Материал: Ответы к итоговой МБ №4 ООИ (КубГМУ Live)

Токсины бордетелл а) Пертуссис-токсин (син. пертуссин, коклюшный токсин, лимфоцитоз-стимулирующий

фактор, гистамин-сенсибилизирующий фактор) стимулирует работу аденилатциклазы в клетках респираторного тракта путем ингибирования регуляторного белка G — трансдуцина, который является белком клетки-мишени.

Пертуссис-токсин повышает проницаемость сосудов; усиливает чувствительность к гистамину и серотонину; стимулирует миграцию лимфоцитов, моноцитов; подавляет киллингактивность фагоцитов; может вызывать повышение синтеза инсулина и, как следствие, сни жение концентрации глюкозы в крови и пр. Пертуссин является экзотоксином, обладает высокой иммуногенностью. Под действием формалина он превращается в анатоксин.

б) Внеклеточная аденилатциклаза (син.: аденилатциклазный гемолизин) за счет поступления внутрь эпителиоцитов дыхательных путей еще более усиливает синтез и накопление цАМФ внутри клеток хозяина. Этот фактор патогенности бордетелл также подавляет хемотаксис фагоцитов, нарушает «переваривающую» способность фагоцитов за счет ингибирования «респираторного взрыва» внутри фаголизосомы.

в) Трахеальный цитотоксин, являясь фрагментом пептидогликана бордетелл, повреждает эпителиоциты респираторного тракта. Он стимулирует продукцию ИЛ-1, в ответ на который синтезируется оксид азота, обладающий цитотоксичностью.

В экспериментах in vitro этот токсин повреждает эпителиальные клетки трахеи и вызывает цилиостаз. При этом нарушение оттока слизи создает условия для персистирования инфекции.

г) Дерматонекротический токсин (син.: термолабильный токсин) инактивируется при нагревании до 56 °С в течение 15 мин. Наряду с трахеальным цитотоксином, дерматонекротический токсин оказывает повреждающее действие на эпителий респираторного тракта, вызывая местную воспалительную реакцию. При внутрикожном введении лабораторным животным вызывает некроз в месте инъекции. При внутривенном и внутрибрюшинном введении мышам вызывает их гибель.

д) Термостабильный эндотоксин — ЛПС клеточной стенки бордетелл, который стимулирует выработку цитокинов, участвующих в повреждении эпителиальных клеток верхнего отдела респираторного тракта, а также активирует комплемент. Синтез факторов вирулентности бордетелл регулируется двухкомпонентной сигнальной системой BvgAS (Bordetella virulence genes).

115. Эпидемиология и патогенез коклюша.

Коклюш - типичное антропонозная инфекция: болеют только люди.

61

Источником инфекции является больной человек (особенно в катаральном периоде заболевания) и иногда — бактерионоситель. Возбудитель проникает в организм через дыхательные пути при кашле, разговоре, чихании (респираторный механизм заражения, путь передачи инфекции — воздушно-капельный). Контагиозность коклюша очень высока: индекс контагиозности колеблется около 0,75-0,9, т. е. после контакта неиммунизированного человека с коклюшным больным вероятность развития заболевания составляет 75-90%.

Естественная восприимчивость людей высокая, поэтому коклюш распространен повсеместно и может быстро приобретать эпидемический характер среди неиммунных лиц. Болеют, главным образом, дети до 5 лет. Наиболее опасен коклюш для детей первого года жизни, у которых, вследствие развития осложнений, заболевание может закончиться летальным исходом.

Патогенез. Бордетеллы являются неинвазивными микробами, т. е. они не проникают внутрь клетки-мишени. В кровь бактерии не поступают. В патогенезе коклюша выделяют три стадии:

I стадия — адгезия. В ней участвуют фимбрии, филаментозный гемагглютинин, пертактин и пертуссис-токсин. Эти адгезины действуют последовательно или одновременно.

II стадия — местное повреждение. После адгезии и размножения в месте входных ворот В. pertussis начинает продуцировать различные токсины. К основным токсинам, действующим на этой стадии, относятся трахеальный цитотоксин и внеклеточная аденилатциклаза, нарушающие функции эпителиальных клеток и фагоцитов дыхательных путей. Пертуссистоксин оказывает повреждающее действие на ткани. Позднее может развиться некроз отдельных участков эпителия и полиморфнонуклеарная инфильтрация с развитием перибронхиального воспаления и интерстициальной пневмонии.

III стадия - стадия системных проявлений. В этой стадии ведушая роль отводится коклюшному токсину. Присоединение вторичной инфекции, вы званной Н. influenzae или стафилококками, может провоцировать бактериальную пневмонию. Обструкция (закупоривание) мелких бронхиол слизистыми пленками (пробками) приводит к ателектазам и снижению насыщенности крови кислородом. Это, вероятно, способствует развитию судорог и затяжных приступов кашля у младенцев.

116. Микробиологическая диагностика коклюша.

Материал для исследования — слизь с задней стенки глотки — принято забирать методом «кашлевых пластинок». С помощью этого метода материал от больного засевают во время приступа кашля непосредственно на чашку Петри с питательной средой, держа ее перед лицом пациента. Мазки из носоглотки исследуют редко, так как возбудитель коклюша быстро погибает на ватном тампоне при высушивании (хлопок

62

подавляет рост бордетелл. При необходимости исследуют мазки с задней стенки глотки, используя специальные тампоны из альгината кальция, смоченные в растворе пенициллина.

117. Специфическая профилактика коклюша, препараты.

В течение первого года жизни каждому ребенку необходима базовая трехкратная вакцинация убитой коклюшной вакциной в составе АКДС (адсорбированной коклюшно- дифтерийно-столбнячной вакцины). Вакцина содержит инактивированные нагреванием или мертиолатом В. pertussis I фазы (цельные микробные клетки) в комбинации с дифтерийным и столбнячным анатоксинами, сорбированными на гидроокиси алюминия.

Иммунизацию проводят, начиная с 3-месячного возраста, троекратно, с интервалами между введением препарата в 4 -6 недель.

К сожалению, при введении этой вакцины возможно развитие поствакцинальных осложнений, в том числе неврологических (энцефалопатия и даже энцефалит). Однако вероятность и частота возникновения таких осложнений значительно ниже, чем опасность развития заболевания, и составляет 1 случай на 1 млн доз вакцины.

ТУБЕРКУЛЕЗ

Туберкулез (от лат. tuberculum — бугорок) — первично-хроническое заболевание человека и животных, сопровождающееся поражением различных органов и систем (органов дыхания, лимфатических узлов, кишечника, костей и суставов, глаз, кожи, ночек и мочевыводящих путей, половых органов, ЦНС).

Заболевание вызывается 3 видами микобактерий: Mycobacterium tuberculosis –

человеческий вид, Mycobacterium bovis—бычий вид, Mycobacterium africanum—

промежуточный тип.

118. Морфологические и тинкториальные особенности туберкулезной палочки.

Морфология и тинкториальные свойства. Возбудители туберкулеза характеризуются выраженным полиморфизмом. Они имеют форму длинных, тонких (М tuberculosis, М. africanum) или более коротких и толстых (М bovis) прямых или слегка изогнутых палочек с гомогенной или зернистой цитоплазмой, содержащей от 2 до 12 зерен различной величины, состоящих из липидов метафосфатов, играющих важную роль в клеточном метаболизме бактерий. Грамположительны, неподвижны, спор не образуют. Имеют микрокапсулу. Из-за большого содержания липидов в клеточной стенке, содержащих миколовую кислоту, они плохо воспринимают анилиновые красители. Для их выявления

63

применяют окраску кислото-, спирто- и щелочеустойчивых бактерий по Цилю—Нельсену, в основу которой положен принцип термокислотного протравливания.

119. Классификация микобактерий по факторам роста.

Особенно чувствительны к факторам роста первичные культуры микобактерий, выделенные из патологического материала. Оптимальная температура культивирования 37-38 °С. Наилучший рост отмечается при pH 6,8-7,2. Рост и размножение происходят, в основном, путем простого деления или более сложно — путем почкования. Для них характерно вильчатое ветвление с образованием мицелиоподобных нитей, распадающихся на отдельные фрагменты, имеющие форму палочек, кокков или зерен.

Постановка биологической пробы считается одним из лучших тестов для дифференциации возбудителей туберкулеза. Чаще всего для культивирования возбудителей туберкулеза и определения чувствительности к антибиотикам применяют плотные элективные среды: яичные среды Левенштейна— Йенсена или Финна 2, агаровые среды Миддлбрука 7Н10, 7Н11, а также жидкие среды: Миддлбрука 7Н9, 7Н12, Дюбо, полусинтетическая среда Школьниковой, синтетическая среда Сотона и др.

Так как удовлетворяющей всем требованиям универсальной среды для культивирования микобактерий нет, то для выделения чистой культуры ВОЗ рекомендует использовать среду Левенштейна—Йенсена и среду Финна 2 в качестве стандартных сред.

Рост М. bovis на среде Левенштейна—Йенсена с тиокарбонилгидразидом подавляется. В отличие от условно-патогенных микобактерий, возбудители туберкулеза растут только при 37 °С и не дают роста при 22°, 45° и 52 °С. Они образуют бесцветные колонии и не растут на среде, содержащей салициловый натрий. Под действием интенсивной антибиотикотерапии отмечается появление «видимых, но не растущих» микобактерий, что необходимо учитывать при проведении микробиологичес кой диагностики. Для культивирования микобактерий с поврежденной клеточной стенкой применяется среда Колестос.

М. bovis — микроаэрофилы, растут на средах еще медленнее, чем М. tuberculosis; пируватзависимые. При культивировании на жидких средах сначала растут в глубине среды, образуя в последующем тонкую, влажную пленку на поверхности среды. При росте на плотных средах на 21-60 -й день образу ют мелкие шаровидные влажные и почти прозрачные серовато-белого цвета колонии (S-форма колоний). В экспериментальных условиях высокопатогенны для кроликов, у которых при внутривенном заражении возникает генерализованная инфекция, заканчивающаяся гибелью животных через 1—2 месяца. Постановка биологической пробы считается одним из лучших тестов для дифференциации возбудителей туберкулеза.

64

120. Факторы патогенности туберкулезной палочки.

Патогенность туберкулезных бактерий связана с высоким содержанием липидов. Содержащиеся в липидах фтиоидная, миколовая и другие жирные кислоты оказывают своеобразное токсическое действие на клетки тканей. Например, фосфатидная фракция, наиболее активная из всех липидов, обладает способностью вызывать в нормальном организме специфическую тканевую реакцию с образованием эпителиоидных клеток, жировая фракция – туберкулоидной ткани. Эти свойства указанных липидных фракций связаны с наличием в их составе фтиоидной кислоты. Восковая фракция, содержащая миколовую кислоту, вызывает реакции с образованием многочисленных гигантских клеток. Таким образом, с липидами, состоящими из нейтральных жиров, восков, стеринов, фосфатидов, сульфатидов и содержащими такие жирные кислоты, как фтиоидная, миколовая, туберкуло-стеариновая, пальмитиновая и другие, связаны патогенные свойства туберкулезной палочки и те биологические реакции, которыми ткани отвечают на их внедрение. Главным фактором патогенности является токсический гликолипид (корд-фактор), который располагается на поверхности и в толще клеточной стенки. По химической природе он представляет собой полимер, состоящий из одной молекулы дисахарида трегалозы и связанных с ней в эквивалентных соотношениях миколовой и миколиновой высокомолекулярных жирных кислот – трегалоза-6,6'- димиколат (С186Н366Ош). Корд-фактор не только оказывает токсическое действие на ткани, но и защищает туберкулезные палочки от фагоцитоза, блокируя окислительное фосфорилирование в митохондриях макрофагов. Будучи поглощенными фагоцитами, они размножаются в них и вызывают их гибель. Корд-фактор обладает двумя характерными свойствами, указывающими на его важную роль как основного фактора патогенности.

1.При внутрибрюшинном заражении белых мышей он вызывает их гибель. Подобным действием не обладает ни одна другая фракция туберкулезной палочки.

2.Он подавляет миграцию лейкоцитов больного туберкулезом человека (in vivo и in vitro).

М. tuberculosis, лишенные корд-фактора, являются непатогенными или слабопатогенными для человека и морских свинок. С необычным химическим составом туберкулезных клеток связана также способность их вызывать характерную для туберкулеза реакцию гиперчувствительности замедленного типа, выявляемую с помощью туберкулиновой пробы.

121. Свойства микобактерий, определяемые высоким содержанием липидов.

1.Устойчивость к кислотам, щелочам и спирту

2.Трудная окрашиваемость крсителями. Для их окрашивания применяют интенсивные методы. Например, по списобу Циля-нильсена окрашивают концентрированным

65