Материал: metodichka_6

3.Серологический метод имеет значение для эпидемиологической рас-

шифровки заболеваемости, т.к. антитела в диагностически значимых количествах появляются у больных на 2-й неделе заболевания.

4. Этиологическая структура пищевых отравлений. Микробиологическая

диагностика пищевых отравлений бактериальной природы.

Пищевые отравления – острые кишечные инфекции. Для их возникнове-

ния необходимым условием является предварительное попадание, размножение и накопление микроорганизмов в пищевых продуктах. К возбудителям относят обширную группу грамотрицательных бактерий (энтеробактерии, вибрионы,

кампилобактерии и др.), а также представителей грампозитивной микрофлоры

(стафилококки, бациллы, клостридии и др.).

Характерные признаки пищевых отравлений:

1)больной человек не является источником инфекции для окружающих;

2)короткий инкубационный период, острое начало;

3)короткое течение с преимущественным поражением желудочно-

кишечного тракта (за исключением ботулизма) и соответствующими симптомами заболевания: тошнота, рвота, резкие боли в животе, диарея;

4)групповой характер заболевания;

Пищевые отравления микробной природы подразделяются:

1.Пищевые токсикоинфекции – возникают в результате размножения и на-

копления бактерий в пищевых продуктах. Важным условием развития кли-

ники пищевого отравления является массивная обсемененность пищевых продуктов микроорганизмами (более 105 КОЕ в 1 г или 1 мл). Возбудителями заболеваний являются различные виды условно-патогенных энтеробактерий

(кишечные палочки, протеи, сальмонеллы, кроме возбудителей брюшного тифа и паратифов), галофильные вибрионы, энтерококки и др.

8

2.Пищевые интоксикации – при накоплении в пищевых продуктах экзоток-

синов бактерий (S.aureus, C.botulinum, C.perfringens и др.) и микотоксинов микроскопических грибов (Aspergillus, Fusarium и др.).

3.Смешанные пищевые отравления.

Материал на исследование: промывные воды желудка, рвотные массы,

фекалии, остатки пищевых продуктов (для эпидемиологического расследова-

ния).

Микробиологическая диагностика: бактериологический метод.

При подозрении на пищевую интоксикацию необходимо определение со-

ответствующего экзотоксина.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1.Световая микроскопия препаратов из чистых культур V.cholerae, окрашенных по Граму.

2.Изучение схемы бактериологического исследования фекалий больного с

клиническим диагнозом холера при круглосуточном режиме работы лаборатории.

I этап исследования.

Посев фекалий больного на 1% пептонную воду (1-й пептон) и щелочной агар. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

II этап исследования (через 6 часов).

При наличии возбудителя в исследуемом материале, в 1-м пептоне образуется нежная пленка. Пересев с 1-го пептона на 2-й пептон и щелочной агар. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

III этап исследования (через 6 часов).

Пересев со 2-го пептона на щелочной агар. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

IV этап исследования.

9

Изучение характера роста на щелочном агаре _______________________. Из части подозрительной колонии готовят мазки с окраской по Граму и производят постановку ориентировочной реакции агглютинации на стекле с О1холерной и О-139 диагностическими сыворотками. Оставшуюся часть подозрительной колонии пересевают на скошенный щелочной агар с целью выделения чистой культуры. Посевы ставят в термостат при температуре 370С на 24 часа.

V этап исследования.

Учет характера роста на скошенном щелочном агаре _________________. Идентификация выделенной культуры:

а) по антигенным признакам – постановка и учет реакции агглютинации на стекле с О1-холерной сывороткой и сыворотками Инаба и Огава

_____________. Постановка развернутой реакции агглютинации с О1-холерной сывороткой и сывороткой Ина-

ба____________________________________________________ ;

б) по биохимическим признакам – посев на среды с сахарозой, маннозой,

арабинозой;

в) дифференциацию V.cholerae от V.El-Tor проводят по чувствительности к холерным фагам и полимиксину. Для выбора правильной антибиотикотерапии определяют чувствительность выделенной культуры к антибиотикам диско-

диффузионным методом. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

VI этап исследования. Учет результатов.

3. Учет определения чувствительности возбудителя к антибиотикам.

10

4. Вывод (определение вида выделенной культуры, учет антибиотико-

граммы).

3. Изучение схемы бактериологического исследования фекалий больного с предполагаемым диагнозом «пищевая токсикоинфекция».

I этап исследования.

Посев исследуемого материала на среды Эндо, кровяной агар, ЖСА. Посе-

вы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

IIэтап исследования.

1.Изучение характера роста на средах

Эндо __________________________________________________________,

кровяном агаре _________________________________________________,

ЖСА __________________________________________________________. 2. Приготовление мазков из выросших колоний, окраска по Граму, микро-

скопия ____________________________________________________________.

IIIэтап исследования.

1.Определение чистоты выделенной культуры _____________________.

2.Идентификация выделенной культуры по биохимическим свойствам с помощью энтеротест-систем. 3. Определение антибиотикочувствительности диско-диффузионным методом.

IV этап исследования. Учет результатов.

Учет антибиотикограммы, заключение о виде возбудителя.

11