Материал: Ильина Г.В., Ильин Д.Ю. Ксилотрофные базидиомицеты в чистой культуре

Внимание! Если размещение файла нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам

зованного субстрата составило 2-4% от массы среды, а для метанолизного материала – строго 2%.

Исходя из особенностей роста культур на средах, содержащих лигноцеллюлозные компоненты в установленных оптимальных концентрациях, можно судить о том, что именно метанолизные опилки в качестве компонента питательной среды, являются более доступным, чем материал нативных опилок, субстратом, поскольку выступают как фактор, положительно влияющий на развитие (табл. 16).

Таблица 16 – Скорость роста штаммов ксилотрофных базидиомицетов на плотных питательных средах с добавлением нативного и дериватизированного источников лигнина, 2% от массы среды (мм/сут±∆*, 26°С, повторность трехкратная)

Вид

Штамм

 

Питательныесреды

 

 

 

КГА(контроль)

КГА,опилкимеха-

КГА,опилкиме-

 

 

 

ническогоразмола

танолизные

 

 

 

 

 

Продолжениетаблицы16

 

 

 

1

2

3

4

5

I. obliquus

IO-1

3,17±0,08a

3,06±0,06

3,9±0,04b

 

IO-2

2,75±0,05

3,14±0,08a

4,0±0,09b

 

IO-3

1,43±0,03

2,05±0,21a

3,5±0,03b

Ph. tremulae

Pht-1

1,18±0,02a

1,22±0,04a

1,25±0,03b

 

Pht-2

1,11±0,02

1,18±0,05a

1,33±0,01b

 

Pht-3

1,28±0,02a

1,25±0,06a

1,35±0,04b

S. crispa

AI-10

0,94±0,01a

0,95±0,01a

1,11±0,05b

F. pinicola

Fpi-1

7,13±0,20

9,35±0,14a

10,74±0,09b

 

Fpi-2

8,30±0,15

8,84±0,14a

12,22±0,18b

 

Fpi-3

9,32±0,16a

7,56±0,13

11,15±0,15b

L. sulphureus

РD-99

7,07±0,03

9,93±0,07a

10,43±0,10b

 

РD-01

8,23±0,13

9,46±0,11a

11,54±0,24b

 

Аh-02

6,10±0,10

10,03±0,04a

10,36±0,20a

G. applanatum

G-1

8,03±0,03

8,95±0,09a

11,22±0,18b

 

G-2

7,22±0,14

10,23±0,08a

12,03±0,06b

 

G-3

9,30±0,15

11,18±0,09a

12,71±0,05b

G. lucidum

Gl-1

9,60±0,10a

8,67±0,03

12,52±0,05b

 

Gl-3

12,07±0,03a

10,02±0,16

13,39±0,06b

 

Gl-6

5,97±0,14a

6,13±0,25a

9,92±0,03b

F. fomentarius

AH-96

6,20±0,10

8,22±0,15a

12,31±0,13b

155

Продолжениетаблицы16

1

2

3

4

5

 

Nic-02

4,13±0,07

9,61±0,12a

14,07±0,22b

 

Lp-05

4,40±0,06

7,09±0,05a

14,40±0,07b

P. cinnabarinus

PyC-1

5,17±0,09

5,51±0,04a

11,2±0,19b

 

PyC-2

6,40±0,10a

6,53±0,01a

9,37±0,12b

 

PyC-4

6,67±0,08a

7,72±0,04a

9,12±0,24b

H. annosum

Han-1

0,79±0,08a

0,24±0,02

0,72±0,06a

 

Han-2

0,93±0,03b

0,32±0,05

0,72±0,01a

 

Han-3

0,88±0,02a

0,84±0,08a

0,88±0,01a

F. hepatica

Fh-1

3,13±0,03

4,46±0,07a

6,11±0,04b

 

Fh-1а

2,97±0,03

4,72±0,03a

5,00±0,04b

 

Fh-5

3,95±0,13

5,03±0,02a

6,34±0,03b

F. velutipes

FV-1

5,55±0,01a

5,33±0,06

6,14±0,01b

 

FV-3

4,98±0,04

5,92±0,03a

6,18±0,02b

 

FV-9

6,14±0,01

8,13±0,02b

7,12±0,02a

P. ostreatus

PlО(23)-08

9,33±0,11a

11,01±0,09b

9,30±0,07a

 

PlО(Lam)-

10,01±0,03a

9,97±0,01a

10,59±0,02b

 

08

 

 

 

 

PlО(23)-

11,99±0,07

13,03±0,12a

14,22±0,06b

 

08

 

 

 

S. commune

SZ-1

10,89±0,04a

12,01±0,09b

10,61±0,05

 

SZ-2

12,13±0,12

12,66±0,11a

13,98±0,09b

 

SZ-3

12,11±0,16

13,03±0,04a

13,10±0,01a

P. aurivella

PhoA-3

6,88±0,16a

8,32b

6,75a

 

PhoA-4

6,05±0,16

8,02a

8,03a

 

PhoA-5

5,32±0,16

7,77a

8,15b

*р>0,05

Примечание: результаты теста Дункана – a,b – маркировка групп по достоверным различиям в показателях

Полученные результаты могут объясняться тем, что при добавлении небольшого количества опилок в агаризованную среду, был создан «эффект разбавления», элиминирующий токсическое действие избытка метоксильных групп и олигомерных соединений лигнина, устранены такие лимитирующие развитие факторы как дефицит легкодоступных сахаров и влаги.

В первом варианте опыта (внесение опилок механического размола в КГА) существенных отличий от контроля (КГА) выявлено не было, хотя для отдельных штаммов установлена незначительная стимуляция роста. Во втором варианте (метанолизные

156

опилки, КГА) следует отметить факт достоверной стимуляции роста большинства штаммов, как видов – представителей бурой и белой гнили, так и представителей всех трофических стратегий.

Особенно

заметная стимуляция роста мицелия выявлена

у видов (в

порядке убывания эффекта

стимуляции):

F. fomentarius,

F. hepatica,

P. cinnabarinus,

Ph. tremulae,

I. obliquus, S. crispa.

Таким образом, на видовом уровне прослеживается разная степень стимуляции развития мицелия путем добавления к питательному субстрату источников целлюлозы и лигнина. Причем заметно, что в целях интенсификации роста культур целесообразно использование именно метанолизных опилок. Отдельного внимания заслуживает факт оптимизации роста видов-паразитов, обычно слабо развивающихся в культуре, посредством обогащения питательной среды лигноцеллюлозными компонентами в низких концентрациях.

Была исследована способность культур к формированию телеоморфы в стерильных условиях. Для этого культуры были отвиты по одному штамму каждого вида на скошенный картофель- но-глюкозный агар с добавлением нативных (первый вариант) и метанолизных опилок (второй вариант) в указанной выше концентрации, а в качестве контроля – на скошенный КГА без добавления опилок. Пробирки были помещены в условия холодильника на 5 суток, а затем извлечены из него и хранились при естественном освещении и комнатной температуре. По истечении 12-15 суток такого хранения у ряда культур было визуально отмечено формирование узелков примордиев (табл. 17). Образование зачатков плодовых тел наблюдалось в основном у грибов –

представителей

белой гнили

(I. obliquus,

F. fomentarius,

G. applanatum,

G. lucidum,

P. cinnabarinus,

F. velutipes,

P. ostreatus, S. commune и P. aurivella). Исключение составил вид,

вызывающий бурую гниль древесины - S. crispa, для которого было отмечено образование плодовых тел. Появившиеся узелки на мицелии Ph. tremulae в вариантах с добавлением как нативных, так и метанолизных опилок, дальнейшее развитие прекрати-

ли. У прочих

культур (I. obliquus, S. crispa,

F. fomentarius,

G. applanatum,

G. lucidum,

P. cinnabarinus,

F. velutipes,

P. ostreatus, S. commune и P. aurivella) на 20-25 сутки сформиро-

157

вались типичные примордии. В вариантах с метанолизными опилками, и, реже, в вариантах с нативными, у зачатков плодовых тел этих видов появлялась тенденция к дифференциации

(табл. 17).

Таблица 17 – Формирование зачатков плодовых тел на мицелии штаммов изученных видов ксилотрофных базидиомицетах на разных средах в стерильных условиях

Вид, штамм

Сроки появления зачатков плодовых тел (сутки после

 

холодильника) и их дифференцирование на разных сре-

 

 

 

 

 

 

дах*

 

 

 

 

 

 

 

КГА (контроль)

КГА + нативные

КГА + метанолиз-

 

 

 

 

 

 

опилки

 

ные опилки

 

 

12

15

20

25

12

15

20

25

12

15

20

 

25

I. obliquus, IO-1

-

-

-

-

+

+

+

+д

+

+

+д

 

+д

Ph. tremulae, Pht-1

-

-

-

-

-

-

+

+

-

+

+

 

+

S. crispa, AI-10

 

 

 

 

 

 

 

+

 

 

+

 

+д

F. pinicola, Fpi-2

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

 

-

L. sulphureus, РD-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

 

-

01

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

G. applanatum G-1

-

-

-

+

+

+

+

+

+

+

+

 

+д

G. lucidum, Gl-1

-

-

+

+д

+

+

+д

+д

+

+д

+д

 

+д

F. fomentarius,

-

-

-

-

-

-

-

+

+

+д

+д

 

+д

Nic-02

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

P. cinnabarinus,

-

-

-

-

-

-

-

-

+

+

+д

 

+д

PyC-1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

H. annosum, Han-2

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

 

-

F. hepatica, Fh-5

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

 

-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

F. velutipes, FV-9

-

-

+

+д

-

+

+д

+д

-

+д

+д

 

+д

P. ostreatus,

-

-

+д

+д

-

+

+д

+д

-

+

+д

 

+д

PlО(23)-08

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S. commune, SZ-2

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+д

 

+д

P. aurivella,

-

-

-

-

-

-

-

+

-

+

+д

 

+д

PhoA-5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

* Обозначения: «-» - примордиев не отмечено; «+» отмечены зачаточные структуры примордиев (узелки); «д» - дифееренцированные примордии, заметен гименофор

158

Слабее всего была заметна дифференциация у примордиев

G. applanatum и S. crispa.

Формирование плотных остроконечных структур у G. applanatum из мицелиальных узелков произошло только на 25 сутки хранения и в вариантах с метанолизными опилками. Структуры были очень малы, имели столбчатую или шиповатую форму (рис. 34).

Рисунок 34 – Тенденция к дифференциации примордиев штамма G-1 G. applanatum на субстрате, обогащенном метанолизными источниками лигнина

Виды P. ostreatus, F. velutipes, склонные к формированию телеоморфы на стерильных средах, приступили к плодоношению в присутствии источников целлюлозы и лигнина в субстрате в более ранние сроки. Примордии на таких средах характеризовались, по сравнению с контрольными вариантами, более выраженными, типичными для видов габитусами, с хорошо выраженной дифференциацией (рис. 33, 34).

159

Источник: https://studfile.net/preview/15922627/