксилазу.

2. Азурофильные гранулы (лизосомы).

Ядра базофилов слабодольчатые, окрашиваются менее интенсивно, хроматин более рыхлый, поэтому не выделяют юные, палочкоядерные, сегментоядерные формы.

Рисунок 7. Электронограмма базофила. Ядро слабодольчатое, изогнутое в форме буквы S. В цитоплазме присутствуют все виды органелл, свободные рибосомы, гликоген. Специфические гранулы разнообразны по размерам и по форме. Содержимое гранул неоднородно по плотности.

Функции:

1. Участвуют в аллергических реакциях – синтезируют гистамин из гистидина при помощи фермента гистидиндекарбоксилазы.

2. Участвуют в процессах свертывания крови и способствуют проницаемости сосудов благодаря выбросу гепарина из специфических гранул.

Взаимодействие эозинофилов и тканевых базофилов в аллергических реакциях

Гистамин – производное аминокислоты гистидина, вызывает каскад проявлений аллергических реакций. Аллергические заболевания вызывают выработку иммуноглобулинов Ig E, которые образуются в организме в ответ на попадание антигенов (аллергенов). На поверхности тучных клеток (тканевых базофилов) есть рецепторы, которые легко присоединяют Ig E – антитела и вызывают дегрануляцию базофилов: высвобождается гистамин и другие химические медиаторы ( в том числе и факторы хемотаксиса эозинофилов и нейтрофилов). Гистамин обусловливает проявление типичных симптомов аллергии:

• усиление проницаемости эндотелия капилляров, при этом эндотелиальные клетки отходят друг от друга, вызывая просачивание плазмы через стенку сосуда в соединительную ткань. На коже образуются пузыри - симптом крапивницы;

• возникновение дыхательной недостаточности, так как гистамин вызывает резкое сокращение гладких миоцитов в стенке, мелких бронхов – бронхоспазм, симптом бронхиальной астмы;

• усиление сердцебиений;

• усиление слезо- и слюноотделения.

Благодаря факторам хемотаксиса эозинофилов они «спешат» к месту выброса гистамина и захватывают его, и под действием фермента гистаминазы расщепляют гистамин.

В клинике для лечения аллергии используют антигистаминные препараты.

Агранулоциты лимфоциты Количество составляет 20-35 %.

В зависимости от размеров на мазке крови различают:

• малые – диаметр 4,5-6 мкм

• средние – диаметр 7-10 мкм

• большие – диаметр более 10 мкм

На световом уровне характеризуются интенсивно окрашенным округлым или бобовидной формы ядром и узким ободком слабобазофильной цитоплазмы. В цитоплазме может содержаться небольшое количество азурофилных гранул (рис.8).

Рисунок 8. Электронограмма лимфоцита. Ядро округлое с небольшими выемками или бобовидное. Хроматин сильно конденсирован. Клетка имеет небольшой объем цитоплазмы, образующей узкий ободок вокруг ядра. В цитоплазме присутствует минимальное количество обычных органелл. Лимфоцит образует короткие цитоплазматические отростки.

Функциональная классификация

Лимфоциты – это основные иммунокомпетентные клетки, которые делятся на В- и Т-лимфоциты и NK-клетки, которые не являются ни Т-, ни В-лимфоцитами, называются натуральными киллерами и участвуют в противоопухолевом иммунитете.

В-лимфоциты – были названы так потому, что впервые обнаружены в bursa Fabrisius (Фабрициевой сумке у птиц).

У человека В-лимфоциты образуются в красном костном мозге.

Т-лимфоциты – образуются в тимусе.

Продолжительность жизни достаточно велика: от нескольких месяцев до нескольких лет.

Различают:

1. Долгоживущие – Т-лимфоциты – клетки памяти, обеспечивающие врожденный иммунитет.

2. Короткоживущие – В-лимфоциты.

Морфологию малых лимфоцитов имеют и стволовые клетки крови, поступающие из костного мозга.