3.2 Получение половых клеток
Перед получением икры самку тщательно обтирают сухим полотенцем два раза (сначала рабочий, подающий рыбу, затем рыбовод, отцеживающий икру). Необходимо следить, чтобы на икру не попала вода, так как она немедленно проникает под оболочку, вызывая ее набухание, микропиле закрывается, в результате чего икра не оплодотворяется.
В сухой таз (ковшик или миску) емкостью 1-2 л отцеживают икру не более чем от 10-15 зрелых самок в течение 30-45 мин. Самку берут в левую руку, покрытую марлевой салфеткой, спиной к ладони, хвостовым стеблем к указательному пальцу; подносят к миске или ковшику так, чтобы анальное отверстие было у самого края и отцеживаемая икра стекала по ее стенкам. При этом правой рукой брюшко самки осторожно массируется сверху вниз до тех пор, пока вся икра не будет отцежена в миску.
Начинать отцеживание необходимо в случае, когда икра, при легком надавливании на брюшко, выделяется струйкой, а не отдельными единичными икринками с жидкостью; заканчивать отцеживание -- с момента появления комков икры и сгустков крови.
Половые продукты самцов отцеживают в сухую посуду. Соотношение самцов и самок 1:1. Отцеживают сперму из расчета 10 см3 на 1 кг икры. Необходимо заготавливать только доброкачественную сперму, визуально имеющую консистенцию сливок. Перед отцеживанием спермы у самцов (как и самок) тщательно обтирают сухим полотенцем, так как вода немедленно активирует сперму, она утратит свою оплодотворяющую способность. Определение качества половых продуктов такое же, как и у русского осетра.
Оплодотворение проводят мокрым способом, который обеспечивает высокую эффективность (в среднем 95%) оплодотворения. Мокрый способ заключается в одновременной загрузке в воду икры и спермы, что обеспечивает предельно возможное сближение половых клеток рыб в период их наибольшей активности. Икра и сперматозоиды рыбца без воды неактивны. Икринки способны оплодотворению очень непродолжительное время (45-60сек. с момента соединения их с молоками и водой). Сперматозоиды подвижны в воде от 30 до 60 секунд, оплодотворяя икру.
Наибольшее количество оплодотворенных икринок наблюдается в течение 2-3 секунд с момента соединения молок с водой.
3.3 Осеменение
В таз наливают воду, процеженную через газовый мешочек (количество воды по массе приблизительно равно количеству оплодотворяемой икры). Одновременно приливают икру и сперму, постоянно, в течение 2-3 мин, осторожно помешивая все содержимое гусиным пером.
Через 3-5 мин после осеменения полностью меняют воду. Затем, во избежание склеиваемости, икру отмывают, осторожно помешивая гусиным пером и постепенно подливая воду до соотношения: четыре объема воды к одному объему икры. Воду необходимо приливать на край таза, а не на икру, чтобы не допустить ее повреждения. Последующую полную смену воды производят через 10-15 мин -- всего не менее 4-5 раз. Обесклеивают икру около часа, но не менее 45 мин. Смену воды прекращают, когда икринки перестают приклеиваться ко дну чашки. Проверить обесклеивание икринок можно следующим образом: нужно набрать немного икры из таза в чашку Петри, порождать около 5 мин и слить воду; если икра клеится, процесс следует продолжить; если же икра скатывается по чашке Петри свободно, отмывку считают законченной. (Карпенко, 2004).
3.4 Инкубация икры рыбца
Инкубационные аппараты готовятся заранее (самый поздний срок -- время обесклеивания икры). Перед закладкой икры в аппарат конструкции П. С. Ющенко (рис. 3). Аппарат проверяют: очищают от пыли и грязи, настраивают, установив его рабочий режим перед заполнением аппарата водоподающие краны необходимо снабдить фильтрами из марличного газа № 64 и 68 для предотвращения попадания в аппараты циклопов, дафний и других беспозвоночных, носящих известный вред инкубируемой икре.
Рис.3 Инкубационный аппарат П.С Ющенко
После достижения необходимого уровня поступления воды в аппарат не прекращается. Первоначальный ток воды в аппарате сохраняют до начала выклева. После выклева и удаления оболочек икры из аппарата количество поступающей воды несколько уменьшают.
Техническая характеристика общая длина -- 140 см; ширина -- 50 см; высота -- 1 см; уровень воды у ковша -- 7, 0 см, у сетки --10, 0 см, в среднем 8, 5 см; рабочий объем воды = 0, 061 м3 (около 60 л). Расход воды 7 л/мин.
После обесклеивания икру помещают в аппарат Ющенко. Загрузку аппарата 400 г икры (250-280 тыс. шт.) лучше производить однократно, в крайнем случае, порционно, но не более чем в течение 6 ч. Миску с икрой погружают в аппарат, икру осторожно опускают в воду, наклонив миску; оставшиеся икринки бережно снимают птичьим пером. В аппарате икру так же осторожно перемешивают гусиным пером.
Дно аппарата регулярно очищают от осевших взвесей, используя шланг диаметром 6 мм. Через 10-12 ч после осеменения на поздних стадиях гаструлы или на стадиях органогенеза -- формирования зародыша -- определяют процент оплодотворения икры: в это время живые развивающиеся икринки легко отличить от неоплодотворенных.
Для определения степени оплодотворения берут 1-2 пробы икры из аппарата в количестве 100 икринок; в каждой пробе подсчитывают количество развивающихся и мертвых икринок, а по средним показателям определяют процент оплодотворения.
Перед выклевом эмбрионов берется проба из 200-300 икринок для определения процента отхода икры за период ее инкубации. Икру необходимо рассматривать под бинокулярным микроскопом или лупой. Просчитывают количество нормально развивающихся эмбрионов, эмбрионов с патологией и определяют процент нормально развивающихся эмбрионов. Период инкубации и выдерживания эмбрионов рыбца в аппаратах проводятся круглосуточные наблюдения за подачей воды в аппараты, регулирование ее тока, содержание растворенного в ней кислорода, чистка аппаратов.
Уход за икрой заключается, в основном, в удалении аппарата мертвых икринок, покрывающихся сапролегнией чтобы избежать поражения грибком нормально развивающейся икры. Мертвых икринок отбирают резиновой трубкой (сифоном) и сачком, обтянутым капроновой мелкой сеткой.
Данные по инкубации икры и выдерживанию эмбрионов рыбца в аппаратах заносят в журнал; на каждом аппарате записывают дату и время получения икры, оплодотворения и загрузки икры в аппарат, количество самок и самцов, используемых для получения икры.
Измерения температуры воды следует проводить в 13, 19 ч, а отбор проб воды для определения содержан растворенного кислорода -- не менее одного раза в утренние часы (4-5 ч).
Инкубация икры рыбца в зависимости от температуры воды продолжается от 2,5 до 6,2 суток. Икра с первого по седьмой эмбриональный этап развивается в оболочке. При искусственном разведении эмбрионы выклевываются на седьмом, реже -- на восьмом этапе развития: при температуре воды 15, 5-17, 0 °С -- через 148 ч; 14, 2-18, 2 °С - через 125ч; при 17, 1-19, 6 °С- через 92ч 30 при 19, 5-21, 4 °С - через 69 ч; при 20, 0-21, 0 °С - через 60 ч.
В период инкубации икры следует избегать резких перепадов температуры воды (больше 5-7°С), так как приводит к преждевременному выклеву эмбрионов, а впоследствии и к массовой гибели.
Эмбрионы рыбца выклевываются слаборазвитыми, долгое время лежат на боку, не реагируют даже на прикосновение. Они светобоязливы: находясь в аппаратах.
3.5 Развитие эмбрионов
Развитие эмбрионов (предличинок) на восьмом и девятом эмбриональном этапе происходит вне оболочки, их нормального развития необходимо: создавать проточность, не нарушая режима подачи воды; избегать перепадов температуры воды, смены источников воды; обязательно затенять окна инкубационного цеха во избежание попадания прямых солнечных лучей.
Личинку учитывают эталонным методом. Отловленных в личинконакопителе предличинок просчитывают и сажают в заполненный водой эмалированный таз. В дальнейшем в тазы наливают такой же объем воды, как и этплонном тазу, и помещают в них предличинок без счета. Просчитанные личинки немедленно пересаживаются в бассейны. При оптимальных условиях инкубации выживаемость составляет 80%.
4. Выдерживание предличинок и их подращивание
Предличинки рыбца вылупляются слаборазвитыми, долгое время лежат на боку, не реагируют даже на прикосновение. Они светобоязливы: находясь в аппаратах, образуют многослойные скопления в углах и других местах, защищенных от попадания солнечных лучей.
Для нормального развития предличинок на 8-ом м 9-ом этапах необходимо:
-создавать постоянную проточность воды;
-избегать перепадов температуры воды, смены источников воды;
-обязательно затенять окна инкубационного цеха во избежание попадания прямых солнечных лучей.
Предличинок рыбца выдерживают в аппаратах до перехода их на смешанное питание (окончание 9 этапа и начало 1 личиночного этапа).
Как правило это совпадает со временем перехода личинок к пелагическому образу жизни, когда образуется передняя камера плавательного пузыря при почти полном рассасывании желточного мешка. В это время наиболее целесообразно пересадка личинок в пруды (Серпунин, 2010).
Для подращивания личинок используют пруды с хорошо спланированным ложем, размером до 1 гектара и средней глубиной 0,5-0,7 м. Для борьбы с возбудителями заболеваний и вредителями рыб после вылова подращенной молоди проводится тщательная дезинфекция ложа пруда и откосов дамб хлорной и негашеной известью из расчета 300-500 и 2500 кг/га соответственно.
Для стимулирования естественной кормовой базы при подращивании личинок применяют органические удобрения - перепревший навоз, провяленную водную или наземную растительность. Перепревший навоз из расчета 12-15 т/га распределяют кучами по 100-150 кг по ложу пруда. Вносить навоз следует за 2-3 дня перед заполнением пруда. Провяленную растительность закладывают по периметру пруда на глубине 0,5-0,7 м снопиками из расчета до 5 т/га.
После заполнения пруда следует внести в растворимом виде гидролизные или кормовые дрожжи по 3-5 г/м3. Внесение дрожжей проводится периодически, через 2-3 дня в течение всего периода подращивания личинок.
Сроки и нормы внесения удобрений зависят от естественной продуктивности прудов и плотности посадки в них личинок. В высокопродуктивных прудах с предварительным летованием можно подращивать 3-4 млн./га личинок без внесения удобрений, или при внесении их в дозах от 0,5 до 1 т/га органических и 50-60 кг/га минеральных. Соотношение вносимых азотных и фосфорных удобрений определяется солевым составом воды. Во втором туре подращивания нормы удобрений необходимо увеличить (до 1-2 т органических и 50-60 кг/га минеральных). При доведении плотности посадки личинок до 6-7 млн./га требуется гораздо большее количество удобрений (до 5-7 т/га органических и до 100-120 кг/га минеральных). Часть удобрений (до 3 т/га органических и 50-40 кг/га минеральных) вносится по сухому ложу пруда, затем нормы и сроки внесения удобрений определяются в зависимости от степени развития в прудах кормовой базы.
Все удобрения лучше вносить в жидком виде. В течение всего периода подращивания нужно тщательно следить за гидрохимическим режимом прудов.
На водоподающем сооружении пруда устанавливается сороуловитель из металлической сетки ячеей 0,5-1,0 мм, а на сбросном - мальковый уловитель.
Для предотвращения интенсивного развития в пруду хищных форм зоопланктона и водных насекомых до посадки в него личинок растительноядных рыб, или в первое дни после зарыбления, необходимо, по возможности, сократить период "созревания" прудов (срок от залития пруда до его зарыбления). При высоких концентрациях мелкого зоопланктона в источнике водоснабжения (330-400 экз./л и более) этот срок можно сократить до 1-2 суток. В том же случае, когда источник водоснабжения беден зоопланктоном или когда в пруды вносится по ложу большое количество органических удобрении, резко ухудшающих кислородный режим в первые дни после залития, эти сроки целесообразно увеличить до 3-5 суток.
5. Выращивание молоди рыбца
При выращивании молоди рыбца следует учитывать, что в первые две недели личинки обладают отрицательным фототаксисом - поэтому нужны затененные участки (навесы над прудом).
Облегчает выращивание неприхотливость молоди рыбца к содержанию кислорода, температуре, солености и ряду других абиотических факторов. Обычно площадь и глубина выростных прудов для рыбца составляет соответственно 0,17-5,0 га и 0,5-2,0 м. Установлен, что выживание молоди не зависит от площади прудов и их глубины. Поэтому при строительстве прудов нужно учитывать меньшие затраты на пруды большей площади, а также исходить из удобства обработки ложа прудов.
Одним из важнейших условий успешного выращивания молоди является высокая кормность выростных прудов. В первые дни после посадки личинок в выростные пруды из пищевой спектр узок - им нужны одноклеточные водоросли, мелкие формы коловраток и простейшие, входящие в биоценоз обрастаний. Позже пищевой спектр значительно расширяется, но основной пищей является планктонные ракообразные, включая мелкие, позже крупные. Представители бентоса в питании молоди не имеют существенного значения.
Заливать выростные пруды нужно на 1-3 сутки до зарыбления с постепенным и медленным повышением уровня воды, что ускоряет развитие кормовых организмов. Мелководная часть составляет 25-30% площади прудов. Для повышения продуктивности выростных водоемов одновременно с залитием прудов вносят органические удобрения (скошенную и подвяленную растительность) из расчета 300-400 кг/га и минеральные удобрения (по потребности).