Лабораторные показатели крови и молока коров, инфицированных вирусом лейкоза
Р.А. Мерзленко,
С.Н. Беляева
Аннотация
Первостепенной задачей в молочном скотоводстве является производство экологически чистого молока и изучение всех факторов, влияющих на безопасность и качество продукта. В связи с ужесточением нормативных документов, предъявляемых к качеству животноводческой продукции и вступлением в силу новых ветеринарных требований на территории России, особое внимание уделяется биологической безопасности животноводческой продукции.
Одним из таких актуальнейших инфекционных вирусных заболеваний является лейкоз крупного рогатого скота. Поэтому изучение лабораторных показателей крови и молока в процессе проведения плановых диагностических серологических исследований служит дополнительным ключом для выявления и изоляции коров, инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота.
Для характеристики тяжести развития патологического лейкозного процесса у коров мы рекомендуем использовать определение соотношения агранулоцитов к гранулоцитам с применением автоматических гематологических анализаторов, позволяющих судить о степени и глубине поражения иммунных клеток (лимфоцитов), фагоцитов (моноцитов) и степени развития воспалительных процессов (гранулоцитов). У инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота животных происходит нарушение обменных процессов в их организме, что проявляется диспротеинемией (уменьшением содержания общего белка, альбуминов, глобулинов, соотношения альбумины/глобулины); снижением концентрации мочевины и глюкозы в сыворотке крови; повышением активности ферментов аминотрансферазы, креатинина и щелочной фосфатазы. В молоке от таких коров, по сравнению с молоком, полученным от здоровых коров, снижается содержание белка, и уменьшается титруемая кислотность.
Таким образом, для успешного оздоровления от лейкозной инфекции в хозяйствах рекомендуется проводить дополнительные гематологические и биохимические исследования крови и определение физико-химических показателей качества молока, которые дополняют лабораторное тестирование при лейкозе крупного рогатого скота в начальной стадии развития инкубационного периода.
Ключевые слова: лейкоз крупного рогатого скота, вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), диагностика лейкоза крупного рогатого скота, биохимические показатели крови и молока, гематологические показатели, естественная резистентность.
Abstract
Laborarv parameters of blood and milk of cows infected with leukemia virus
The primary task in dairy cattle breeding is the production of environmentally friendly milk and the study of all factors affecting the safety and quality of the starting product. In connection with the tightening of regulatory documents for the quality of livestock products and the entry into force of new veterinary requirements in Russia, special attention is paid to the biological safety of livestock products.
One of these most relevant infectious viral diseases is cattle leukemia. Therefore, the study of laboratory blood and milk values in the process of conducting planned diagnostic serological researches serves as an additional key for the detection and isolation of cows infected with bovine leukemia virus.
To characterize the severity of the development of the pathological leukemia process in cows, we recommend using the determination of the ratio of agranulocytes to granulocytes using automatic hematological analyzers to judge the degree and depth of damage to immune cells (lymphocytes), phagocytes (monocytes) and the degree of development of inflammatory processes (granulocytes). In animals infected with the bovine leukemia virus (BLV, EBL), metabolic processes in their bodies are disrupted, which is manifested by dysproteinemia (a decrease in the content of total protein, albumins, globulins, albumin/globulin ratio); reduced serum urea and glucose concentration; increased activity of aminotransferase, creatinine and alkaline phosphatase enzymes. In milk from such cows, compared with milk obtained from healthy cows, the protein content decreases and the titrated acidity decreases.
Thus, for successful recovery from leukemia infection, it is recommended in farms to conduct additional hematological and biochemical studies of blood and physicochemical indicators of milk, which complement laboratory testing in cattle leukemia in the initial stage of incubation period development.
Keywords: bovine leukemia virus, leukaemia in cattle (BLV, EBL), diagnosis of bovine leukemia, hematological parameters of blood, biochemical parameters of blood and milk.
Введение
В последние годы проблема лейкоза крупного рогатого скота находится в центре внимания ветеринарной науки. Многочисленные публикации и данные официальной ветеринарной статистики свидетельствуют о том, что среди хронических инфекционных заболеваний крупного рогатого скота лейкоз по массовости проявления занимает одно из ведущих мест [4, 15, 21].
Решение проблемы лейкоза нацелено на обеспечение защиты животных, а также на повышение эффективности молочного животноводства [3, 5, 8, 17]. Экономические потери от лейкоза обусловлены не только удалением больного скота, но и устойчивым состоянием у животных иммунодепрессии, а также рисков развития патологий инфекционной этиологии, включающих поражения кроветворной, иммунной и репродуктивной систем [3, 5, 9, 15, 19, 21, 22].
Лейкоз крупного рогатого скота наносит колоссальный ущерб хозяйствам и владельцам скота, что связано с выбраковкой и убоем животных, утилизацией пораженных органов, а иногда и целых туш, недополучением молодняка, молочной продукции, а также с увеличивающимися расходами на проведение комплекса противолейкозных мероприятий и диагностических исследований. Кроме того, в молоке, полученном от инфицированных животных, изменяются физико-химические показатели аминокислотного состава, содержания белков, лактозы и казеина. Такое молоко, являясь не сыропригодным по составу и технологическим свойствам, потенциально опасно для человека ввиду накопления канцерогенных метаболитов при развитии онкогенеза у инфицированных коров [2, 10, 15, 20].
Лейкоз крупного рогатого скота - медленно протекающая хроническая инфекционная болезнь, вызываемая вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) [12].
Возбудитель - онкогенный РНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Retroviridae, рода Deltaretrovirus [20]. Источник возбудителя инфекции - животное, зараженное ВЛКРС. Факторы передачи-кровь, молоко и другие секреты, и экскреты, содержащие лимфоидные клетки, инфицированные ВЛКРС. Заражение может происходить при совместном содержании здоровых и инфицированных ВЛКРС животных [12].
Инкубационый период болезни составляет от 2 месяцев до 6 лет. Болезнь протекает вначале бессимптомно у крупного рогатого скота, клинические признаки отсутствуют, но при этом выявляются антитела против вируса лейкоза крупного рогатого скота, которые диагностируются в серологической реакции - РИД (реакция иммунодиффузии). Затем это заболевание проявляется персистентным лимфоцитозом и (или) образованием опухолевидных разрастаний в кроветворных и других органах и тканях у животных, которые, как правило, старше четырех лет [13, 20].
Лейкозы - это системные поражения кроветворения, включающие лимфоидную, мие- лоидную, моноцитарную и недифференцированные формы. Гематосаркомы сопровождаются опухолевым ростом, к ним относятся: лимфосаркома, ретикулосаркома, лимфогрануломатоз и миеломная болезнь [12].
Диагностические исследования на лейкоз проводятся серологическими, молекулярно-биологическими, гематологическими, клиническими, патоморфологическими методами и методом биопроб [12].
Согласно Ветеринарным правилам, от восприимчивого поголовья животных должны отбираться пробы биологического и (или) патологического материала:
- от восприимчивых животных старше 6 мес. - пробы крови для серологических исследований. В случае положительного результата при серологическом исследовании коров отбираются пробы крови для гематологического метода, но не позднее семи календарных дней со дня получения подтверждающих анализов;
- от восприимчивых животных в возрасте от 15 календарных дней до 6 мес. включительно - пробы крови для молекулярно-биологических исследований;
- от трупов восприимчивых животных должны отбираться фрагменты селезенки, лимфатических узлов, грудной кости, печени, почек, легких, сердца, органов пищеварения (в случае их поражения), матки и скелетных мышц. Патологический материал отбирается в случае, если с момента гибели или убоя восприимчивого животного прошло не более 8 часов [20].
Реакция иммунодиффузии (РИД) - это основной серологический метод диагностики лейкоза крупного рогатого скота. Метод основан на обнаружении в сыворотке крови животных специфических преципитирующих антител с антигеном вируса лейкоза крупного рогатого скота. Молекулярно-биологические исследования должны проводиться методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) [12].
В большинстве стран Европы с 1988 года прописано применение РИД и иммуноферментного анализа (ИФА) для выявления животных, инфицированных лейкозом крупного рогатого скота [13, 26].
В настоящее время изучено влияние колострального иммунитета на серологические диагностические исследования молодняка крупного рогатого скота, которое обуславливает появление ложноположительных результатов. Учитывая этот феномен, с 15-дневного возраста телят исследуют с использованием метода ПТЦР-диагностики [13, 20, 30].
Существенно ускорился процесс эффективного оздоровления поголовья крупного рогатого скота от лейкоза благодаря использованию разработанных серологических диагностических тест-систем, способствующих быстрому выявлению инфицированных особей при осуществлении оздоровительных, а также профилактических мероприятий [13, 23, 25, 26].
Базовым серологическим тестом для выявления инфицированного вирусом лейкоза крупного рогатого скота является РИД и ИФА, где в качестве испытуемого клинического материала используются сыворотки крови и молока с последующим применением гематологического теста [13, 20].
Главной проблемой в проведении противолейкозных оздоровительных мероприятий в хозяйствах является позднее выявление инфицированных животных, доведение животных до гематологической стадии развития инфекционного процесса и фрагментарное использование молекулярно-генетических тестов [5, 13, 23, 30].
В борьбе с лейкозом не существует биологических и химических средств его профилактики. Поэтому мероприятия по профилактике и борьбе с данным недугом основаны на выявлении больных и инфицированных животных во время проведения диагностических исследований и вывода их из стада согласно действующим Ветеринарным правилам [20].
Важную роль в ликвидации лейкоза играют организационно-хозяйственные и административные мероприятия. Для достижения положительных результатов в борьбе с лейкозом требуется активное участие не только ветеринарной службы, но и всех заинтересованных в оздоровлении юридических и физических лиц, главным образом владельцев животных и местной администрации [24].
Эффективность выявления заболевших животных на более ранних этапах развития инкубационного периода при медленно протекающих инфекциях является залогом формирования устойчивого благополучия по лейкозу крупного рогатого скота. Поиск альтернативных методов борьбы с лейкозом крупного рогатого скота привел к разработке и использованию средств общей профилактики. Существуют многочисленные попытки по созданию эффективных вакцин для профилактики лейкоза [27-35].
Однако изолирование инфицированных животных от неинфицированных, на основании результатов серологических исследований, остается основным способом борьбы с этой болезнью во всем мире, в том числе и в РФ [5, 8, 20].
Современные требования к оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза требуют изучения гематологического и биохимического состава крови у инфицированных вирусом животных, находящихся в начальных стадиях развития инфекционного процесса.
Мировые подходы к разработке биохимического тестирования изменений показателей крови при лейкозе крупного рогатого скота заключаются в изучении показателей аспартата-минотрансферазы (АсАТ), аланинаминотрансферазы (АлАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), общего белка, альбуминов, глобулинов, мочевины, глюкозы и др. показателей, характеризующих уровень развития онкогенного процесса, а также степень генерализации нефункциональных раковых клеток в организме инфицированных животных.
Актуальность исследований обусловлена комплексностью использования на мировом уровне изменчивости гематологических и биохимических процессов в крови и молоке инфицированных вирусом лейкоза животных [2, 6, 7, 10, 11, 16, 18].
Целью наших исследований было определение презентабельных и информативных гематологических и биохимических показателей крови и молока животных для разработки лабораторного тестирования при лейкозе крупного рогатого скота с начальной стадией развития инкубационного периода.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
- выявить изменения в гематологических и биохимических показателях проб крови;
- изучить физико-химические показатели молока коров, инфицированных вирусом лейкоза, на начальных стадиях развития инкубационного периода.
Результаты исследований
С целью изучения изменений в гематологических и биохимических показателях крови и молока инфицированных вирусом лейкоза животных нами был проведен научно-хозяйственный опытна коровах с начальной стадией развития инкубационного периода ВЛ КРС. Лабораторные исследования выполнялись в условиях испытательной лаборатории ФГБОУ ВО Белгородский ГАУ. Объектом исследования были лабораторные показатели крови и молока от коров черно-пестрой породы: РИД-положительных животных в бессимптомную стадию лейкоза крупного рогатого скота и от РИД-отрицательных животных.