Примечание: ? - p?0,05 - достоверность различий при сравнении между опытными и показателями интактной группы
Антиоксидантную активность оценивали в условиях проведения предыдущего опыта путем определения содержания азота оксида в сыворотке крови экспериментальных животных спектрофотометрическим методом. При этом отмечено его повышение после введения растворов холестерина в амарантовом или льняном маслах, что указывало на наличие данной активности.
Антибактериальная активность масла семян амаранта определялась в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов in vitrо. Выраженное противомикробное действия выявлено по отношению к музейным штаммам кишечной и синегнойной палочки.
С учётом выявленной фармакологической активности разработана парафармацевтическая модель мази с маслом амаранта и проведены ее реологические, биофармацевтические и предварительные фармакологические исследования. При этом определены нормы качества данной модели в соответствии с требованиями ОСТ 91500.05.001-00 "Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения" и установлен срок ее годности - 12 месяцев, при хранении при температуре +10°C. На основе этих исследований предложен проект ФСП "Мазь с маслом амаранта".
Общие выводы
1. С использованием современных методов впервые проведён сравнительный анализ отдельных веществ первичного (углеводов, аминокислот, липидов), вторичного (стеринов, терпенов, фенольных соединений, органических кислот) обмена и элементного состава 5 сортов (Воронежский, Кинельский, Кизлярец, Крепыш, Янтарь) амаранта печального, выявлены их микродиагностические признаки и изучены некоторые фармакологические свойства амарантового масла.
2. Методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой в семенах 5 сортов амаранта печального определен 61 элемент, из них 7 макро - (Al, Сa, K, Mg, Na, P, Si), 54 микро - и ультрамикроэлемента (Ag, As, Au, B, Ba, Be, Bi, Br, Ce, Cd, Co, Cs, Cr, Cu, Dy, Er, Eu, Fe, Ga, Gd, Ge, Hf, Hg, Ho, I, La, Li, Lu, Mn, Mo, Nb, Nd. Ni, Pb, Pr, Rb, Sb, Se, Sm, Sn, Sr, Ta, Tb, Th, Ti, Tl, Tm, U, V, W, Y, Yb, Zn, Zr), имеющих определенное значение в хемосистематическом, экологическом, токсикологическом и медицинском аспектах, и отмечено, что содержание токсичных элементов (As, Cd, Hg, Pb) в них не превышало допустимый уровень нормативной документации.
3. При количественном определении аминокислот семян 5 сортов амаранта печального с использованием аминокислотного анализатора обнаружено 18 аминокислот, среди них 7 заменимых (Ala, Gly, Ser, Cys, Asp, Glu, Pro), 3 условно незаменимых (Tyr, His, Arg) и 7 незаменимых (Val, Ile, Leu, Met, Phe, Thr, Lys), среди которых преобладали Glu (15,66 - 18,47 %), Arg (11,96 - 12,46 %), Asp (7,99 - 9,43 %), Gly (7,48 - 8,49 %), Lys (6,22 - 7,36 %) и др.
4. Установлена масличность семян исследуемых сортов амаранта печального (Воронежский - 6,05 %, Кинельский - 4,92 %, Крепыш - 5,95 %, Янтарь - 4,5 %, Кизлярец - 5,9 %) и близость их физико-химических показателей, методами ВЭЖХ и ТСХ определен компонентный состав жирных масел, представленный насыщенными (25-28 %) и полиненасыщенными жирными кислотами (61-74 %), токоферолами (0,55-1,30 %), фосфолипидами (2,48-3,85 %) в зависимости от сорта и отмечено, что по содержанию эссенциальных жирных кислот доминировали сорта Воронежский и Кинельский, по содержанию токоферолов и фосфолипидов - сорт Янтарь.
5. В этанольном извлечении семян сорта Воронежский хромато-масс-спектрометрией идентифицировано 67 соединений, из которых 57 (жирных кислот 18, аминокислот 13, углеводов 6, глицерина и его сложных эфиров 6, витамин Е, сквален, стеринов 4, органических кислот 7, тритерпеновых сапонинов 1 - фриделанон) до и 60 (жирных кислот 23, аминокислот 14, углеводов 9, глицерина и его сложных эфиров 5, витамин Е, сквален, органических кислот 7) после экстракции жирного масла гексаном с пищевым нефрасом. Определено, что до экстракции в семенах в общей сумме наиболее значима доля (более 75 %) жирных кислот и сквалена (свыше 10 %), гораздо меньше углеводов (до 6 %) и стеринов (свыше 4 %), в незначительных количествах обнаружены органические кислоты (менее 1 %), глицерин и его сложные эфиры (более 0,3 %) и аминокислоты (в пределах 0,3 %) и отмечено, что содержание жирных кислот после экстракции уменьшилось в 1,5 раза, сквалена - в 2,5 раза, витамина Е - в 25 раз, стерины и фриделанон извлеклись полностью.
6. В результате фармакогностического изучения семян амаранта печального выявлены их основные микродиагностические признаки (кожура - большей частью однослойная со слегка утолщенными стенками клеток, хорошо развитый зародыш, расположенный кольцом по краю семени (диска) вокруг эндосперма), определены нормы качества семян амаранта печального и составлен проект ФСП "Амаранта семена" и ТУ 9719-003-77872064-2011 "Зерно амаранта".
7. В эксперименте на животных изучено гиперхолестеринемическое, антиоксидантное, бактерицидное действие амарантового масла и установлено, что оно не обладало практически раздражающим действием и относится к безопасным соединениям (IV класс токсичности).
8. Разработана парафармацевтическая модель "Мазь с маслом амаранта", которая обладала вязкопластичностью, тиксотропностью. структурированностью и оказывала выраженный ранозаживляющий эффект, вероятно, обусловленный антиоксидантным и бактерицидным действием, определены нормы ее качества, положенные в основу проекта ФСП "Мазь с маслом амаранта"
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Коренская, И.М. Изучение фосфолипидного состава отходов амарантового масла / И.М. Коренская, Е.Ф. Сафонова, А.М. Макеев и др. // Новые и нетрадиционные растения и перспектива их использования: мат-лы IV Междун. симп. (20-24 июня 2001г., Пущино). - Москва, 2001. - С.99-101.
2. Макеев, А.М. Амарантовое масло - уникальное природное лекарственное средство / А.М. Макеев, И.М. Коренская, А.А. Кунин, и др. // Растительные ресурсы для здоровья человека (возделывание, переработка, маркетинг): мат-лы I Междун. науч. - практ. конф.23-27 сентября 2002 г. - Москва, Сергиев Посад, 2002. - С.255-266.
3. Коренская, И.М. Влияние различных доз амарантового масла на активность аминотрансфераз и щелочной фосфатазы в сыворотке крови крыс / И.М. Коренская, А.П. Салей, З.Д. Мухаммед // Физиология и психофизиология мотиваций: межрегиональный сборник научных работ, посв.85-летию образования ВГУ. - Воронеж, 2003. - С.117-119.
4. Коренская, И.М. Амарантовое масло снижает содержание общего холестерина в крови / И.М. Коренская, А.П. Салей, А.М. Макеев // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования: мат-лы Межрегион. науч. - мет. конференции "Фармобразование 2003" (21-23 апр. 2003). - Воронеж, 2003. - С.178-180.
5. Близнецова, Г.Н. Изучение антиоксидантного действия амарантового и льняного масел в эксперименте / Г.Н. Близнецова, И.М. Коренская, А.Н. Постыка // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования: мат-лы.2-й Всеросс. науч. - мет. конф. "Фармобразование 2005" (20-22 апр. 2005). - Воронеж, 2005. - С.300-301.
6. Коренская, И.М. Исследование противоожоговой активности амарантового масла в эксперименте / И.М. Коренская, Н.П. Ивановская, И.Е. Измалкова // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования: матер.2-й Всерос. науч. - мет. конференции "Фармобразование 2005" (20-22 апр. 2005). - Воронеж, 2005. - С.346-347.
7. Коренская, И.М. Сравнительный фармакологический анализ влияния амарантового и льняного масел на динамику липидного обмена крыс в условиях холестериновой нагрузки / И.М. Коренская, В.Ю. Сулин, Е.Ф. Сафонова, А.Н. Постыка // Вестник Воронеж. гос. ун-та: серия химия, биология, фармация, 2006. - № 1. - С. 204-208.
8. Сафонова, Е.Ф. Изучение стабильности и сроков годности масла семян амаранта / Е.Ф. Сафонова, И.М. Коренская, А.И. Сливкин, О.В. Фролова // Вестник Воронеж. гос. ун-та: серия химия, биология, фармация, 2006. - № 1. - С.213-215.
9. Близнецова, Г.Н. Роль процессов свободнорадикального окисления в механизме гепатопротекторного действия масла из семян амаранта / Г.Н. Близнецова, М.И. Рецкий, И.М. Коренская и др. // Биомедицина, 2006. - № 2. - С.105-112.
10. Коренская, И.М. Изучение элементного состава семян амаранта гибридного / И.М. Коренская, Н.П. Ивановская // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Создание новых физиологически активных веществ: мат-лы.3-й Всерос. науч. - мет. конференции (22-24 марта 2007). - Воронеж, 2007. - С.175-176.
11. Коренская, И.М. Фармакогностический анализ семян амаранта гибридного / И.М. Коренская, И.Е. Измалкова // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Создание новых физиологически активных веществ: мат-лы 3-й Всерос. науч. - мет. конференции (22-24 марта 2007). - Воронеж, 2007. - С.177-179.
12. Дзюба, В.Ф. Биофармацевтические аспекты разработки мази с маслом амаранта для лечения ожоговых инфицированных ран / В.Ф. Дзюба, Е.Ф. Сафонова, И.М. Коренская, И.А. Свешникова // Вестник Воронеж. гос. ун-та: серия химия, биология, фармация, 2007. - № 1. - С.142-146.
13. Коренская, И.М. Биофармацевтическое исследования лекарственных форм с маслом амаранта / И.М. Коренская, В.Ф. Дзюба, Е.Ф. Сафонова // Мед. - фармац. конгресс и 14-я междун. фармац. выставка "Аптека 2007" (23-26 октября 2007). - Москва, 2007. - С.128-130.
14. Коренская, И.М. Изучение антибактериальной активности амарантового масла / И.М. Коренская, И.Е. Измалкова // Проблемы здоровьесбережения школьников и студентов. Новые науч. тенд. в медицине и фармации: мат-лы Междун. конф. (6-7 февраля 2008). - Воронеж, 2008. - С.226-227.
15. Коренская, И.М. Изучение ранозаживляющего действия масла из семян амаранта / И.М. Коренская, Н.П. Ивановская // Проблемы здоровьесбережения школьников и студентов. Новые науч. тенденции в медицине и фармации: мат-лы междун. конф. (6-7 февраля 2008). - Воронеж, 2008. - С.223-225.
16. Коренская, И.М. Создание ректальных суппозиториев с маслом амаранта / И.М. Коренская, Ж.М. Козлова, И.А. Девяткина и др. // Вестник ВГУ: серия химия, биология, фармация, 2008. - № 1. - С.145-150.
17. Коренская, И.М. Сравнительное изучение содержания белка и аминокислотного состава семян различных сортов амаранта гибридного / И.М. Коренская, Л.А. Мирошниченко, И.Е. Измалкова // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ: мат-лы 4-й Всерос. с междун. участием науч. - мет. конф. (20-22 апреля 2010). - Воронеж, 2010. - С. 209-212.
18. Золоедов, В.И. Амарантовое масло в диетотерапии сахарного диабета 2 типа / В.И. Золоедов, Е.Н. Офицеров, Л.А. Мирошниченко, И.М. Коренская // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ: мат-лы 4-й Всерос. с междун. участием науч. - мет. конф. (20-22 апреля 2010). - Воронеж, 2010. - С.159-161.
19. Коренская, И.М. Анатомо-морфологическое изучение семян амаранта печального / И.М. Коренская, Н.Н. Сапронова // Вестник Воронеж. гос. ун-та: серия химия, биология, фармация, 2010. - № 2. - С.150-153.
20. Коренская, И.М. Исследование состава и физико-химических показателей жирного масла, полученного из различных сортов семян амаранта печального / И. М, Коренская, Н.С. Фурса, А.А. Назарова и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2011. - Вып.66. - С.119-121.
21. Коренская, И.М. Жирнокислотный состав масла, полученного из различных сортов семян амаранта печального / И.М. Коренская, Н.С. Фурса, И.Е. Измалкова, и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2011. - Вып.66. - С.118-119.
22. Коренская, И.М. Сравнительная характеристика жирнокислотного состава и отдельных биологически активных веществ жирного масла различных семян амаранта / И.М. Коренская, В.Д. Ефремова // Актуальные вопросы медицинской науки: сб. науч. тр. - Ярославль, 2011. - С.310-311.
23. Коренская, И.М. Элементный состав и липофильные вещества шрота семян сорта Воронежский амаранта угрюмого / И.М. Коренская, В.Г. Корниевская, Н.С. Фурса // "Науково-технiчний прогрес i оптимiзацiя технологiчних процесiв створення лiкарських препаратiв: мат-ли 4-ої науково-технiчноп Конф. з мiжнар. участю (29-30 вересня 2011 року). - Тернопiль: ТДМУ "Укрмедкнига", 2011. - С.42.
24. Коренская, И.М. Изучение аминокислотного и углеводного состава семян сорта Воронежский амаранта печального, выращиваемого в Воронежской области / И.М. Коренская, Н.С. Фурса, Л.А. Мирошниченко // Вестник ВГУ: серия химия, биология, фармация, 2011. - № 2 - С. 192-198.
25. Коренская, И.М. Хромато-масс-спектрометрическое изучение жирного масла из семян растения Amaranthus hypochondriacus L. / И.М. Коренская, Н.С. Фурса, Л.А. Мирошниченко // Фармация, 2011. - № 8. - С.16-18.
26. Джурко, Ю.А. Физико-химическое изучение липофильных веществ семян амаранта печального сорта Воронежский до и после экстракции гексаном / Ю.А. Джурко, А.А. Парфенов, И.М. Коренская и др. // Materiбly VIII mezinбrodnн vмdesko-praktikб konference "Modernн vymoћenosti vмdy - 2012". - Praha, 2012. - S.3-6.
27. Парфенов, А.А. Изучение аминокислотного состава семян амаранта печального сорта Воронежский до и после экстракции гексаном / А.А. Парфенов, Ю.А. Джурко, И.М. Коренская и др. // Материали за 8-а международна научна практична конференция: "Бъдещите изследвания". - София, 2012. - Т.28. - С.49-50.
28. Парфенов, А.А. ГХ-МС-анализ жирнокислотного состава шрота семян сорта Воронежский амаранта красноколосого / А.А. Парфенов, Ю.А. Джурко, И.М. Коренская, А.Л. Исаханов, Н.С. Фурса // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск: Пятигорская ГФА. - 2012. - Вып.67. - С.264-265.