Исследование количественного содержания комплекса БАВ.
Анализ количественного содержания флавоноидов.
Определение суммы флавоноидов проводилось методом дифференциальной спектрофотометрии (фармакопейный метод) в пересчете на рутин.
Т.к. из сырья, приобретенного в аптеке, потребители чаще готовят водные извлечения по методике, указанной на упаковке, было проанализировано содержание суммы флавоноидов в водных извлечениях из собранных образцов травы зверобоя продырявленного.
Установлено, что содержание суммы флавоноидов в водном извлечении в пересчете на рутин составляют от 0,47 до 1,33%.
Содержание суммы флавоноидов, определенное методом дифференциальной спектрофотометрии с добавлением алюминия хлорида, составляет от 0,42 до 1,25%.
Анализ количественного содержания оксикоричных кислот.
В водных извлечениях также было проанализировано количественное содержание суммы оксикоричных кислот. Установлено, что их содержание составляет от 0,36 до 0,89 %.
Выводы по главе
· В результате макро- и микроскопического анализа установлена подлинность исследуемого сырья;
· По результатам проведенного общего фитохимического анализа в сырье зверобоя продырявленного Hypericum perforatum L. были выявлены следующие БАВ: флавоноиды, антраценпроизводные, дубильные вещества конденсированной природы, оксикоричные кислоты.
· В результате проведенной дифференциальной спектрофотометрии установлено, что содержание суммы флавоноидов в сырье зверобой продырявленный составляет от 2,15 до 3,9 %. Согласно требованиям ФС содержание суммы флавоноидов в траве зверобоя должно составлять не менее 1,5 %, т.е. все проанализированные образцы соответствуют требованиям нормативной документации.
· Установлено, что содержание суммы флавоноидов в водном извлечении в пересчете на рутин методом прямая спектрофотометрия составляют от 0,47 до 1,33%.
· Содержание суммы флавоноидов, определенное методом дифференциальной спектрофотометрии с добавлением алюминия хлорида, составляет от 0,42 до 1,25%.
· Установлено, что
содержание оксикоричных кислот, определенное методом прямая спектрофотометрия
составляет от 0,36 до 0,89 %.
3.4 Фармакогностический анализ сырья
«Тысячелистника обыкновенного трава»
Морфологический анализ сырья.
Цельные или частично измельченные цветоносные побеги. Стебли округлые, опушенные, с очередными листьями, длиной до 15 см. Листья длиной до 10 см, шириной до 3 см, продолговатые, дважды-перисторассеченные на ланцетные или линейные доли. Корзинки продолговато-яйцевидные, длиной 3 - 4 мм, шириной 1,5-3 мм, в щитковидных соцветиях или одиночные. Обвертки корзинок из черепитчатых продолговато-яйцевидных листочков с перепончатыми буроватыми краями. Цветоложе корзинок с пленчатыми прицветниками. Краевые цветки пестичные. Срединные цветки трубчатые обоеполые.
Цвет стеблей и листьев серовато-зеленый, краевых цветков - белый, реже розовый, срединных - желтоватый. Запах слабый, ароматный. Вкус пряный, горьковатый.
Микроскопический анализ ЛРС.
В результате микроскопического исследования были обнаружены:
· устьица с обеих сторон листа, преобладают на нижней, окружены 3-5 клетками эпидермы (аномоцитный тип устьичного аппарата) - рис. 28;
· волоски простые, бичевидные (рис. 35), в основании имеют 4-7 коротких клеток с тонкими оболочками рис. 29), конечная клетка волоска длинная, слегка извилистая, с толстой оболочкой и узкой нитевидной полостью (в сырье часто сломана);
· эфирно-масличные железки, состоящие из 8 (реже 6) выделительных клеток, расположенных в 3 ряда и 4 (реже 3) яруса.
· идиобласты с каплями эфирного масла.
· жилки листа, сопровождающиеся схизогенными вместилищами с желтоватым зернистым или маслянистным содержимым.
По установленным морфологическим и
микродиагностическим признакам сырье тысячелистника соответствует требованиям
НД.
3.5 Исследование качественного
состава и количественного содержания БАВ
Исследование качественного состава комплекса БАВ.
Общий фитохимический анализ.
По результатам проведенного общего фитохимического анализа в сырье тысячелистника трава Achillea millefolium L., были обнаружены следующие БАВ: эфирное масло (основной компонент - хамазулен, придает маслу синий цвет), флавоноиды, оксикоричные кислоты.
Исследование количественного содержания комплекса БАВ.
Количественное содержание эфирного масла.
Определение содержание эфирного масла проводили методом гидродистиляции. Согласно требованиям частной фармакопейной статьи, содержание эфирного масла в траве тысячелистника должно составлять не менее 0,1 %, т.е. все проанализированные образцы соответствуют требованиям НД.
Также было проанализировано содержание хамазулена в эфирном масле.
Количественное содержание суммы флавоноидов.
Количественное содержание суммы флавоноидов в водном извлечении проводили методом дифференциальной спектрофотометрии в пересчете на гиперозид.
Установлено, что содержание суммы флавоноидов составляет от 0,11 до 0,20 %.
Количественное содержание суммы флавоноидов определяли также методом прямой спектрофотометрии в пересчете на рутин.
Было установлено, что в пересчете на рутин содержание флавоноидов составляет от 0,20 до 0,41 %.
Количественное содержание суммы оксикоричных кислот.
Содержание суммы оксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту определяли методом прямой спектрофотометрии.
Было установлено, что содержание суммы оксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту составляет от 0,27 до 0,49%.
Анализ содержания БАВ в водном извлечении при настаивании сырья в термосе.
Некоторые потребители, вопреки инструкции по способу применения, заваривают травы путем настаивания в термосе лекарственных трав и сборов. Для сравнительного анализа количественного содержания суммы БАВ было проведено исследование водного извлечения на примере тысячелистника с учетной площадки №14 и №3.
Согласно инструкции по применению, было взято сырье в количестве 3 столовые ложки и добавлено 200 мл воды горячей из чайника бытового. В течение ночи производили настаивание. Утром следующего дня замеряли объем полученного извлечения. Время настаивания составило около 10 часов.
Далее путем прямой спектрофотометрии проводили анализ количественного содержания суммы флавоноидов в пересчете на рутин, суммы оксикоричных кислот - в пересчете на хлорогеновую кислоту.
Также проводили дифференциальную спектрофотометрию для анализа содержания суммы флавоноидов с алюминия хлоридом в пересчете на гиперозид.
В результате проведенного анализа было установлено, что содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в сырье тысячелистника составляет от 0,46 до 0,48%.
Содержание суммы оксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту составляет от 0,7 до 0,72%.
В результате проведено дифференциальной спектрофотометрии установлено, что сумма флавоноидов в пересчете гиперозид в водном извлечении с алюминия хлоридом составляет от 0,45 до 0,94%.
Выводы.
· Установлено, что количественное содержание суммы флавоноидов, определенное методом дифференциальной спектрофотометрии, составляет от 0,11 до 0,20 %.
· Методом прямой спектрофотометрии было установлено, что в пересчете на рутин в сырье тысячелистника обыкновенного количественное содержание флавоноидов составляет от 0,20 до 0,41 %.
· В результате проведенного анализа водного извлечения тысячелистника, полученного путем заваривания в термосе было установлено, что содержание суммы флавоноидов в сырье тысячелистника в пересчете на рутин от 0,46 до 0,48%, т.е. больше, чем при обычном настаивании.
· В результате
проведенной прямой спектрофотометрии было установлено, что количественное
содержание суммы оксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту
составило от 0,27 до 0,49 %, а при настаивании в термосе - от 0,7 до 0,72%.
3.6 Фармакогностический анализ сырья
«Черники обыкновенной побеги» Vaccinii myrtilli cormus
Морфологический анализ сырья.
Смесь цельных или изломанных верхушек побегов, отдельных стеблей, листьев, реже бутонов, цветков и плодов. Стебли длиной до 150 мм. Вкус сырья горьковато-вяжущий.
Микроскопический анализ ЛРС.
В результате микроскопического исследования были обнаружены:
· извилистые клетки эпидермы; с устьицами аномоцитного типа;
· булавовидные железки с многоклеточной двурядной ножкой и овальной головкой, расположенные по жилкам и на краевых зубчиках;
· кристаллоносная обкладка из призматических кристаллов вдоль жилок с нижней стороны листа;
· одноклеточные толстостенные волоски с грубой бородавчатой поверхностью, расположены с верхней стороны.
Выявленные внешние и анатомические признаки соответствуют требованиям фармакопейной статьи ГФ.
Результаты исследования качественного и количественного анализа БАВ.
Общий фитохимический анализ.
По результатам проведенного общего фитохимического анализа в сырье черники обыкновенной были обнаружены следующие БАВ: конденсированные дубильные вещества (действующая группа БАВ), флавоноиды (вторая действующая группа БАВ), оксикоричные кислоты.
Качество побегов соответствует требованиям ФС 42-2948-93.
Исследования количественного содержания комплексов БАВ.
Количественное содержание дубильных веществ
Количественное содержание дубильных веществ в сырье определяли методом перманганатометрии, согласно ГФ XI.
Количественное содержание суммы флавоноидов.
Количественное содержание суммы флавоноидов в сырье побегов черники обыкновенной определяли методом дифференциальной спектрофотометрии. Установлено, что содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин составляет от 0,33 до 1,0 %.
Количественное содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин определяли также методом прямой спектрофотометрии. Установлено, что содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин составляет от 1,63 до 2, 89 %.
Количественное содержание суммы оксикоричных кислот.
Количественное содержание суммы оксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту определяли методом прямой спектрофотометрии.
Было установлено, что количественное
содержание суммы оксикоричных кислот в сырье черники обыкновенной составляет от
3,83 до 7,19%.
Заключение
· По результатам проведенного общего фитохимического анализа в сырье черники обыкновенной были обнаружены следующие БАВ: конденсированные дубильные вещества (действующая группа БАВ), флавоноиды (вторая действующая группа БАВ), оксикоричные кислоты.
· Количественное содержание суммы флавоноидов в сырье побегов черники обыкновенной проводили методом дифференциальной спектрофотометрии. Установлено, что содержание суммы флавоноидов составляет от 0,33 до 1,0 %.
· Количественное содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин составляет от 1,63 до 2, 89%.
· В результате проведенной прямой спектрофотометрии было установлено, что количественное содержание суммы оксикоричных кислот в сырье черники обыкновенной составляет от 3,83 до 7,19%.
· Было установлено, что количественное содержание дубильных веществ, проведенное методом титриметрии по методике ГФ XI, составляет от 10,08% до 14,81%.
Результаты товароведческого анализа
Влажность.
Влажность является показателем доброкачественности сырья и необходима для создания оптимальных условий хранения.
Влажность сырья зверобоя продырявленного составила от 4,15 до 7,33%, что соответствует требованиям НД и не превышает 13%.
Влажность сырья тысячелистника обыкновенного составила от 6,2 до 7,35%, что соответствует требованиям НД и не превышает 13%.
Влажность сырья черники обыкновенной составила от 4,05 до 5,24%, что соответствует требованиям НД и не превышает 13%.
Зольность.
Зола общая отражает содержание в сырьевой части различных неорганических веществ, свойственных растению, и минеральных примесей (земля, песок, пыль и др.), которые могут накапливаться в сырье в процессе вегетации растения.
Значения золы общей сырья зверобоя продырявленного составила от 5,36 до 7,38%, что соответствуют требованиям НД и не превышают 8%.
Значения золы общей сырья тысячелистника обыкновенного составила от 7,03 до 10,71%, что соответствуют требованиям НД и не превышает 15%.
Значения золы общей сырья черники обыкновенной составила от 3,30 до 4,0%, что соответствуют требованиям НД и не превышает 4%.
. Проведенный литературный обзор позволил определить место сбора анализируемых растений, а также установить оптимальные сроки сбора зверобоя продырявленного, тысячелистника обыкновенного и черники обыкновенной.
2. В результате ресурсоведческих исследований было установлено, что:
а) биологический запас зверобоя продырявленного травы в пределах с. Плотниково составляет 2265,78 кг; биологический запас тысячелистника обыкновенного травы составляет 646,14 кг;
б) биологический запас черники обыкновенной побегов в пределах Кудряшовского бора составляет 2 094 013,5 кг;
в) в пределах массива с. Плотниково ежегодная возможная заготовка зверобоя продырявленного травы не должна превышать 115,5 кг; ежегодная возможная заготовка тысячелистника обыкновенного травы не должна превышать 23,05 кг.
г) в пределах массива Кудряшовский бор ежегодная возможная заготовка черники обыкновенной побегов не должна превышать 78 005,7 кг.
3. Сравнительный макроскопический и микроскопический анализы выявили идентичность испытуемых образцов и их соответствие требованиям ФС по показателям «Внешние признаки» и «Микроскопия».
4. Влажность сырья зверобоя продырявленного травы составила от 4,15 до 7,33%;
Влажность сырья тысячелистника обыкновенного трава составила от 6,2 до 7,35%;
Влажность сырья черники обыкновенного составила от 4,05 до 5,24%;
У всех представленных образцов влажность не превышает 13%, что соответствует требованиям НД.
5. Зольность сырья зверобоя продырявленного составила от 5,36 до 7, 38%, т.е. не превышает 8%, что соответствует требованиям НД.
Зольность сырья тысячелистника обыкновенного составила от 7,03 до 10,71%, т.е. не превышает 15%, что соответствует требованиям НД.
Зольность сырья черники обыкновенной побегов составила от 3,30 до 4,0 %, т.е. не превышает 4%, что соответствует требованиям НД.
6. На основе фитохимического анализа в сырье были обнаружены следующие БАВ:
а) зверобоя продырявленного трава: флавоноиды (действующая группа БАВ), антраценпроизводные, дубильные вещества конденсированной природы, оксикоричные кислоты;
б) тысячелистника обыкновенного трава: эфирное масло, флавоноиды, оксикоричные кислоты;
в) черники обыкновенной побеги: конденсированные дубильные вещества (действующая группа БАВ), флавоноиды (вторая действующая группа БАВ), оксикоричные кислоты;