Клостридии. Колонии клостридий, развивающиеся в глубине среды Виль-
сона-Блера, шаровидной или чечевицеобразной формы черного цвета. Морфо-
логия: грамположительные палочки со слегка закругленными концами, иногда с центрально или субтерминально расположенной спорой.
Дрожжеподобные грибы рода Candida. На среде Сабуро образуют вы-
пуклые, сметанообразные, блестящие, белого или кремового цвета. Морфоло-
гия: круглые или овальные почкующиеся клетки с нитями мицелия.
Подсчет микроорганизмов в 1 г фекалий.
Необходимо учитывать количество выросших колоний, степень разведения исследуемого материала и величину посевной дозы. Количественную оценку производят по формуле:
M= N x 10n+1,
где: М – количество микроорганизмов в 1 г фекалий;
N – количество выросших колоний; n – степень разведения фекалий.
21
Пример подсчета: на среде Эндо при посеве 0,1 мл из разведения фекалий
10-5 выросло 20 колоний эшерихий. По формуле определяют количество E.coli в 1 г фекалий: М=20 х 10(5+1) = 20 х 106 = 2,0 х 107 КОЕ/1 г.
Cравнение полученных результатов с нормативными показателями.
Выдача заключения на специальном бланке об изменениях в составе фе-
кальной микрофлоры и степени дисбактериоза.
№ анализа______
Ф.И.О.________________________________ Возраст _____________________
Дата поступления материала__________________________________________
При микробиологическом исследовании фекалий выделены:
Микроорганизмы |
Норма |
Результат |
|
(взрослые, КОЕ/г) |
(КОЕ/г) |
||
|
|||
Бифидобактерии |
109-1010 |
|
|
Лактобактерии |
107-108 |
|
|
Бактероиды |
109-1010 |
|
|
Фузобактерии |
108-109 |
|
|
Эубактерии |
109-1010 |
|
|
Пептострептококки |
109-1010 |
|
|
Клостридии |
≤105 |
|
|
E.coli типичные |
107-108 |
|
|
E.coli лактозонегативные |
<105 |
|
|
E.coli гемолитические |
0 |
|
|
Другие энтеробактерии* |
<104 |
|
|
Неферментирующие бактерии** |
≤104 |
|
|
Энтерококки |
105-108 |
|
|
Стафилококки коагулазонегативные |
≤104 |
|
|
Стафилококки золотистые |
0 |
|
|
|
|
|
|
Грибы рода Candida |
≤104 |
|
Примечание: * – представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.; ** – Pseudomonas, Acinetobacter и др.
Дата выдачи результата _____________.
22
Занятие № 22 Тема: Микробиологическая характеристика сальмонеллезов (брюшного тифа,
паратифов, госпитальных сальмонеллезов), шигеллезов, кампилобактериозов и хеликобактериозов.
Цель занятия. Изучить характеристику сальмонелл, шигелл, кампилобактерий,
хеликобактерий и микробиологическую диагностику вызываемых ими заболе-
ваний.
I.Теоретические знания:
1.Характеристика возбудителей брюшного тифа и паратифов. Патогенез брюшного тифа. Микробиологическая диагностика.
2.Внутрибольничные (госпитальные) сальмонеллезы.
3.Возбудители дизентерии, их свойства. Микробиологическая диагностика бактериальной дизентерии.
4.Характеристика кампилобактерий и хеликобактерий, вызываемые заболева-
ния. Микробиологическая диагностика кампилобактериозов и хеликобакте-
риозов.
II.Практические навыки:
1.Изучение схемы бактериологического исследования крови больного с клини-
ческим диагнозом «брюшной тиф». Учет и интерпретация результатов.
2.Серологическая диагностика брюшнотифозного бактерионосительства (по демонстрации).
3.Изучение схемы бактериологического исследования фекалий больного с клиническим диагнозом «дизентерия». Учет и интерпретация результатов.
1
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ
1. Характеристика возбудителей брюшного тифа и паратифов. Патогенез
брюшного тифа. Микробиологическая диагностика.
Возбудителей брюшного тифа относят к роду Salmonella, который включа-
ет более 2500 серотипов. Современная классификация сальмонелл основана на строении их ДНК и включает только 2 вида, из которых патогенным для чело-
века является вид Salmonella enterica с 6 подвидами и множеством серотипов в каждом. Это связано с изменчивостью генов, кодирующих синтез белков (фла-
геллинов) жгутиков. По современной номенклатуре возбудителя брюшного ти-
фа, как и возбудителей паратифов, относят к подвиду еntericа и обозначают как
S.еntericа еntericа, серотип typhi. Однако, во избежание путаницы, используют следующие названия возбудителей, соответственно их серотипу:
-возбудитель брюшного тифа – S.typhi;
-возбудитель паратифа А – S.paratyphi A;
-возбудитель паратифа В – S.paratyphi B;
-возбудитель паратифа С – S.paratyphi C.
Морфология: грамотрицательные палочки средних размеров, перитрихи,
спор и капсул не образуют.
Чистая культура S.typhi в окраске по Граму.
2
Культуральные свойства: растут на простых питательных средах: МПА
(S-колонии), МПБ, 20% желчном бульоне (диффузно-мутящий рост). На диф-
ференциально-диагностических средах Плоскирева и Эндо все виды сальмо-
нелл образуют бесцветные или цвета среды колонии, т.к. не ферментируют лак-
тозу, на висмут-сульфитном агаре возбудители брюшного тифа растут в виде черных колоний с металлическим блеском и почернением подлежащей среды.
Рост S.typhi на висмут-сульфитном агаре.
Биохимические свойства: сальмонеллы биохимически менее активны,
чем эшерихии. S.typhi ферментирует углеводы до кислоты, S.рaratyphi А и В до кислоты и газа. Изучение биохимических свойств сальмонелл проводят с по-
мощью энтеротест-систем.
Антигенная структура сальмонелл:
О – соматический антиген;
Н – жгутиковый антиген;
К – оболочечные антигены.
В системе оболочечных антигенов у S.typhi присутствует Vi-антиген (у ви-
рулентных штаммов), являющийся рецептором для Vi-бактериофагов.
На основании определения основных антигенов сальмонелл Ф. Кауфман и П. Уайт построили их классификацию (табл.1). Согласно этой классификации сальмонеллы делят на серогруппы (по наличию общих О-антигенов), которые обозначают буквами латинского алфавита: A, B, C и т.д.
3