Материал: ГФ 11-1
поглощающий слой; k - коэффициент поглощения света в центре линии поглощения; с -
концентрация поглощающего компонента; l - толщина поглощающего слоя.
Погрешность определения элемента в методе атомно - абсорбционной пламенной
спектрометрии могут вызывать: ионизация исследуемых атомов при температуре пламени,
образование стойких химических соединений в пламени, неселективное поглощение света и другие
факторы.
Число возбужденных атомов увеличивается с ростом температуры, которая зависит в основном
от теплотворной способности создающего пламя газа. В используемых фотометрических методах
применяется в основном пламя следующих газовых смесей.
Состав газовой смеси Температура, град. С
Светильный газ + воздух 1840
Ацетилен + воздух 2250
Ацетилен + кислород 3050
Водород + кислород 2680
Ацетилен + закись азота 2955
Чувствительность определения может быть повышена при применении более горячего пламени
или других более эффективных способов атомизации проб, например использование графитовой
кюветы, лазеров и т. д.
Измерение интенсивности излучения спектральных линий определяемых элементов можно
проводить на отечественных пламенных фотометрах, например типа ПФЛ-1, ПФМ, ПАЖ-1 или
Flapho-4 (ГДР) и др., а поглощение резонансных линий - на атомно - абсорбционных
спектрофотометрах, например типа "Спектр-1" и "Сатурн" (СССР), AAS-1 (ГДР) и др. В качестве
регистрирующих систем могут использоваться вольтметры и потенциометры, снабженные
цифровыми или печатающими устройствами. Точность методов пламенной фотометрии и атомной
абсорбции в зависимости от концентрации вещества составляет 1-4%; чувствительность
определяется свойствами аналитической линии, составом пробы, классом аппаратуры и может
достигать 0,001 мкг/мл.
Для определения концентрации вещества в анализируемых объектах используются в основном
следующие методы: градуировочной кривой, стандартных добавок, сравнения и ограничивающих
растворов.
Реактивы и эталонные растворы. Вода должна быть деионизированной на ионообменных
смолах и продистиллированной непосредственно перед употреблением.
Ниже приведены растворы солей, катионы которых обозначены названиями элементов.
Кальций. 1,001 г кальция карбоната, высушенного до постоянной массы при температуре 105
град. С, растворяют в 25 мл хлористоводородной кислоты (1 моль/л) и доводят объем раствора водой
до 1000 мл. Раствор кальция содержит 400 мкг ионов Са в 1 мл.
Срок годности раствора 1 мес, хранение при комнатной температуре.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
Калий. 1,1440 г калия хлорида, высушенного до постоянной массы при температуре 130 град. С,
растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем раствора водой до 1000 мл. Раствор калия
содержит 600 мкг ионов К в 1 мл.
Срок годности раствора 2 мес, хранение при комнатной температуре.
Натрий. 0,5084 г натрия хлорида, высушенного до постоянной массы при температуре 130 град.
С, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем раствора водой до 1000 мл. Раствор
натрия содержит 200 мкг ионов Na в 1 мл.
Срок годности раствора 2 мес, хранение при комнатной температуре.
Цинк. 2,5 г гранулированного цинка растворяют в 20 мл хлористоводородной кислоты (5
моль/л) и доводят объем раствора водой до 500 мл. Раствор цинка содержит 5 мг ионов Zn в 1 мл.
Срок годности раствора 2 мес, хранение при комнатной температуре.
Свинец. 0,1600 г свинца нитрата растворяют в 5 мл азотной кислоты и доводят объем раствора
водой до 1000 мл. Раствор свинца содержит 100 мг ионов Рb в 1 мл.
Срок годности раствора 1 мес, хранение при комнатной температуре.
Медь. 1,000 г меди электролитической растворяют в небольшом объеме 50% азотной кислоты и
доводят объем раствора 1% азотной кислотой до 1000 мл. Раствор меди содержит 1 мг ионов Cu в 1
мл.
Срок годности раствора 1 мес, хранение при комнатной температуре.
При составлении эталонного раствора расчет количества соединения химического элемента (X)
в граммах проводят по уравнению:
М
Х = аb ----,
nА
где а - масса (в граммах) вводимого в раствор элемента на 1 г готового эталонного раствора; b -
масса готового эталонного раствора в граммах; М - молекулярная масса соединения, в которое входит
вводимый в эталонный раствор элемент; n - число атомов вводимого элемента в используемом для
приготовления эталонного раствора соединении; А - атомная масса вводимого в эталонный раствор
элемента.
Эталонные, а также приготовленные на их основе рабочие растворы хранят в посуде из
плавленого кварца, из чистого полиэтилена ГОСТ 16337-77 Е или из тефлона. Чашки и тигли для
озоления проб должны быть изготовлены из кварца.
ФЛУОРИМЕТРИЯ
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
Флуориметрия - метод фотометрического анализа, основанный на измерении интенсивности
флюоресценции испытуемых веществ. Интенсивность флюоресценции в разбавленных растворах
может быть определена следующим уравнением:
F = J02,3"эпсилон"сb"фи",
где F - общая интенсивность флюоресценции, квант/с; J0 - интенсивность возбуждающего света,
квант/с; с - концентрация раствора, моль/л; "эпсилон" - молярный коэффициент поглощения; b -
толщина флюоресцирующего слоя, см; "фи" - квантовый выход флюоресценции, зависящий от
природы вещества.
Это уравнение может быть использовано для растворов с оптической плотностью D, не
превышающей 0,05 при длине волны возбуждения (при D = 0,05 ошибка в определении
интенсивности флюоресценции составляет около 5%; влияние эффекта внутреннего фильтра).
Практически флюоресценцию определяют в растворах с
-5 -6
концентрацией 10 - 10 моль/л и меньше, когда между
интенсивностью флюоресценции и концентрацией вещества наблюдается
прямолинейная зависимость: при более высоких концентрациях
линейность нарушается, а затем наблюдается концентрационное
тушение флюоресценции.
Интенсивность флюоресценции в значительной степени зависит от длины волны
возбуждающего света, величины рН испытуемого раствора, характера растворителей и присутствия в
растворе посторонних веществ, поглощающих некоторую долю возбуждающей энергии
(экранирующий эффект) или дезактивирующих возбужденные молекулы. Так, прибавление хлорида
натрия снижает выход флюоресценции хинина, прибавление веществ с фенольными или
гидроксильными группами тушит флюоресценцию рибофлавина, прибавление хлористоводородной
кислоты тушит флюоресценцию тиохрома, прибавление едкого натра тушит флюоресценцию
птеринов и т. д.
Во флюоресцентных исследованиях часто важно регулирование температуры и удаление
кислорода, являющегося сильным тушителем флюоресценции. При одновременном определении
испытуемого и стандартного образцов необходимость термостатирования и удаления кислорода, как
правило, отпадает, для этого измерение надо проводить достаточно быстро, чтобы не произошло
нагревания образца от источника облучения.
Спектр флюоресценции находится по сравнению со спектром поглощения в более
длинноволновой области (на 50 - 100 нм) и дает широкие полосы излучения в пределах от 100 до 200
нм.
Характер спектра флюоресценции, а также цвет излучаемого света специфичны для
флюоресцирующих веществ (флуорохромов), поэтому флюоресценция может быть применена как для
качественного, так и для количественного анализа.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
Для выполнения флуориметрического анализа используют спектрофлуориметры, принцип
работы которых заключается в следующем: свет от ртутно - кварцевой лампы через первичный
светофильтр и конденсор падает на кювету с раствором испытуемого вещества; последнее начинает
флюоресцировать. Кванты возбужденного света проходят через вторичные светофильтры и падают
на фотоэлемент, соединенный с чувствительным гальванометром, отмечающим количество
поступающего на фотоэлемент света.
Для проведения количественного анализа в качестве раствора сравнения применяют раствор
стандартного образца флюоресцирующего вещества известной концентрации. Расчет производят по
формуле:
(n1 - n2)c
Х = -----------,
n - n2
где n1-n2 - показания спектрофлуориметра для испытуемого раствора за вычетом поправки на
контрольный опыт; n - n2 - то же для раствора стандартного образца за вычетом поправки на
контрольный опыт; с - концентрация раствора стандартного образца в выбранных единицах
измерения.
Расчет производят с помощью калибровочного графика или шкалы стандартных растворов.
Так как интенсивность флюоресценции пропорциональна
концентрации вещества обычно в очень узкой области, соотношение
-
Jх - J0
¬
¦
---------
¦
(Jх, J0, Jс - соответственно интенсивности
L
Jс - J0
-
флюоресценции испытуемого раствора, растворителя и стандартного
раствора) должно быть не менее 0,40 и не более 2,50.
Относительная ошибка флуориметрического метода составляет не более 5%.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТЕПЕНИ БЕЛИЗНЫ
ПОРОШКООБРАЗНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
В случае твердых субстанций оценка степени белизны (оттенка) может быть проведена
инструментальным методом, исходя из спектральной характеристики света, отраженного от образца.
В простейшем случае оценку степени белизны можно получить, исходя из коэффициентов отражения,
измеренных при освещении образца белым светом (источник со спектральным распределением,
соответствующим спектральному распределению источника типа А по ГОСТу 7721-76), а также
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
белым светом, пропущенным через красный или синий фильтр с эффективными максимумами
пропускания соответственно при 614 и 459 нм. Коэффициент отражения белого света (rб) при оценке
степени белизны может быть заменен коэффициентом отражения света, пропущенного через зеленый
светофильтр с максимумом пропускания при 522 нм.
Коэффициент отражения представляет собой отношение величины отраженного светового
потока к величине падающего светового потока.
Измерение коэффициентов отражения осуществляют на приборах
типа лейкометра или спектрального фотометра "Specol-10" (фирмы
"Carl Zeiss Jena", ГДР). Измеренные относительно эталона с
коэффициентом отражения в видимой области спектра ~=0,85, значения
коэффициентов отражения образцов лекарственного вещества (r)
позволяют определить наличие или отсутствие у них цветового или
сероватого оттенка соответственно по величинам степени белизны
("альфа") и степени яркости ("бета"). Величину степени белизны
"альфа" определяют для лекарственных веществ с желтоватым,
r459
кремоватым или розоватым оттенками как отношение ----, а для
r614 r614
лекарственных веществ с голубоватым оттенком - как отношение ----.
r459
Степень яркости "бета" характеризуют величиной r522 или rб. (В
индексах r указана длина волны максимума пропускания
светофильтров).
Для белых и белых с сероватым оттенком лекарственных веществ величина "альфа"
теоретически равна 1. Если "альфа" < 1, то лекарственное вещество имеет оттенок. Лекарственные
вещества, для которых "бета" < 0,85 и "альфа" находится в интервале 0,95-1,00, имеют сероватый
оттенок.
Уточненная оценка белизны лекарственных веществ с указанием интенсивности цветовых и
сероватого оттенков может быть проведена с использованием абсолютных коэффициентов
отражения (R), определяемых с помощью спектрофотометров отражения, снабженных
интегрирующей сферой, например СФ-18 ("ЛОМО", СССР). Настройка прибора в этом случае
осуществляется по эталону с коэффициентом отражения в видимой области ~= 1.
При этом интенсивность цветового и сероватого оттенков
оценивают по величинам степени белизны (альфа') и степени яркости
(бета') соответственно. Величину степени белизны альфа' определяют
для лекарственных веществ с желтоватым, кремоватым и розоватым
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.