-дельта-гепатит
-вирус ТТ(но тут ученые еще сомневаются)
Вопрос № 18
Как устроен вирус гриппа? Каковы особенности его генома? Перечислите белки входящие в состав нуклеокапсида.
Вирион имеет сферическую форму и диаметр 80-10 нм, его молекулярная масса 250МД. Его геном представлен однонитевой фрагментированной ( 8 фрагментов( негативной РНК с общем м.м 5 МД. Тип симметрии нуклеокапсида спиральный. Вирион имеет суперкапсид (мембрану), содержащий два гликопротеида – гемагглютинин и нейраминидазу, которые выступают над мембраной в виду различных шипов.
Нуклеокапсид вириона состоит из 8 фрагментов вРНК и капсидных белков, образующих спиралевидный тяж. Капсидные белки: 1) нуклеопротеид, он выполняет структурную и регуляторную роль.
белок РВ1 – транскриптаза (обладает щелочными свойствами)
белок РВ2 - эндонуклеаза (то же)
белок РА – репликаза (обладает кислотными свойствами)
нуклеокапсид окружен матриксным белком(М1-белок), который играет ведущую роль в морфогенезе вириона и защищает вирионную РНК.
Вопрос № 19
Почему для диагностики вирусного гепатита А наиболее приемлемой является методика «захвата» АТ, относящихся к IgМ?
Преимущество метода «захвата» IgМ состоит в том, что АТ этого класса иммуноглобулинов появляются в первичном иммунном ответе и свидетельствуют об активной стадии инфекции, они исчезают после перенесения заболевании. Противовирусные АТ, относящиеся к классу IgG, напротив, длительно время сохраняются после перенесенного заболевания, обеспечивая приобретенный иммунитет. Для обнаружения вируса гепатита А предложен метод ДНК-зондоа: используют в качестве зонда ДНК с комплементарную РНК
(сам метод для любознательных на стр116 в руководстве)
Вопрос № 20
Почему вирусы являются облигатными паразитами?
Облигатные паразиты — организмы, живущие в организме хозяина в анаэробных условиях. Все этапы жизненного цикла микроорганизма связаны с организмом хозяина. Вне организма человека эти микроорганизмы быстро погибают либо не размножаются.
(У вирусов нет собственных белоксинтезирующих систем и отсутствуют собственные энергообразующие системы, следовательно, вне организма им нечем питаться, и они погибают голодной смертью)
Фаготипирование – это методика определения источников заражения при мониторинге окружающей среды и в частности водоемов. Суть ее заключается в маркировке инфекционных штаммов бактерий при помощи бактериофагов. Другими словами, фаготипирование необходимо для идентификации штаммов бактерий, вызвавших тот или иной всплеск инфекционных заболеваний, а также определения состояния водоемов для купания или источников водных ресурсов на предмет их заражения бактериями.
Этот метод стали также использовать для внутривидовой идентификации штаммов бактерий (для определения фаготипа бактерии – фаговара). Для чего необходима внутривидовая идентификация бактерий? Когда человек подвергся инфицированию определенной бактерией, которую высеяли при проведении бактериологических исследований, чтобы назначить эффективное лечение, необходимо знать, конкретно который из штаммов этой бактерии (ее разновидность) присутствует в организме человека. Например, существует много разновидностей стафилококка, к которым трудно подобрать антибиотик, не зная точно их фаготипа. Таким же разнообразием фаговаров «страдают» и бактерии рода Shigella flexneri, Salmonella, энтеропатогенная Escherichia coli и множество других бактерий.
Как проводится фаготипирование? В несколько чашек с питательной средой высевают бактерии неизвестного возбудителя или известного возбудителя, но его неуточненного штамма. В каждую из них наносят капли специфических фагов, заранее известных. Если в чашке оказывается культура бактерий, чувствительных к конкретному фагу, то происходит лизис бактерии (точнее ее оболочки), при котором она разрушается. А в чашке появляются видимые стерильные зоны. Это означает, что штамм бактерии определен. Если такие зоны не образуются, значит, тип запущенного в колонию бактерий фага не соответствует этой бактерии.
2)Повышение концентрации белка путем
повышения экспрессии гена (нарушение регуляции экспрессии)
повышение стабильности белка, увеличение периода полужизни и, соответственно, активности в клетке
дупликация гена (хромосомная перестройка), в результате чего повышается концентрация белка в клетке
3)Транслокация (хромосомная перестройка), которая вызывает
повышение экспрессии гена в нетипичных клетках или в нетипичное время
экспрессия постоянно активного гибридного белка. Такой тип перестройки в делящихся стволовых клетках костного мозга приводит к лейкемии у взрослых.
Вопрос № 17
Каким способом происходит заражение вирусом гепатита В? какие формы вирусных гепатитов вы знаете?
Гепатит В – инфекционное заболевание человека, характеризующееся избирательным поражением печени вирусом. Эта форма гепатита является наиболее опасной по своим последствиям среди известных форм вирусных гепатитов.
Источником заражения вирусом гепатит В является только человек. Заражение происходит не только парентеральным, но и половым путем, а также и вертикальным ( от матери к плоду), т.е. практически заражение вирусом гепатита В возможно разными способами. (а уже гематогенным путем заносится непосредственно в печень и там буянит)
Формы вирусных гепатитов:
-вирусный гепатит А
-вирусный гепатит В
-вирусный гепатит Е
-вирусный гепатит С
Фаготипирование используют в случаях назначения лечения бактериофагами для эффективности их применения. Бактериологический анализ выявляет присутствие в организме конкретного вида бактерии, а с помощью фаготипирования по описанной выше технологии определяют, подходит ли выбранный для лечения препарат бактериофага к данному бактериальному штамму, будет ли осуществлен лизис патогенной бактерии.
Стоит добавить, что активность бактериофага зависит от степени его разведения (концентрации фагов в растворе препарата бактериофага), при которой осуществляется полный лизис выбранной чувствительной бактерии. Готовые препараты бактериофагов допустимо разводить, но наилучший эффект лизиса бактерий будет достигнут при употреблении их в той концентрации, которая предложена фармацевтической промышленностью.
(как уже обговаривалось на паре, для того, чтобы понять есть вирус или нет его в данной питательной среде, мы используем цитопатический эффект, гемадсорбция, цветная реакция, метод бляшек, метод флуоресцирующих антител, а для определения типа вируса - реа-я гемагглютинации и реа-я торможения гемагглютинации (РТГА))
Реа-я Гемагглютинации. Аллантоисную жидкость проверяют на содержание вирууса путем агглютинации куриных эмбрионов на стекле (и в пробирках- титрование вируса). Для постановки реакции на стекле к капле вируссодержащего материала добавляют одну каплю 0,5%-ной взвеси эритроцитов. Ре-я проходит в течение 5 мин. Наличие агглютинации свидетельствует о наличии вируса.
РТГА. Может быть использована для определения типа вируса или типа и титра АТ. Для определения типа вируса на предметное стекло наносят по одной капле вируссодержащего материала (кол-во капель должно соответствовать кол-ву сыворотки). В приготовленные капли последовательно вносят по одной капле типовых сывороток. Контролем служит физ раствор и нормальная сыворотка. Затем в каждую каплю вносят по одной капле 5%-ную взвесь эритроцитов. Затем регистрируют через 5 мин. При соответствии вируса типу сыворотки АТ связывают гемааглютинин вируса и гемааглютинация не наступает (РТГА +). Это реа-я может быть поставлена и в пробирках с целью титрования вируса или АТ (антигемагглютининов).
В защите организма от вирусов участвуют все СистИммун, однако противовирусный иммунитет имеет существенные черты. Они определяются тем, что в первую очередь на проникновение вируса в организм реагирует не система комплемента и МФ, а система интерферонов и Т-киллерных кл. Другая особенность формирования иммунитета связана с тем, что вирусы оказывают слабое АГ воздействие на В-лф и для их активирования, пролиферации и дифференцировки необходимо участие Т-хелперов и соответственно представление последними процессированного вирусного АГ (пептидных фрагментов) при участии молекул МНС класса 2. Поэтому роль МФ и др АПК заключается не только в самом фагоцитозе, сколько в процессированиии и представлении АГ.
Однако интерферонов и ингибиторов оказалось недостаточно для защит от вирусов, поэтому природа создала от вирусов, очень мощный механизм защиты на уровне организма. Он представлен прежде всего Т-цитотоксическими лф и др киллерными кл. Эти кл распознают все чужеродные аг, в том числе и вирусные, представленные им молекулами МНС класса 1. Главное биологическое значение Т-киллерных клеток и заключается в обнаружении и уничтожении любых кл, инфицированных любым аг.
Защитная роль ат в противовирусном иммунитете состоит главным образом в том, что они, взаимодействую с вирусными рецепторами, исключают возможность адсорбции вирусов на мембране клеток и таки образом нейтрализуют их активность, делают невозможным проникновение вируса в кл. только таким образом, т.е исключая возможность проникновения вируса в кл, ат обеспечивают формирование противовирусного иммунитета приобретённый противовирусный иммунитет при наличии постоянных клонов кл памяти может сохраняться пожизненно. (подробно ст 326 учебника «Микра АИ Коротяев, СА Бабичев»)
форма вириона сферическая, диаметр 35-37 нм. Геном – одноцепочечная кольцевая РНК с м.м. 500000 Д( как у вироидов). Вирион имеет 2 белка- внутренний и наружный. Внутренний белок- HDAg кодируется геном HDV, а наружный –геном HBV, т.е это поверхностный аг вируса гепатита В HBsAg. В связи с этим полагают, что HDV – это сателлит вируса гепатита В, и для размножения HDV требуется наличие вируса-хозяина (HBV). Различают 3 геноварианта HDV (1,2,3). Заражение происходит парентерально (с кровью и ее компанентами) или от матери к плоду. С HDV связанно большинство молниеносных форм гепатита В и около 30% циррозов печени у больных гепатитом В. Около 5% носителей HBV носителей инфицированы HDV. Основной метод диагностики- обнаружение специфических к HDV АТ(ИФМ, РИФ и др) или АГ(ПЦР). Вакцинация против гепатита В служит средством профилактики и дельта-гепатита. (немного есть в руководстве на ст 117)
Бактериофаги в медицинской практике применяются в диагностике, лечении и профилактике инфекционных заболеваний.
А. В диагностике бактериофаг применяется при осуществлении культурального метода исследования для определения вида выделенной чистой культуры, также для ее типирования. Изложенный ниже метод использования бактериофага с целью индикации наличия в патологическом материале определенного вида бактерий без выделения его в чистой культуре не получил широкого распространения.
1. Реакция нарастания титра фага основана на способности видового бактериофага реплицироваться только в клетках бактерий «своего» вида. Осуществляется она по следующему принципу. К патологическому материалу добавляют определенное количество видового бактериофага, инкубируют его в термостате, а потом вновь определяют количество фага. Если оно возросло, значит, бактериофаг «на-шел» для репликации клетки «своего» вида, следовательно – в патологическом материале присутствуют бактерии искомого вида.
2. В процессе идентификации чистой культуры используют видовые и типовые бактериофаги. а. Видовые бактериофаги используются для фагоиндикации. Выделенную чистую культуру засевают газоном на пластинчатый агар и капают на него каплю видового бактериофага. Если культура относится к искомому виду, то в месте нанесения капли роста не будет, в противном случае в месте нанесения капли фага будет наблюдаться бактериальный рост. Иногда после нанесения бактериофага чашку Петри с пластинчатым агаром наклоняют, давая капле стечь в краю чашки (из-за чего этот метод называют «стекающая капля»). б. Типовые бактериофаги используются для фаготипирования. Принцип метода заключается в следующем. 1. Типируемый штамм засевают газоном на пластинчатый агар. 2. Затем на засеянную поверхность капают капли типовых бактериофагов (каждую в свой квадрат, помеченный заранее, например, стеклографом на дне чашки Петри). 3. Чашку с посевом инкубируют в термостате. 4. Учитывают опыт, регистрируя «стерильные пятна» или «бляшки» – места отсутствия роста в мес-те нанесения капли бактериофага, к которому чувствителен данный вариант бактерий. 5. Фаговар (фаготип) обозначается путем перечисления типовых фагов, лизирующих данный вариант. Б. Применение бактериофагов (как правило, видовых) для лечения обозначается термином фаготерапия. С целью лечения бактериофаги применяются местно (в виде орошения пораженной поверхности, вкалывания в локальный очаг патологического процесса и т.п.), так как введение их парентеральным путем приводит к развитию иммунного ответа на чужеродный фаговый белок. Если лечебный бактериофаг применяют перорально (для лечения кишечных инфекций), то лучше всего использовать таблетированную форму препарата, покрытую кислотоустойчивой оболочкой, растворяющейся в щелочной среде кишечника – бактериофаги очень чувствительный к низкому рН и быстро инактивируются в кислой среде желудка. В. Фагопрофилактика – использование бактериофага (тоже, как правило, видового) для профилактики развития бактериальной инфекции. В настоящее время применяется для экстренной профилактики брюшного тифа и дизентерии (под экстренной профилактикой понимается комплекс мероприятий для предотвращения развития болезни уже после совершившегося акта инфицирования, т.е. попадания возбудителя в организм пациента).