Материал: Ильина Г.В., Ильин Д.Ю. Ксилотрофные базидиомицеты в чистой культуре

Таблица 6 – Влияние соединений селена на физиологобиохимические параметры мицелия G. lucidum (штамм Gl-1) при хранении

115

По истечению этого периода отмечаются характерные изменения, которые определяются при помощи ряда морфологических и биохимических маркерных показателей: скорость роста, степень базофилии протоплазмы (субъективный, балльный показатель, методика расчета приведена в главе «Материалы и методы исследования»), оксидазная активность культуры на лигнинсодержащем материале.

В опытных вариантах и в контроле культуры сохранили способность к прорастанию в обычные сроки (в течение 3 и 6 месяцев). После 3 месяцев хранения культуры в контроле скорость роста мицелия достоверно снизилась, что объясняется, прежде всего, увеличением периода адаптации. После хранения культуры свыше 6 месяцев в контрольном варианте ферментативная активность мицелия последовательно угасает. После 12 месяцев хранения такие культуры не брались в опыт по причине того, что посевной материал практически утратил способность к прорастанию.

Имеющийся в коллекции штамм S. crispa не проявляет склонности к образованию телеоморфы на традиционных питательных средах в условиях чистой культуры. Для него характерны относительно низкие скорости роста на КГА (контроль), относительно невысокие показатели оксидазной активности. Проведено изучение возможностей увеличения сроков хранения культуры, при помощи внесения в среду соединений селена (табл. 7).

Возможно, вследствие облигатно паразитической стратегии в природе, штамм S. crispa быстро утрачивает способность кнормальному развитию, испытывая стресс в условиях чистой культуры. Существуют предположения, что вне зависимости от относительно низких скоростей роста, энергетические затраты организма в условиях стресса, довольно велики (Костычев, 2009).

116

Таблица 7 – Влияние соединений селена на физиологобиохимические параметры мицелия S. crispa (штамм АI-10) при хранении

Возможно, вследствие облигатно паразитической стратегии в природе, штамм S. crispa быстро утрачивает способность к нормальному развитию, испытывая стресс в условиях чистой культуры. Существуют предположения, что вне зависимости от относительно низких скоростей роста, энергетические затраты организма в условиях стресса, довольно велики (Костычев, 2009). Это, безусловно, определяет некоторое смещение баланса в обменных процессах в ущерб процессам ассимиляции, при одновременной интенсификации образования продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ).

117

Соединения селена, вероятно, стабилизируют протекание обменных процессов в мицелии и, в определенной степени, нивелируют негативное влияние свободных радикалов. Данное предположение нашло подтверждение при определении содержания в мицелии хранящихся культур биохимического маркера окислительного стресса – малонового диальдегида (МДА).

Предварительно, до начала хранения, были изучены особенности жирнокислотного состава мицелия штаммов G. lucidum и S. crispa. Установлены некоторые отличия между штаммами первого вида, второй вид представлен в коллекции одним штаммом. Статистическая оценка выявила достоверность отличий между штаммами G. lucidum лишь по двум из двенадцати идентифицированных жирных кислот, а межвидовые отличия показаны по всем установленным жирным кислотам (табл. 8).

Таблица 8 – Общий жирнокислотный состав мицелия штаммов

G. lucidum и S. crispa (р<0,05, повторность трех-

кратная)

При оценке полученных данных во всех образцах отмечено преобладание ненасыщенных жирных кислот (моноеновых, диеновых). Помимо тривиальных компонентов, изомеров, во всех образцах обнаружено небольшое количество высококипящих

118

компонентов, по всей видимости, не являющихся высшими жирными кислотами. Представительство непредельных жирных кислот свидетельствует о существовании своеобразного ресурса для образования малонового диальдагида при активизации окислительных процессов в мицелии. Уровень МДА определяли в мицелии изученных видов на этапе адаптации к субстрату, в фазу логарифмического роста культур, а затем на разных сроках хранения мицелия. В опыте установлено неоднозначное содержание МДА, установленное для разных штаммов изученных видов на разных этапах роста (табл. 9).

Таблица 9 – Содержание малонового диальдегида в мицелии штаммов G. lucidum и S. crispa на стадии активного роста и после продолжительного хранения при температуре 4°С (нмоль/г)

Отмечено, что фаза адаптации, в период которой рост мицелия замедлен, уровень МДА находится на довольно высоком

119