Таким образом, иммуногистохимическое исследование выявило ряд особенностей тканевого распределения макрофагов, фибробластов, антитриптической активности, а также экспрессии PCNA, которые могут после соответствующего анализа быть представлены в обосновании механизмов формирования пневмосклероза при хроническом эндотоксикозе.
Суммируя, укажем наиболее интересные моменты собственных результатов.
Во-первых, формирование соединительной ткани в легких при хроническом эндотоксикозе, вызванном ТХМ и ЛПС (ведущий механизм - хроническая печеночная недостаточность и недостаточное обезвреживание эндогенных токсических соединений) и процессе, вызванном гентамицином и ЛПС (ведущий механизм - хроническая почечная недостаточность и недостаточная элиминация эндогенных токсических соединений), имеет сходную динамику и выраженность. В первые 30 суток процесс идет преимущественно периваскулярно и перибронхиально, в поздние сроки хронического ЭТ доминирует периферический рост соединительной ткани.
Далее, имеются существенные различия в выраженности и динамике роста соединительной ткани в краниальных, латеральных, каудальных и прикорневых отделах легких, что не в полной мере объяснимо различиями васкуляризации и строения бронхиального дерева.
Наконец, при иммуногистохимическом исследовании также выявляются гистотопографические различия в выраженности и динамике экспрессии антигенов, маркирующих клетки-участники формирования пневмофиброза.
Резюмируя представленные данные и обсуждение, мы можем вилеть в легких два основных механизма формирования соединительной ткани при хроническом ЭТ.
Первый механизм, характерный для относительно ранних сроков процесса (в наших опытах - до 30 суток) инициализируется за счет подост-рого сосудистого повреждения с последующим прямой и эндотелий-опосредованной активации альвеолярных, перибронхиальных и интерсти-циальных макрофагов. Особенности сосудистой и макрофагальной гистото-пографии в легких обеспечивают в этот период максимально выраженный прирост соединительной ткани в сегментах легких, расположенных в латеральном и каудальном направлении от корня легкого. Сам характер пнев-москлероза в этот момент в основном - мелкоочаговый с выраженным пе-рибронхиальным и периваскулярным приростом соединительной ткани. Макрофаги, фибробласти и миофибробласты легких в этот период обладают сравнительно высоким регенераторным потенциалом, экспрессия ингибитора протеолиза альфа-1-антитрипсина - увеличена в областях максимального прироста соединительной ткани.
Второй механизм фиброгенеза характерен для более поздних сроков хронического ЭТ (в наших опытах - 60-90 суток), постепенно дополняет, а затем вытесняет первый. В его основе лежит постоянная и диффузная стимуляция фиброгенеза альвеолярными макрофагами и клетками лимфо-макрофагальных инфильтратов. Эти процессы выражены диффузно и примерно в равной степени во всех периферических сегментах легких. По своему характеру такая соединительная ткань менее стабильна, пролиферативный потенциал фибробластов и макрофагов в ней значительно меньше, а низкая экспрессия альфа-1-антитрипсина указывает на высокую активность процессов биодеградации матрикса соединительной ткани.
В прикорневых отделах легких процесс формирования соединительной ткани, несмотря на ее исходно большее представительство, не идет столь интенсивно на протяжении всех сроков эксперимента, что явно указывает на роль подвижности легких в поддержании микротравматизма альвеол и стимуляции новообразования соединительной ткани при хроническом ЭТ.
Важным моментом исследования стало то, что выявленные при хроническом ЭТ изменения имеют однотипный характер для двух моделей. Из это следует, что как в условиях ограничения обезвреживания эндогенных токсических соединений (модель ТХМ + ЛПС), так и при уменьшенном их удалении из организма (модель гентамицин + ЛПС) гематогенное проникновение в легкие токсинов обеспечивает сходное по выраженности и динамике повреждение, завершающееся тканевой перестройкой, формированием соединительной ткани и развитием пневмосклероза.
ВЫВОДЫ
1. При хроническом эндотоксикозе, вызванном тетрахлорметаном и бактериальным липополисахаридом (1) и гентамицином и бактериальным липополисахаридом (2), у крыс наблюдается однотипная тканевая перестройка легких с развитием диффузного и мелкоочагового пневмосклероза, что указывает на единую природу этого процесса. Его особенностями является более раннее (30-е суток эксперимента) новообразование соединительной ткани вблизи корня легкого и в сегментах, расположенных в каудальном направлении от него, а также более позднее и выраженное (60-90 суток) - во всех периферических сегментах легкого.
2. Формирование пневмосклероза в первые 30 суток хронического эндотоксикоза идет преимущественно за счет увеличения объема перибронхиальной и периваскулярной соединительной ткани, в котором принимают активное участие макрофаги бронхов и интерстиция, а также миофибробласты с высоким процентом среди них PCNA-позитивных клеток. В поздние сроки хронического эндотоксикоза прогрессирование пневмосклероза идет преимущественно за счет новообразования соединительной ткани в межальвеолярных перегородках при участии лимфомакрофагальных инфильтратов, а также альвеолярных макрофагов. Принципиальным моментом является образование к 90-м суткам эксперимента собственной сосудистой сети очагов пневмосклероза.
3. Начиная с 30-х суток хронического эндотоксикоза в межальвеолярных перегородках выявляется необратимое уменьшение количества эпителиоцитов с низким процентом PCNA-позитивных клеток, что указывает на частично заместительный характер формирующегося пневмосклероза на всех сроках хронического эндотоксикоза.
4. Активность альфа-1-антитрипсина в легких при хроническом эндотоксикозе имеет двухфазную динамику: двукратное увеличение экспрессии преимущественно в периферических сегментах легких в ранние сроки процесса и повсеместное прогрессирующее снижение - на сроках 60-90 суток. Низкая экспрессия альфа-1-антитрипсина является фактором нестабильности новообразованной соединительной ткани в легких и поддерживает необратимое формирование пневмосклероза.
5. Для оценки развития пневмосклероза при хроническом эндотоксикозе наиболее информативным является раздельный подсчет и сравнение объемной доли соединительной ткани и экспрессии виментина в сегментах легких, расположенных в различных направлениях от корня легкого и вблизи негоодсчет объемной доли соединительной ткани. Наличие собственных сосудов в соединительной ткани и низкая экспрессия альфа-1-антитрипсина являются признаками сформированного пневмосклероза.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Морфометрия сердца и легких при ингаляции микробного липополисахарида // Материалы 61-й итоговой конференции НОМУС ВолГМУ. - Волгоград, 2003. - С. 150-151. (соавт. Д.Е. Марков).
2. Взаимосвязь нарушений обмена липидов и вторичного повреждения легких при хроническом экспериментальном эндотоксикозе // Успехи современного естествознания - 2003. - N5. - С. 81-82. (соавт. В.Б.Писарев, В.В.Новочадов).
3. Аккумуляция липидов в альвеолярных макрофагах в морфогенезе хронического эндотоксикоза // Успехи современного естествознания - 2003. - N8 - С. 113. (соавт. В.Б.Писарев, В.В.Новочадов).
4. Морфология легких при хроническом эндотоксикозе у кошек // Матер IV н.-пр. конференции мол. ученых мед. факультетов России. - Тула, 2004. - С. 29-30.
5. Темпы формирования пневмосклероза при различных моделях хронического эндотоксикоза // Морфология процессов индивидуального развития, адаптации и компенсации: Труды ВолГМУ. - Т. 62, вып.1. - Волгоград, 2005. - С. 52-55.
6. Механизмы развития пневмопатии при различных путях проникновения эндотоксинов в легочную ткань // Материалы Всероссийского симпозиума «Эндотоксикоз: природа, диагностика, принципы коррекции»: Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН. - 2005. - №1. - С. 34-35. (соавт. Ю.В. Дегтярь).
7. Морфометрия висцеральных ганглиев сердца и легких в условиях вегетативной дизрегуляции при хронической интоксикации. // Совр. наукоемкие технологии. - 2005. - №2. - С. 34. (соавт. Д.Ю. Гуров, А.Н.Горячев, Ю.В.Ярошенко).
8. Иммуногистохимическая характеристика межальвеолярной перегородки легких при хроническом ингаляционном отравлении // Материалы 10-й конференции молодых исследователей Волгоградской области. Напр. 16-17. - Волгоград, 2005. - С. 12-13.
9. Основные морфометрические критерии ингаляционных и неингаляционных повреждений легких // Матер. н.-пр. конф. «Совершенствование и развитие … здравоохранения Волгоградской области». - Волгоград, 2005. - С. 30-33. (соавт. С.И.Зайченко, В.В.Новочадов, Ю.В.Дегтярь).
10. Характеристика сосудистого компонента в токсическом повреждении легочной ткани // Успехи современного естествознания. - 2006. - N2. - С. 51. (соавт. Ю.В.Дегтярь, В.В.Новочадов).
11. Органопатология ингаляционных поражений бактериальными полисахаридами // Материалы II съезда Российского общества патологоанатомов. - М., 2006. - Т. 1. - С. 302-304. (В.В.Новочадов, А.Н.Горячев, И.В.Зарипова).
12. Механизмы формирования пневмосклероза при хроническом экспериментальном эндотоксикозе // «Морфогенез и регенерация: Материалы 2-й Всероссийской заочной электронной конференции. - Курск: КГМУ, 2006. - С. 8-10. (соавт. В.В.Новочадов).