3.Вывод (определение вида выделенной культуры и ее токсигенности).
2.Световая микроскопия препарата из мокроты больного туберкулезом в окраске по Цилю-Нильсену.
11
Занятие №2
Тема. Микробиологическая характеристика патогенных анаэробов.
Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей неклостридиальных анаэробных инфекций, возбудителей газовой гангрены, столб-
няка, ботулизма, микробиологическую диагностику вызывае-
мых ими заболеваний. Изучить схему бактериологического ме-
тода исследования при подозрении на газовую гангрену. Изу-
чить препараты для специфической профилактики и специфиче-
ского лечения газовой гангрены, столбняка, ботулизма.
I.Теоретические знания:
1.Неклостридиальные анаэробы в патологии человека, микробиологическая диагностика.
2.Характеристика возбудителей газовой гангрены, микробиологическая диа-
гностика, специфическая профилактика и лечение.
3.Характеристика возбудителя псевдомембранозного колита, микробиологи-
ческая диагностика.
4.Характеристика возбудителя столбняка, специфическая профилактика и ле-
чение.
5.Характеристика возбудителя ботулизма, микробиологическая диагностика,
специфическое лечение.
II.Практические навыки:
1.Изучение схемы бактериологического исследования отечной жидкости при подозрении на газовую гангрену. Учет и интерпретация результатов иссле-
дования.
2.Световая микроскопия готовых препаратов чистых культур бактероидов,
возбудителей газовой гангрены, столбняка, ботулизма, окрашенных по Гра-
му.
12
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ
1.Неклостридиальные анаэробы в патологии человека, микробиологическая диагностика.
Неклостридиальные (неспорообразующие) анаэробы являются предста-
вителями симбионтной микробиоты ротовой полости, верхних дыхательных путей, кишечника, влагалища и др. биотопов макроорганизма. По таксономической характеристике они относятся к различным родам (табл. 2).
|
Таблица 2 |
Основные представители неклостридиальных анаэробов |
|
Родовое название |
Морфология |
|
Грамотрицательные: |
Бактероиды и превотеллы |
полиморфные палочки |
Фузобактерии |
удлиненные, тонкие палочки с заостренными |
|
концами |
Вейлонеллы |
диплококки бобовидной формы |
|
Грамположительные: |
Пропионибактерии |
палочки с колбовидными вздутиями на концах |
Эубактерии |
полиморфные палочки |
Актиномицеты |
ветвящиеся палочки, что придает им сходство с |
|
микроскопическими грибами |
Бифидобактерии |
палочки с раздвоенными концами |
Лактобактерии |
полиморфные палочки |
Пептококки |
кокки, располагающиеся скоплениями в виде |
|
гроздьев винограда |
Пептострептококки |
кокки, располагающиеся цепочками |
Чистые культуры неклостридиальных анаэробов. Окраска по Граму.
13
Неклостридиальные анаэробы (НА): условно-патогенные микроорга-
низмы, которые могут вызывать различные эндогенные инфекции при снижении иммунного статуса организма.
Факторы патогенности для большинства НА:
1.Факторы адгезии.
2.Капсула.
3.Ферменты патогенности (гиалуронидаза, нейраминидаза, фибринолизин).
4.Эндотоксин, цитотоксин.
НА чаще вызывают заболевания в ассоциациях, что приводит к более быстрому и тяжелому течению заболевания.
Все НА, за исключением бифидо- и лактобактерий, могут вызывать следующие гнойно-септические заболевания:
послеоперационные абдоминальные инфекции: перитонит, аппендицит, абсцесс печени;
гинекологические инфекции: септический аборт, эндометрит;
аспирационную пневмонию, абсцесс легкого;
сепсис, эндокардит;
флегмоны, абсцессы кожи и мягких тканей, остеомиелит (при ушибах и травмах);
одонтогенные инфекции после удаления или пломбирования зубов.
Лактобактерии значительно реже, чем другие НА, вызывают заболевания и могут быть причастны к формированию кариеса, острого язвенного стоматита, язвенного вульвита.
Бифидобактерии чрезвычайно редко, на фоне глубокого иммунодефицита, могут вызывать септицемию.
Микробиологическая диагностика.
Микробиологическая диагностика необходима для этиологической расшифровки заболеваний и определения чувствительности возбудителей к антибиотикам.
Материал на исследование (в зависимости от клинической формы): кровь, гной, пунктаты абсцессов и полостей, отделяемое из глубоких отделов ран, язв, свищей и др.
1.Экспресс-методы:
микроскопия нативных мазков в окраске по Граму;
газовая хроматография, основанная на обнаружении продуктов метаболизма анаэробов (летучие жирные кислоты – муравьиная, уксусная, пропионовая).
2.Бактериологический метод (основной). Материал доставляют в одноразовых шприцах или в стерильных пробирках с транспортной средой для анаэ-
14
робных микроорганизмов. Необходимое условие: быстрая (не позднее 2-х часов) доставка исследуемого материала в лабораторию. Производят посев на специальные для анаэробов питательные среды. Посевы инкубируют в анаэростатах, заполненных газовой смесью (80% N2, 10% H2 и 10% CO2), или с помощью AnaeroHiGas Pak, с дальнейшей идентификацией выделенных возбудителей и определением чувствительности к антибиотикам.
Специфическая профилактика и специфическая терапия не разработаны.
2.Характеристика возбудителей газовой гангрены, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.
Основной возбудитель газовой гангрены Clostridium perfringens (7080%). Реже заболевания вызывают: Clostridium novyi (20-40%), Clostridium septicum (до 20%), Clostridium histolyticum (4-6%) и др.
Морфо-тинкториальные свойства: C.perfringens крупные, неподвижные грамположительные палочки, имеют капсулу, образуют спору, расположенную центрально или субтерминально. Диаметр споры превышает диаметр клетки.
Чистая культура C.perfringens. Окраска по Граму.
Культуральные свойства: факультативный анаэроб. На среде КиттаТароцци – помутнение, на среде Вильсона-Блера – рост в виде черных колоний. Характерной особенностью роста возбудителя на этих средах является интенсивное газообразование с разрывами агара. На кровяном агаре Цейсслера растут в виде гладких сероватых колоний с зонами гемолиза.
Рост C.perfringens на специальной среде Вильсона-Блера.
15