d - толщина слоя жидкости в см (толщина кюветы);
t - время в сек.;
б - отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки в мл, к массе навески в г;
в - степень дополнительного разведения вытяжки;
г - степень постоянного разведения вытяжки в реакционной смеси.
Результаты показывают изменение оптической плотности за 1 сек на 1 г сырой массы. Активность фермента выражали в усл. ед.
Содержание малонового диальдегида (МДА) определяли на основе реакции взаимодействия этого соединения с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) [10]. Для этого 1 г растительного материала растирали в 10 мл 0,35М NaCl и 1 мл трисHCl буфере. К 3 мл вытяжки из центрифугата добавляли 2 мл 0,5% ТБК в 20% ТХУ. Пробирки помещали в кипящую водяную баню на 30 мин. После охлаждения пробы фильтровали и фильтрат спектрофотометрировали при 532 нм. Расчет проводили с использованием молярного коэффицента экстинции (1,56 • 10-5 М-1·см-1). Содержание МДА выражали в мкМ / г сырой массы.
Массу надземной части растений и корневой системы определяли путем взвешивания на аналитических весах (Sartorius CP 64). Линейные параметры (высота побегов, длина корней) определяли с помощью линейки.
Биохимические показатели потребительских качеств семян (количество протеина, масличность, влажность) определяли на приборе марки Infratec 1241 швейцарской фирмы FOSS.
Дисперсионный и корреляционный анализы экспериментальных данных проводили в соответствии с Б.А. Доспеховым на ПК с помощью программ EXEL [11].
Результаты и обсуждение
Особенности возделывания каждого сорта сои и некоторые результаты исследований, связанные с технологией, представлены в таблице 1.
Таблица 1. Особенности технологий возделывания сортов сои в ООО «Дубовицкое» и их результативность (2018 г.)
|
Средства защиты |
Результативность применения |
Удобрения, регуляторы роста |
Итоговая результативность |
|
|
Зорт Зуша, посев 15.05.18 206 га |
||||
|
17.04.18 Беназол СП 1 кг/т +Имидор Про КС 2 л/т + Скарлет МЭ 0,4 л/т протравливание семян |
Биологическая эффективность 85%; 97% |
Ризоформ 3 л/т+ Статик 0,85 л/т 14.04.18 Диаммофоска 3 ц/га по предпосевную обработку. |
||
|
17.04.18Биостим Старт 0,7 л/т +Гумат Калия 0,3 л/т+ Ультрамаг Молибден 0,5 л/т протравливание семян |
||||
|
04.06.18 Гербицидная обработка: Концепт МД 1 л/га в фазу 1-й тройчатый лист |
Биологическая эффективность 87% (28.06.18) |
04.06. 18Ультрамаг Бор 1 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га |
||
|
29.06.18Гербицидная обработка: Гейзер 2,7 л/га |
Биологическая эффективность 76% (28.07.18) |
29.06.18Ультрамаг Бор 1 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 л + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га Биостим масличный Ультрамаг Фосфор |
||
|
27.07. 18.Внесение фунгицида и инсектицида: Титул Дуо ККР 0,4 л/га + Кинфос КЭ 0,4 л/га |
Биологическая эффективность 76%; 95% |
|||
|
30.08.18Сеникация: Ультрамаг Калий - 3 л/га |
||||
|
14.09.18Десикация: Тонгара 2 л/га |
Уборка 28.09.18 Урожайность 16 ц/га |
|||
|
Сорт Ланцетная, посев 17.05.18 104 га |
||||
|
осенью 2017 г внесен Биокомпозит-Коррект 2 л/га + КАС-32 в 40 л/га с последующей заделкой |
||||
|
15.04.18 Весна 2018: Диаммофоска - 3 ц/га, Сульфоаммофос - 1 ц/га. |
||||
|
15.04.18 Беназол СП 1 кг/т +Имидор Про КС 2 л/т + Скарлет МЭ 0,4 л/т протравливание семян |
Биологическая эффективность 78%; 99% |
17.04.18Биостим Старт 0,7 л/т +Гумат Калия 0,3 л/т+ Ультрамаг Молибден 0,5 л/т 17.05.18 (в день сева) Ризоформ 3 л/т+ Статик 0,85 л/т |
||
|
12.06.18 Гербицидная обработка: Гермес МД 1 л/га в фазу 1-й тройчатый лист |
Биологическая эффективность 73% (26.06.18) |
12.06. 18Ультрамаг Бор 0,5 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 л/га + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га |
||
|
27.06.18 Гербицидная обработка: Гейзер 2,7 л/га Кинфос КЭ 0,4 л/га |
Биологическая эффективность 65% (08.07.18) 97%(03.07.18) |
Ультрамаг Бор 0,5 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га Биостим масличный0,5 л/га Ультрамаг Фосфор 3 л/га |
||
|
28.07.18 Внесение фунгицида и инсектицида: Титул Дуо ККР 0,4 л/га + Кинфос КЭ 0,4 л/га |
Биологическая эффективность 85%; 98% |
|||
|
14.08.18Сеникация: Ультрамаг Калий - 3 л/га |
||||
|
25.08.18Десикация: Тонгара 2 л/га |
Уборка 06.09.18 Урожайность 21 ц/га |
|||
|
Сорт Свапа, посев 19.05.18 62 га |
||||
|
осенью 2017 г внесен Биокомпозит-Коррект 2 л/га + КАС-32 в 40 л/га с последующей заделкой |
||||
|
15.04.18 Весна 2018: Диаммофоска - 3 ц/га, Сульфоаммофос - 1 ц/га. |
||||
|
22.04.18 Беназол СП 1 кг/т +Имидор Про КС 2 л/т + Депозит МЭ 1,2 л/т протравливание семян |
Биологическая эффективность 74%; 95% |
19.05.18 (в день сева) Биостим Старт 0,7 л/т +Гумат Калия 0,3 л+ Ультрамаг Молибден 0,5 л/т протравливание семян 22.04.18 Ризоформ 3 л/т+ Статик 0,85 л/т |
||
|
Гербицидная обработка: Концепт МД 1 л/га в фазу 1-й тройчатый лист 13.06.18 |
Биологическая эффективность 64% (26.06.18) |
13.06. 18 Ультрамаг Бор 0,5 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 л + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га |
||
|
27.06.18 Гербицидная обработка: Кинфос КЭ 0,4 л/га 12.07.18 Гейзер 2,7 л/га |
Биологическая эффективность 80% (10.07.18) |
12.07.18 Ультрамаг Бор 0,5 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 л + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га Биостим масличный 0,5 л/га Ультрамаг Фосфор 3 л/га |
||
|
28.07. 18.Внесение фунгицида и инсектицида: Винтаж 0,8 л/га + Кинфос КЭ 0,4 л/га |
Биологическая эффективность 79%; 91% |
|||
|
21.08.18 Сеникация: Ультрамаг Калий - 3 л/га |
||||
|
13.09.18 Десикация: Тонгара 2 л/га |
Уборка 20.09.18 Урожайность 18,3 ц/га |
|||
|
Сорт Мезенка ПР 2, посев 25.05.18 68 га |
||||
|
осенью 2017 г внесена Диаммофоска 1,5 ц/га |
||||
|
Весна 2018: Калиймаг 1 ц/га, Сульфоаммофос - 1 ц/га. |
||||
|
15.04.18 Беназол СП 1 кг/т +Имидор Про КС 2 л/т + Скарлет МЭ 0,4 л/т протравливание семян |
Биологическая эффективность 87%; 99% |
15.04.18 Биостим Старт 0,7 л/т +Гумат Калия 0,3 л/т+ Ультрамаг Молибден 0,5 л/т протравливание семян 25.05.18 Ризоформ 3 л/т+ Статик 0,85 л/т (в день сева) |
||
|
16.06.18 Гербицидная обработка: Концепт МД 1 л/га в фазу 1-й тройчатый лист |
Биологическая эффективность 67% (27.06.18) |
16.06.18 Ультрамаг Бор 0,5 л/га + Ультрамаг Комби Бобовые 0,5 л/га + Ультрамаг Молибден 0,5 л/га |
||
|
12.07.18 Гербицидная обработка: Гейзер 2,7 л/га |
Биологическая эффективность 70% (28.07.18) |
|||
|
29.07. 18 Внесение фунгицида и инсектицида: Винтаж МЭ 0,7 л/га + Кинфос КЭ 0,4 л/га |
Биологическая эффективность 89%; 95% |
29.07.18 Биостим масличный 0,5 л/га Ультрамаг Молибден 0,5 л/т |
||
|
Сеникация: Ультрамаг Калий - 3 л/га 20.08.18 |
||||
|
Десикация: Тонгара 2 л/га 17.09.18 |
Уборка 26.09.18 Урожайность 15 ц/га |
Установлено, что поля, идущие под посев сои, имеют повышенную кислотность: от рН 4,3 до рН 5,3. Это не способствует образованию клубеньков на корнях, повышению урожайности.
Относительно высока зараженность посевного материала патогенами: семена сорта Зуша имеют 10%-ную зараженность (в том числе аскохитозом - 3%, плесневыми грибами - 5%), что привело к снижению всхожести до 87%. Семена сорта Свапа имели общее заражение 16%, в том числе аскохитозом - 5%, альтерниариозом - 4%. Семена сорта Мезенка ПР-2 имели зараженность 12%, в том числе альтернариозом - 7%. Поэтому комплексное использование протравителей семян было оправдано. Семена сорта Ланцетная имели зараженность альтернариозом только 1%.
Применение гербицидов против сорных растений было эффективным, учитывая достаточно низкую начальную засоренность посевов, оставшиеся живыми сорные растения не были конкурентными для культуры.
Проявление вредоносности болезней и вредителей было на низком уровне, с учетом использования фунгицидных и инсектицидного протравителей семян, а также своевременного применения инсектицида и фунгицида при вегетации, и существенно не повлияло на урожайность и качество зерна.
Можно предположить, что заметное влияние (в том числе стрессовое) на развитие растений сои оказали погодные условия, особенно малое количество осадков в мае - 22,8 мм (минус 28,2 к среднемноголетнему показателю), в июне - всего 9,4 мм (минус 63,6 к среднемноголетнему показателю), в июле осадков выпало больше - 57,2 мм, но меньше по сравнению со среднемноголетним показателем на 23,8 мм. Температура воздуха в мае составляла 17,40С, что выше среднемноголетнего показателя на 4,10С, в июне примерно соответствовала среднемноголетнему показателю, а в июле-августе была выше на 4-3,1 0С.
На фоне представленной технологии возделывания сортов и результативности применяемых препаратов получены следующие результаты биохимических исследований растений и зерна сои.
При отсутствии изменений активности пероксидазы у сорта Ланцетная в фазу 1-й тройчатый лист произошло 30% увеличение процессов перекисного окисления мембранных липидов за счет усиления на 12% метаболических процессов, о чём свидетельствуют, в частности, ростовые показатели (табл. 2).
Таблица 2. Физиолого-биохимические показатели растений сои при возделывании по интенсивной технологии (2018, ООО «Дубовицкое», Орловская область)
|
Сорт |
28.06.2018 |
11.07.2018 |
03.08.2018 |
||||
|
МДА, мкМ на 1 г |
Пероксидаза, усл. ед. |
МДА, мкМ на 1 г |
Пероксидаза, усл. ед. |
МДА, мкМ на 1 г |
Пероксидаза, усл. ед. |
||
|
Ланцетная |
6,692 |
13,285 |
1,154 |
3,689 |
2,179 |
13,239 |
|
|
Ланцетная (контроль) |
5,128 |
14,475 |
1,385 |
2,278 |
2,692 |
9,918 |
|
|
Мезенка |
4,872 |
8,795 |
1,692 |
4,404 |
3,000 |
8,412 |
|
|
Мезенка (контроль) |
4,487 |
11,147 |
2,026 |
1,883 |
4,102 |
7,471 |
|
|
Свапа |
4,308 |
23,013 |
2,051 |
3,594 |
3,333 |
7,112 |
|
|
Свапа (контроль) |
4,051 |
17,995 |
2,385 |
2,939 |
2,282 |
9,523 |
|
|
Зуша |
3,846 |
11,926 |
1,103 |
2,098 |
1,410 |
4,623 |
|
|
Зуша (контроль) |
3,897 |
9,384 |
1,897 |
1,513 |
1,718 |
2,642 |
Известно, что в молодых и интенсивно делящихся тканях всегда существует повышенное количество АФК. В фазу бутонизации наблюдается значительное усиление активности пероксидазы (на 62%), при этом уровень процессов ПОЛ уменьшился на 20%, ростовые процессы были на уровне контроля. В фазу налива семян усиливаются ростовые показатели, содержание малонового диальдегида (МДА) уменьшается на 24%, при этом наблюдается высокая активность пероксидазы. Возможно, увеличение МДА в опытном варианте связано не с наличием стресс-фактора, а с усилением интенсивности физиолого-биохимических процессов: дыхания, фотосинтеза, роста (табл. 3).
Таблица 3. Показатели роста растений сои при возделывании по интенсивной технологии (2018, ООО «Дубовицкое», Орловская область)
|
Сорт, вариант |
28.06.2018 |
11.07.2018 |
03.08.2018 |
||||||||||
|
Длина, см |
Масса, г |
Длина,см |
Масса, г |
Длина |
Масса, г |
||||||||
|
*П |
* *К |
П |
К |
П |
К |
П |
К |
П |
К |
П |
К |
||
|
Ланцетная |
24,43 |
15,33 |
3,42 |
0,77 |
44,00 |
16,53 |
16,98 |
2,27 |
91,90 |
17,50 |
57,30 |
2,65 |
|
|
Ланцетная (контроль) |
21,67 |
11,33 |
3,04 |
0,57 |
38,83 |
14,33 |
14,38 |
1,73 |
72,27 |
16,50 |
33,82 |
1,89 |
|
|
Мезенка |
20,30 |
11,53 |
2,47 |
0,38 |
36,50 |
12,00 |
9,67 |
1,14 |
80,00 |
16,90 |
45,46 |
2,98 |
|
|
Мезенка (контроль) |
25,47 |
13,47 |
3,41 |
0,59 |
42,50 |
14,33 |
5,88 |
1,29 |
78,67 |
15,00 |
15,02 |
1,36 |
|
|
Свапа |
27,53 |
13,17 |
4,93 |
0,87 |
45,77 |
13,67 |
13,39 |
1,75 |
90,17 |
19,50 |
41,19 |
2,71 |
|
|
Свапа (контроль) |
22,67 |
14,50 |
3,83 |
0,74 |
32,13 |
16,83 |
12,36 |
1,57 |
64,43 |
14,33 |
29,39 |
2,21 |
|
|
Зуша |
25,20 |
14,87 |
6,31 |
1,32 |
38,90 |
18,77 |
16,56 |
2,31 |
100,6 |
16,73 |
47,83 |
3,31 |
|
|
Зуша (контроль) |
22,83 |
15,70 |
3,76 |
0,91 |
40,93 |
16,33 |
11,33 |
1,86 |
76,17 |
19,73 |
27,12 |
3,43 |
У сорта Мезенка на 26% снижена активность пероксидазы в фазу 1-ого тройчатого листа при неизменном уровне МДА, отмечалось снижение ростовых показателей. В фазу бутонизации произошло усиление ростовых показателей, что не привело к усилению процессов липопероксидации, возможно, связанных с высокой активностью ферментов, утилизирующих перекись водорода (в 2,3 раза выше контроля). На фоне третьей обработки, включающей фунгицид, отмечено снижение активности МДА на 37% и увеличение активности пероксидазы на 13%, по сравнению с контролем.
У сорта Свапа во время первого физиолого-биохимического исследования на фоне увеличения ростовых показателей на 28% возросла активность пероксидазы при отсутствии достоверных изменений в содержании МДА. Во время фазы бутонизации обнаружено не только 22% снижение интенсивности утилизации перекиси, но и более низкое содержание малонового диальдегида. Во время анализа (03.08.2018 г.) активность фермента в опыте на 34% ниже контроля, а уровень МДА - на 46%. В условиях действия стрессовых факторов растения, как правило, характеризуются нарушением водного режима и интенсификацией окислительных процессов.
При незначительном снижении свободно-радикальных процессов, в частности, перекисного окисления мембранных липидов у сорта Зуша, отмечено 27%-ное увеличение активности пероксидазы по сравнению с контролем. В последующие дни биохимических анализов после обработок сохраняется тенденция к увеличению активности пероксидазы и уменьшению МДА. Возможно, это связано со специфичностью данного сорта в ответ на обработки.
Таким образом, неоднозначный ответ окислительно-восстановительных процессов у сортов сои может быть связан как с наличием экстремально засушливых погодных условий весны-начала лета 2018 года, так и индивидуальной чувствительностью к обработкам, различным физиолого-биохимическим состоянием до обработок, неодинаковым уровнем инфекционной нагрузки.
Результаты биохимического анализа потребительских качеств семян сои показали в 2018 году незначительное увеличение содержания протеина у сортов Ланцетная, Мезенка, Свапа по сравнению с семенами 2017 года, кроме сорта Зуша (11%) (табл. 4, 5).
Влажность семян варьировала в пределах 8-10 %, что несколько ниже прошлого года выращивания. Масличность данных сортов ниже контрольных образцов; у сортов Ланцетная, Мезенка, Свапа ниже урожая 2017 года на 2,9-4,2 %.
Таблица 4. Результаты биохимического анализа потребительских качеств семян сои (урожай 2017 года)
|
Сорт |
Протеин, % |
Влажность, % |
Жир, % |
Всхожесть % |
Энергия прорастания, % |
|||||||
|
ср. |
мин. |
мак. |
ст. откл. |
ср. |
ср. |
мин. |
мак. |
ст. откл. |
||||
|
Ланцет. |
33,5 |
32, |
34,9 |
0,99 |
13,2 |
24,3 |
23,7 |
24,8 |
0,40 |
95,0 |
88,0 |
|
|
Мезенка |
31,1 |
31,0 |
31,2 |
0,10 |
12,0 |
25,1 |
25,0 |
25,2 |
0,06 |
97,0 |
95,0 |
|
|
Свапа |
31,6 |
31,4 |
31,9 |
0,23 |
13,2 |
24,0 |
23,8 |
24,1 |
0,15 |
95,5 |
90,0 |
|
|
Зуша |
31,8 |
31,6 |
32,3 |
0,26 |
8,8 |
21,0 |
20,9 |
21,3 |
0,16 |
81,0 |
67,0 |
Таблица 5. Результаты биохимического анализа потребительских качеств семян сои (урожай 2018 года)
|
Сорт |
Протеин, % |
Влаж-ность, % |
Жир, % |
|||||||
|
ср. |
мин. |
мак. |
ст. откл. |
ср. |
ср. |
мин. |
мак. |
ст. откл. |
||
|
Ланцетная |
33,6 |
32,7 |
34,3 |
0,58 |
7,8 |
23,6 |
23,2 |
23,9 |
0,31 |
|
|
Мезенка |
32,4 |
31,9 |
33,0 |
0,50 |
9,6 |
24,4 |
24,2 |
24,9 |
0,29 |
|
|
Мезенка (контроль) |
33,3 |
32,5 |
34,0 |
0,58 |
9,6 |
24,6 |
24,3 |
25,0 |
0,31 |
|
|
Свапа |
32,2 |
32,0 |
32,4 |
0,19 |
9,6 |
25,0 |
24,6 |
25,2 |
0,24 |
|
|
Зуша |
35,3 |
34,8 |
36,1 |
0,55 |
10,5 |
23,4 |
23,1 |
23,7 |
0,23 |
|
|
Зуша (контроль) |
33,7 |
33,3 |
34,8 |
0,61 |
10,0 |
25,1 |
24,8 |
25,3 |
0,20 |
Выводы