Реферат: Гемограмма и лейкоцитарная формула, методы их подсчета, сравнительная характеристика у домашних и диких животных

Башкирский государственный аграрный университет

Реферат по дисциплине "Цитология, гистология, эмбриология"

Гемограмма и лейкоцитарная формула, методы их подсчета, сравнительная характеристика у домашних и диких животных

Уфа - 2021

Введение

Любое углубленное клиническое исследование, как на этапе диагностики, так и в ходе лечения обязательно должно включать в себя анализ крови. Гематологические исследования позволяют в комплексе с клиническими исследованиями диагностировать скрытые, до- и субклинические формы заболевания, определять возникшие осложнения при том или ином заболевании, дифференцировать сходные болезни, судить о тяжести болезни, о функциональном состоянии отдельных органов, следить за ходом лечения, прогнозировать исход заболеваний. Максимальное извлечение информации из результатов анализа позволит врачу сориентироваться при выборе дальнейших специфических, сложных и дорогостоящих методов исследования, избежать, например, необоснованной пункции костного мозга.

Лейкоциты формируют в живом организме мощный кровяной и тканевый барьеры против микробной, вирусной и паразитарной инфекций, поддерживают тканевой гомеостазис (постоянство) и регенерацию тканей.

Морфология клеток крови

Кровь -- это биологическая жидкость организма, состоящая из плазмы и клеток крови. К клеткам крови, или ее форменным элементам, относятся эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.

Лейкоциты, или «белые кровяные тельца» (Л, White Blood Cells, WBC) -- это гетерогенная группа ядросодержащих клеток периферической крови, отвечающих за функцию иммунитета. Лейкоциты в окрашенных по Романовскому мазках крови различаются по форме ядра (округлое или сегментированное), цвету цитоплазмы, наличию или отсутствию зернистости и ее характеру. В зависимости от наличия специфической зернистости все лейкоциты делят на клетки с зернистостью в цитоплазме (гранулоциты) и без зернистости(агранулоциты). Размеры лейкоцитов колеблются между 6мкм (малые лимфоциты) и 14 мкм (моноциты).

К агранулоцитам относят лимфоциты и моноциты.

Лимфоциты являются вторым по численности клеточным типом в крови большинства животных, а у жвачных -первым. Обычно это округлые клетки с круглым, овальным или слегка вытянутым ядром. Цитоплазма этих клеток может содержать небольшое количество неспецифических единичных, чаще мелких, пылевидных, реже крупных, азурофильных (розово-фиолетовых) гранул. Хроматин состоит из гладких зон просветления, перемежающихся с более плотными и глыбообразными образованиями.

Моноциты могут как присутствовать так и остутствовать в периферической крови. Ядра их могут быть овальными, бобовидными, иметь выпуклости и дольчатость. Ядерный хроматин мелкий или кружевной. В серо-голубой цитоплазме содержится множество отдельных вакуолей различного размера.

Термином «гранулоциты» называют три вида клеток,различающихся характером специфической зернистости.

Обильная мелкая бледно-фиолетовая («нейтрофильная») зернистость типична для нейтрофилов. Крупная необильная,темно-фиолетовая («базофильная») зернистость отличает базофилы.

Крупная обильная неравномерная розово-оранжевая, занимающая всю цитоплазму клетки («эозинофильная») зернистость является признаком эозинофилов.

Наиболее многочисленными клетками в периферической крови большинства млекопитающих являются сегментоядерные нейтрофилы. Их ядро разделено перетяжками на 3-5 сегментов либо в виде палочки или дуги (палочкоядерные). Цитоплазма окрашиватеся от светло-голубого до розового, иногда с бледными плохо различимыми пылевидными зернами.

Эозинофилы в периферической крови могут присутствовать в различных количествах либо отсутствовать. Ядра их напоминают ядра нейтрофилов, однако сегментированность не так выражена. Цитоплазма окрашивается в светло-голубой цвет, содержит красноватые или красновато-оранжевые зерна. У собак они округлые, у кошек - палочковидные, у лошадей - крупные округлые или овальные.

Базофилы редко обнаруживаются в периферической крови домашних животных. Ядра их также сегментированы, базофильные зерна могут быть различных размеров.

Лейкоциты выполняют защитную функцию в организме(иммунитет). Выделяют два вида иммунитета -- специфический и неспецифический. Одно из проявлений неспецифического иммунитета -- способность нейтрофилов, моноцитов и тканевых макрофагов (ими становятся моноциты после выхода за пределы кровеносного русла) фагоцитировать с последующим лизисом микробные объекты, токсины и клеточный детрит. Эозинофилы обеспечивают противопаразитарную защиту и участвуют в аллергических реакциях. Базофилы также участвуют в аллергических реакциях, прежде всего IgE-зависимых.

Продолжительность жизни лейкоцитов, как и их внешний вид и функция, весьма различна. Нейтрофилы циркулируют в крови 4-10 ч, далее выходят в ткани. Моноциты циркулируют в крови 72 ч, далее также выходят в ткани, где превращаются в мигрирующие или фиксированные макрофаги.

Процессы разрушения лейкоцитов изучены недостаточно и очень разнообразны. Часть белых клеток гибнет в сосудистом русле и местах воспаления (внедрения патогенного агента) и выводится из организма через желудочно-кишечный тракт, с мочой, слюной и т. д. Большинство лей-коцитов разрушается в легких и селезенке.

В норме все клетки периферической крови являются конечными стадиями дифференцировки определенных рядов кроветворения, не способны к делению, имеют ограниченную продолжительность жизни. Исключение составляют моноциты, превращающиеся после выхода из кровяного русла в тканевые макрофаги./2,3,4/

Анализ гемограммы

Гемограмма - лабораторное исследование периферической крови, представляющее собой качественную и количественную характеристику клеток; включает количество эритроцитов, концентрацию гемоглобина, эритроцитарные индексы, количество лейкоцитов и их относительный состав (лейкоцитарная формула), количество тромбоцитов, СОЭ, морфологическое описание клеток.

Анализ гемограммы включает поэтапное изучение состояния системы эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов на основании оценки данных показателей периферической крови с целями:

- установления типа нарушений в системе форменных элементов крови (наличие анемии, эритроцитоза, лейкоцитоза, лейкопении, лейкоза, тромбоцитоза, тромбоцитопении);

- установления каждого отдельного вида таких нарушений (вида анемии по одному или нескольким из пяти известных критериев;

- вида лейкоцитоза и лейкопении - по типу лейкоцитов, их абсолютному содержанию;

- лейкоза - на основании типирования бластов, что становится возможным при условии знания их этиологии, патогенеза, особенностей картины крови, костного мозга, а также отдельных гематологических симптомов и признаков, как-то: абсолютный и относительный лейкоцитозы и лейкопении, агранулоцитозы, костномозговая недостаточность, сдвиги лейкоцитарной формулы и индекс ядерного сдвига нейтрофилов, лейкемоидные реакции и т.п.;

- распознавания определенных нозологических форм патологии крови, например, анемии Аддисона-Бирмера, анемии Минковского Шоффара, болезни Вакеза и др.;

- предположения характера заболевания и процессов, при которых имеют место установленные гематологические нарушения и их прогнозе.

Анализ гемограммы способствует правильному выбору этиопатогенетической коррекции выявленных гематологических нарушений. /3/

Таблица1

Гемограмма не отражает специфичности патологического процесса, она указывает на характер биологической реакции кроветворных органов. Изменения в гемограмме могут быть во всех группах лейкоцитов. Эозинофилия (увеличение эозинофилов) встречается при многих инфекционных и инвазионных заболеваниях, а также при интоксикациях. В случаях очень тяжелого заболевания эозинофилия переходит в эозинопепию (уменьшение количества эозинофилов). При инфекционных заболеваниях эозинофилия связана с расстройством вегетативной нервной системы, с повышением тонуса блуждающего нерва.

Подсчет количества лейкоцитов

кров млекопитающие клетка

Для подсчета лейкоцитов предложены два метода:

1. Подсчет в счетной камере (ошибка метода +7%).

2. Подсчет в автоматических счетчиках (ошибка +2%).

Лейкоциты (белые кровяные тельца, white blood cells, WBC) формируют в организме млекопитающих мощный кровяной и тканевой барьеры против микробной, вирусной и паразитарной инфекций, поддерживают тканевой гомеостазис (постоянство) и регенерацию тканей.

По морфологическим признакам (вид ядра, наличие и характер цитоплазматических

Порядок определения. От каждого животного целесообразно готовить 2--3 образца разведенной крови. Исследуемую кровь разводят в 20 раз. Для этого в лейкоцитарный меланжер набирают кровь до метки 0,5 и разбавляют жидкость Тюрка, наполняя меланжер до метки 11. Заполненный меланжер энергично встряхивают в течение 20-30секунд для равномерного распределения жидкости.

Или в сухую пробирку (пенициллиновый флакончик) вносят 0,4 мл 3 или 5 % раствора уксусной кислоты, подкрашенного метиленовым синим (жидкость Тюрка). Капиллярной пипеткой от гемометра Сали набирают 0,02 мл крови, конец пипетки тщательно протирают вначале увлажненной, а затем сухой ватой или марлей. Переносят кровь в пробирку, осторожно выдувая. Пипетку ополаскивают жидкостью Тюрка. Кровь в пробирке тщательно перемешивают, закрывают и оставляют стоять на 4 мин, периодически перемешивая содержимое.

Счетную камеру Горяева (Прил.А, Рис.1А, Б) предварительно тщательно обезжиривают спиртом, промывают дистиллированной водой и высушивают под феном, протирают мягкой фланелью. Чистое сухое покровное стекло притирают к камере так, чтобы появились радужные кольца. Кровь в пробирке снова перемешивают стеклянной палочкой. Берут каплю крови Пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой и заполняют сч?тную камеру.

Лейкоцитарная формула

Подсчитывают лейкоциты через 1 мин после заполнения камеры, когда осядут клетки крови, пользуясь малым увеличением микроскопа при затемненном поле, для чего опускают конденсор или суживают диафрагму. Подсчитывают лейкоциты в 100 больших (1600 малых) квадратах расположенных по всей сетке группами по четыре. Считать лейкоциты следует не позже 2-4 ч после взятия крови. Расч?т числа лейкоцитов в 1 мкл (Х) проводят по формуле:

X = т.е. Х = n х 50

где n - число сосчитанных лейкоцитов;

1600 - среднеарифметическое число лейкоцитов в одном малом квадрате;

4000 - во столько раз объ?м одного малого квадрата меньше 1 мкл;

20 - разведение крови.

Ошибка при подсчете составляет в среднем +7 %. Наиболее вероятные источники ошибок: - травмирование тканей ушной раковины при выжимании, выдавливании крови; - неравномерное перемешивание крови; - не очень чистый микрокапилляр и др. /3/

Сравнительная характеристика лейкоцитов у домашних животных

Каждый лабораторный работник должен выявить собственную ошибку путем многократных анализов одной и той же пробы, включая взятие крови. Для выражения количества лейкоцитов в единицах Международной системы (СИ) их число в тысячах следует умножить на 109 . Например, 6,25 х 109 /л.

Табл. 1 Лейкограмма взрослых животных (средние данные), %.

Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая инфекционная болезнь, вызываемая вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС). Лейкозом болеет крупный рогатый скот всех возрастов. Клинически болезнь проявляется чаще у животных в возрасте старше 4 лет.

Абсолютное количество лимфоидных элементов в 1 мкл крови определяют путем умножения количества лейкоцитов на общий процент лимфоцитов и молодых клеток в лейкоцитарной формуле и деления полученного произведения на 100. Показатель абсолютного количества лимфоцитов оценивают затем по "лейкозному ключу", указанному в таблице 2.

Количество лейкоцитов и лимфоцитов в 1 мкл крови у здорового, подозрительного по заболеванию и больного лейкозом крупного рогатого скота дает основание, согласно "лейкозному ключу", указанному в таблице, оценивать статус животного по лейкозу.