Микроскопические признаки сырья: препарат листа с поверхности. Клетки эпидермиса с обеих сторон листа вытянуты по длине листа. Устьица ориентированы по длине листа и окружены 4 клетками. Характерно расположение палисадной и губчатой ткани. Палисадная ткань состоит из длинных вытянутых по ширине листа клеток, лежащих в один слой в плоскости, параллельной поверхности листа («лежачая» палисадная ткань). Губчатая ткань состоит из клеток разнообразной формы, вытянутых по ширине листа и рыхло лежащих параллельно поверхности листа. В клетках, лишенных хлорофилла, содержатся тонкие рафиды и крупных игольчатые стилоиды оксалата кальция.
Реакция Балье на 5-членное лактонное кольцо. Появление оранжевой окраски после прибавления 0,5 мл 10% раствора КОН и 5 капель 3% спиртового раствора пикриновой кислоты к 1 мл извлечения, взятого после настаивания в течение 48 ч 5 г растертых в порошок ландыша листьев в 50 мл этанола и очистки от хлорофилла на колонке с Al2O3, свидетельствует о присутствии в экстракте кардиостероидов.
Возможные нелекарственные примеси: а) Купена лекарственная – Polygonum officinale L. (сем. Liliaceae, лилейные). Стебель слегка изогнутый, неветвящийся. Листья продолговато-эллиптические с дугонервным жилкованием стеблеобъемлющие и сидят на стеблях поочередно, по несколько штук. Цветки по 1-2 в пазухах листьев поникшие зеленовато-белые. Плод – черно-синяя ягода. б) Грушанка круглолистная – Pyrollarotundifolia L. (сем. Pyrolaceае, грушанковые). Невысокое растение, встречающиеся в тех же местах, что и ландыш и имеющие прикорневые округлые листья на черешках и белые, душистые, в пониклой кисти пятимерные цветки.
Задание 2. По макро- и микродиагностическим признакам определить подлинность зверобоя травы.
Лекарственное растение: Hypericum perforatum L. – зверобой продырявленный, H. Maculatum Crantz. (H. quadrangulum L.) – з. пятнистый (з. четырехгранный), сем. Hypericaceae – зверобойные.
Лекарственное сырье: Hyperici herba – зверобоя трава.
Внешние признаки сырья. Стебли H. perforatum – зверобоя продыряв- ленного длиной до 30 см, облиственные, с цветками и частично с бутонами и незрелыми плодами. Стебли ветвистые только в верхней части, цилиндрические, голые, с двумя продольными ребрами, ветви супротивные. Листья супротивные, сидячие, длиной до 3,5 см и шириной 1,4 см, удлиненно-овальные, тупые, цельнокрайние, с многочисленными просвечивающими вместилищами в виде светлых и темных точек. У H. maculatum − з. пятнистого стебель четырехгранный, полый, разветвляющийся снизу и часто полегающий; листья овальные, более крупные. Соцветия − щитковидные метелки. Чашечка сростнолепестная, глубоко 5-раздельная, листочки ее ланцетные или линейные, острые. Венчик раздельно-5-лепестный, в 2 раза длиннее чашечки, лепестки ланцетовидные со слабоволнистым краем, золотисто-желтые с многочисленными темно-бурыми точками. Тычинки многочисленные, сросшиеся нитями в 3 пучка. Пестик один с верхней 3-гнездной завязью и тремя отогнутыми кнаружи столбиками. Плод – 3-гнездная многосемянка. Запах слабый, вкус горько-вяжущий.
Микроскопические признаки сырья: препарат листа с поверхности. Эпидермис верхней и нижней сторон листа состоит из клеток извилистых в очертании с резко выраженным четковидным утолщением.
Устьица только на нижней стороне, окружены 3-4 клетками. В мезофилле по всей листовой пластинке заметны крупные округлые или овальные вместилища двух типов: бесцветные, просвечивающие и окрашенные, с пигментом буроватого или фиолетового цвета и, кроме того, вместилища, вытянутые вдоль жилок, с желтоватым зернистым содержимым.
Качественные реакции: 1) Микровозгонка. На дно сухой стеклянной пробирки поместить ~ 0,5-1 см3 предварительно размолотого на кофемолке сырья (зверобоя травы, крушины коры, ревеня корня или марены красильной корневищ и корней) и осторожно нагреть на спиртовке, держа пробирку почти горизонтально. На появляющийся на стенках пробирки желтый сублимат нанести 1-2 капли спирта и каплю 2% раствора КOH: сублимат в растворе краснеет – реакция на антраценпроизводные. 2) Водный отвар зверобоя травы (1:10) с Fe3+ (2% раствором FeCl3) показывает черно-зеленое окрашивание (дают конденсированные дубильные вещества). 3) К 1 мл отвара зверобоя травы прибавляют 2 мл 2% спиртового раствора AlCl3 и 7 мл 95%-ного спирта: наблюдается зеленовато-желтое окрашивание (реакция на флавоноиды). Следовательно, кроме антраценпроизводных, трава зверобоя содержит конденсированные дубильные вещества и флавоноиды.
Возможные нелекарственные примеси. Зверобой жестковолосый (шершавый) − H. hirsutum L., стебель опушен волосками, чашелистики с железистыми ресничками. Зверобой изящный − H. Elegans Steph. стебельс двумя продольными тонкими ребрами: чашелистики ланцетовидные, по краю тонкозубчатые, с черными точками на концах зубчиков (видны под лупой или под микроскопом бинокулярным стереоскопическим).
Задание 3. По макродиагностическим признакам определить подлинность травы пустырника.
Лекарственное растение: Leonurus quinqelobatusGilib. (L. Villosus Desf.) − пустырник пятилопастный (п. волосистый), L. cardiaca L. − п. сердечный (п. обыкновенный), сем. Lamiaceae – яснотковые.
Лекарственное сырье: Leonuri herba – пустырника трава.
Внешние признаки сырья. ЛРС являются верхушечные части растения, собранные во время цветения (стебли с листьями и цветками). Стебли 4-гранные, неодревесневшие, полые, прямые, неветвистые, в диаметре не более 4 мм, светло-зеленые, сильно опушенные по ребрам. Листья нижней и средней частей растения сидячие, яйцевидные, 3-5-лопастные. Лопасти к верхушке заостренные, у основания клиновидные, край зубчатый. Верхушечные листья на стебле с соцветием, супротивные, цельнокрайние, продолговато-эллиптические. Листья сверху темнее и снизу светлее, густо опушенные. У п. сердечного опушение слабое. В пазухах верхних листьев расположены густые ложные мутовки цветков, образующие колосовидное прерывистое соцветие длиной 35-40 см. Чашечка цветков трубчатоколокольчатая, серовато-зеленая от обилия волосков, доли шиловиднозаостренные; в сырье запоздалого сбора доли чашечки сильно одревесневшие, зубцы колючие. Венчик 2-губый, розовато-фиолетовый; верхняя губа цельнокрайняя, мохнатая, нижняя − 3-лопастная, слабо опушенная.
Запах слабый, горьковатый вкус придают иридоиды.
Возможные нелекарственные примеси. Пустырник татарский – Leonurus tataricus L. Стебли многочисленные, реже одиночные, в верхней части разветвленные; листья голые, в очертании округлые со слабосердцевидным основанием, глубоко разделенные на узкие, в очертании продолговато-ромбические доли, в свою очередь рассеченные на ланцетно-линейные лопасти. Соцветие длинное с мутовками, в нижней части расставленными, венчик розово-фиолетовый. П. сизый − L. Glaucense Вgе. Стеблей несколько, ветвящиеся. Листья в очертании округлые с прямым основанием, почти до основания рассеченные на 5 клиновидных долей, которые в свою очередь перисто-надрезанные на линейные лопасти. Соцветие длинное с расставленными мутовками. Венчик светло-розовый.
Все растение сизоватое от коротких прижатых волосков. П. сибирский − L. sibiricus L. Стебли многочисленные, в верхней части, реже от основания, ветвящиеся, по граням желобчатые. Листья сверху слабошероховатые, снизу по жилкам волосистые, в очертании яйцевидные с клиновидным основанием, рассеченные на 3 узкие продолговато-ромбические доли, в свою очередь рассеченные на линейные 3-раздельные лопасти. Соцветие длинное с расставленными мутовками. Венчик розовый.
Задание 4. По внешним признакам и качественным химическим реакциям определить подлинность цветков бессмертника песчаного.
Лекарственное растение: Helichrysum arenarium (L.) Moench. − бессмертник песчаный (цмин песчаный), сем. Asteraceae – астровые.
Лекарственное сырье: Helichrysi arenarii flores – бессмертника песчанного цветки.
Внешние признаки сырья. ЛРС – щитковидные соцветия, состоящие из 20-35 мелких корзинок, иногда отдельные корзинки. Корзинки шарообразные или слабовытянутые, в диаметре 4-5 мм (до 7 мм), с остатками беловойлочных цветоносов длиной не более 1 см. Обвертка 3-4-рядная состоит из черепитчато-расположенных, лепестковидных, неплотно прижатых, выпукло-вогнутых листочков лимонно-желтого цвета. Листочки обвертки сухие, пленчатые, блестящие, наружные – широколанцетовидные; внутренние – линейные. Все листочки с бурой полоской по середине и пленчатым краем. У корзинок, полностью распустившихся, листочки обвертки с отогнутой верхушкой (сырье запоздалого сбора). Цветоложе плоское или слегка выпуклое, мелко-ямчатое. В корзинке 30-45 трубчатых цветков: все снабжены хохолком. Цветки двух видов: краевые немногочисленные (обычно в числе 5-7) с длинной узкой трубкой, нитевидные, 5-зубчагые, пестичные или обоеполые, лимонно-желтые. В сырье запоздалого сбора эти цветки часто осыпаются. Срединные цветки многочисленные, мелкие, в 2 раза мельче краевых; обоеполые, 5-зубчатые и с 3-4 дополнительными менее выраженными зубцами, желтые или оранжевые. Запах слабый, ароматный; вкус горьковато-пряный.
Качественные реакции на флавоноиды. Накануне в 50 мл колбу вносят 2-3 г цветков бессмертника песчаного, заливают 30 мл спирта и оставляют на сутки в темноте, после чего экстракт фильтруют через вату. 1) В пробирку берут 1мл извлечения, прибавляют 3-4 капли HCl, кусочек стружки Mg и нагревают: появляется красное окрашивание. 2) К 1 мл экстракта в пробирку добавляют 2-3 капли 2% KOH: развивается желто-оранжевое окрашивание. 3) К 1 мл экстракта в пробирку добавляют 2-3 капли 2% спиртового раствора AlCl3: экстракт окрашивается в желто-зеленый цвет, в УФ-лучах флуоресцирующий. Окраска и флуоресценция усиливается в парах аммиака.
Возможная нелекарственная примесь. Кошачья лапка двудомная – Antennaria dioica (L.) Gaertn. (сем. Aseraceae отличается бессмертника песчаного по цветкам: ее корзинки крупные, собраны в более рыхлые сложные соцветия с белыми, фиолетовыми и розовыми цветками.
Материал:
А. ЛР и ЛРС, содержащее дубильные вещества – гербарий и образцы ЛРС: 1) бадана корневища; 2) дуба кора (сухая и размоченная в смеси вода − глицерин − спирт 1:1:1, а также водный отвар коры); 3) зверобоя трава (сухая и просветленная кипячением в растворе щелочи, а также водный отвар травы); 4) змеевика корневища; 5) кровохлебки корни; 6) лапчатки корневища; 7) ольхи соплодия, о. черной и о. серой листья; 8) черемухи плоды; 9) черники плоды (сухие и их водный отвар).
Б. ЛР и ЛРС, содержащее алкалоиды – гербарий и образцы ЛРС: 10) барбариса обыкновенного корни и листья; 11) барвинка малого трава; 12) белладонны (красавки) листья; 13) белены черной листья; 14) дурмана листья (сухие, а также просветленные в щелочи; подкисленный водный экстракт из листьев); 15) кубышки желтой корневища; 16) маклейи трава; 17) перца стручкового плоды; 18) чистотела трава (сухая, а также просветленная в щелочи; подкисленый водный экстракт из травы); 19) спорыньи склероции.
В. ЛР и ЛРС, содержащее различные БАВ – гербарий и образцы
ЛРС: 20) бегонии листья; 21) гинкго листья; 22) каланхоэ побеги свежие; 23) лабазника шестилепестного корневища и корни; 24) первоцвета корни; 25) репешка трава; 26) сабельника болотного корневища с корнями; 27) фасоли створки.
Г. Гербарий ЛР и образцы ЛРС, содержащих дубильные вещества, алкалоиды, различные БАВ, не произрастающих в Беларуси, а также возможных нелекарственных примесей.
Оборудование и реактивы: лупа, микроскоп, чашка Петри, игла, пипетка, лезвия, предметные и покровные стекла, бумажные фильтры, колба, воронка, пробирки, спички, спиртовка, спирт, аммиак, вода, Mg (стружка), растворы водные: 10% танина, 5% желатина; 2 М HCl, 2% FeCl3, 2% КOH, и 2% спиртовые: флороглюцина, пикриновой кислоты, реактивы Драгендорфа (KJ∙BiJ3) и Бушарда (KJ∙J2).
Задание 1. По макро- и микродиагностическим признакам определить подлинность коры дуба.
Лекарственное растение: Quercus robur L. (Q. pedunculataEhrh.) − дуб обыкновенный (д. черешчатый), Q. petraeaLibl. − дуб скальный, сем. Fagaceae – буковые.
Лекарственное сырье: Cortices quercus – кора дуба.
Внешние признаки сырья. Кора в виде желобоватых кусков разной длины, толщиной 2-3 мм. Наружная поверхность блестящая или матовая, гладкая или слегка морщинистая с поперечно-вытянутыми чечевичками. Цвет коры снаружи серо-бурый или серебристый. Внутренняя поверхность ее светло-бурая, продольно-ребристая, некоторые ребра сильно выдаются, они соответствуют многорядным сердцевинным лучам.
Излом коры снаружи ровный или зернистый, внутри занозистый, сильно волокнистый. Сухая кора без запаха, у размоченной в воде появляется своеобразный запах, вкус вяжущий, горьковатый.
Микроскопические признаки сырья: поперечный срез коры. На нем видна бурая многорядная пробка, несколько рядов колленхимы, далее расположен механический пояс, который включает группу волокон, чередующихся с группами каменистых клеток. В коре молодых ветвей (толщиной до 2 мм) механический пояс местами прерывается паренхимой. В коре толщиной 3-4 мм механический пояс обычно сплошной. В старой коре (со следами корки) механического пояса нет: при образовании вторичных слоев пробки и развитии корки он попадает в зону отмерших тканей. Вторичная кора богата механическими элементами.
Группы лубяных волокон тянутся концентрическими поясами, которые прерываются узкими 1-2-рядными (редко более широкими) сердцевинными лучами. Группы волокон имеют кристаллоносную обкладку. Каменистые клетки здесь расположены обычно крупными скоплениями. В старой коре каменистых клеток больше, они разрастаются в лучах сердцевинной паренхимы, образуя плотные ребра, резко выдающиеся на внутренней поверхности коры. Качество коры снижается. Паренхима коры содержит друзы оксалата кальция, бурые включения – флобафены (продукты конденсации таннинов), которых очень много в лежалой коре.
Порошок коры дуба характеризуется наличием многочисленных обрывков волокон с кристаллоносной обкладкой, каменистых клеток и друз оксалата кальция.
Качественные реакции: отвар коры дуба (1:10) дает с 2% раствором FeCl3 черно-синее окрашивание (гидролизуемые дубильные вещества).
Возможная нелекарственная примесь: кора ясеня – Fraxinusex celsior L., сем. Oleaceae, маслинные; наружная поверхность ее – серая, матовая; внутренняя – светлая, гладкая. Под микроскопом виден механический пояс, в котором преобладают группы волокон; во внутренней коре механических элементов меньше, волокна без кристаллоносной обкладки.
Задание 2. По внешним признакам и качественным химическим реакциям определить подлинность черники плодов.
Лекарственное растение: Vaccinium myrtillus L. − черника, сем. Vacciniaceae – брусничные.
Лекарственное сырье: Myrtillifructus – черники плоды.
Внешние признаки сырья. Плод − многосемянная ягода, высушенная сморщенная, после размачивания − шарообразная, с приплюснутой верхушкой, до 0.5 см в диаметре. Верхушка ягоды увенчана остатком чашечки в виде ровного, кольцеобразного валика. Поверхность ягоды матовая или слегка блестящая, черная с бурым оттенком, мякоть краснофиолетовая. Семена многочисленные, мелкие, яйцевидные, светлобурые. Запах сырья слабый; вкус приятный, сладковато-кислый, слабовяжущий; при жевании слюна окрашивается в темно-красный цвет, а слизистая оболочка полости рта и зубы в сине-фиолетовый.
Возможные нелекарственные примеси. Бузина черная – Sambucus nigra L. и б. травянистая − S. ebulus L. Плоды мелкие (до 6 мм в диаметре), шарообразные костянки блестящие, черно-фиолетовые. В темнокрасной мякоти от 2 до 4 продолговатых бурых семян. Жостер слабительный – Rhamnus cathartica L. Плоды шаробразные, почти черные, блестящие, диаметром 6-8 мм, с сохранившейся плодоножкой. В бурой мякоти – 3 (реже 2-4) хрящеватые косточки трехгранной формы темно-бурого цвета.
Шишко-ягоды гладкие, блестящие или матовые, фиолетовые или чернобурые, иногда с сизым восковым налетом, в поперечнике около 6-9 мм.
На верхушке шишко-ягоды имеется 3-лучевой шов (бороздки): мякоть светло-зеленая, с 1-3 семенами 3-гранной формы. Запах своеобразный ароматный, вкус сладковатый, пряный. Смородина черная – Ribes пigrum L. Ягоды шарообразные (после размачивания), до 8 мм в диаметре, с пленчатым конусовидным остатком околоцветника на верхушке: семена многочисленные, более крупные. Поверхность плода усажена желтыми железками, видимыми в лупу. Черемуха обыкновенная – Padus racemosa Gilib.
Плоды − шарообразные или продолговатые костянки черного или серовато-черного цвета с белым налетом от выделившегося сахара, с одной крупной твердой косточкой. Костянки до 8 мм в диаметре, морщинистые, с округлым белым рубцом на месте отпадания плодоножки. Вкус плодов сладковато-вяжущий.
Качественные реакции. Водный отвар плодов черники (1:10) темно-фиолетового цвета. 1) При добавлении к 5 мл отвара черники 2-3 капель 2% раствора КОН появляется зеленовато-желтое окрашивание (флавоноиды). 2) При добавлении к водному отвару плодов черники 2-3 капель 1% раствора FeCl3 образуется черно-зеленое окрашивание (дают конденсированные дубильные вещества).
Задание 3. По макро- и микродиагностическим признакам определить подлинность дурмана листьев.
Лекарственное растение: Datura stramonium L. – дурман обыкновенный, D. tatula L. – д. фиолетовый, сем. Solanaceae – пасленовые.
Лекарственное сырье: Stramoniifolia – дурмана листья.
Внешние признаки сырья. Листья крупные, до 25 см длиной и до 10-20 см шириной на длинных, в сечении округлых черешках. Листовая пластинка в очертании широкояйцевидная с заостренной верхушкой и клиновидным основанием, неравномерно глубоко выемчато-лопастная.
Жилки (средняя и наиболее крупные боковые) выступают с нижней стороны листа, по жилкам с нижней стороны выражено опушение (хорошо видное под лупой). Цвет листа с верхней стороны темно-зеленый, с нижней – светлее. В сухом сырье листовые пластинки скручены, смяты и частично изломаны; часто встречаются обломки главной жилки с сохранившимися на ней боковыми жилками первого порядка и фрагментами пластинки. Это дает возможность для микроскопической диагностики сырья. Запах слабый, «дурманящий», усиливающийся при размачивании. (Сырье ядовито, вкус его пробовать не рекомендуется !).