Материал: микра итог 5 (29)

Таксономия.

Однако в большинстве учебных пособий и справочников для удобства испол исторически сложившаяся таксономия, рассматривающая серовары, как виды (напр, S. typhi, вместо S. enterica подвид enterica серовар Typhi)

Морфология и тинкториальные свойства. Мелкие грам- палочки с закругленными концами размером 0,7-1,5×2-5 мкм, в мазках располагаются беспорядочно, подвижны (перетрихи), имеют пили I и II типов, S. typhi – микрокапсулу, спор не образуют.

Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, хемоорганогетеротрофы. Не требовательны к условиям культивирования: оптимальная Т роста 37⁰С, значение рН 6,8-7,2, длительность культивирования – 24-48 часа. Хорошо растут на простых пит средах (МПБ, МПА). В МПБ наблюдается рост в виде диффузного помутнения с последующим образованием осадка. На МПА образуют колонии в S- (средних размеров, гладкие, блестящие, полупрозрачные с голубоватым оттенком) и R-форме, S. paratyphi В и S. enteritidis по краю колоний формируют слизистый валик. В качестве накопительных сред испол желчный и селенитовый бульон. На дифференциально- диагностических средах Эндо, Левина и Плоскирева образуют бесцветные колонии (не ферментируют лактозу). На висмут-сульфитном агаре – колонии черного цвета с металлическим блеском, окруженные черным ободком прокрашенной среды.

Биохимические свойства. Сальмонеллы обладают выраженной ферментативной активностью. Оксидазо- и каталазо+. Р-ция Фогеса-Проскауэра -. Сахаролитическая активность: не расщепляют лактозу и сахарозу; глюкозу, маннит, мальтозу и др сахара разлагают до к-ты и газа (искл, S. typhi – до кислоты), по способности разлагать ксилозу и арабинозу различают 4 типа: К+А+; К-А-; К+А-; К-А+. Протеолитические св-ва: не образуют индол, желатин не разжижают, образуют H₂S (искл, S. paratyphi A).

Антигенная структура. сальмонелл – сложная, имеются О-, Н-, Vi-, М-антигены.

О – соматический антиген, липополисахарид клет стенки, термостабильный, (выдерживает кипячение в течение 2,5 часов, автоклавирование при 120⁰ С – 30 мин.), чувствительны к формальдегиду, но устойчив к спирту, групповой – согласно классификации Кауфмана-Уайта, сем делится на 67 серогрупп (А, В, С, Д…). О-АГ состоит из R-ядра и боковой S-цепи, к кот присоединяются сахара – рецепторы (обозначаются цифрами). Общность конечного сахара (по хим природе явл 3,6-дидезоксигексозой) явл основанием для объединения в серогруппу. Некот гр имеют общие О-АГ, но каждая гр содержит 1 основ антиген: в гр А – 2, в гр В – 4, в гр С – 7, Д – 9…

Н – жгутиковый антиген, белок флагеллин, термолабильный (разрушается при нагревании до 75-100⁰С, а также под действием соляной к-ты, спирта, протеолитических ферментов), типовой (более 2500 сероваров, расположены в алфавитном порядке в таблице Кауфмана-Уайта). У Н-АГ сальмонелл различают 2 фазы: I (специфическая) – различна у серотипов, входящих в 1 гр, обозначается строчными латинскими буквами; II (неспецифическая) – содержат в своем составе общие для всей гр компоненты, обозначается арабскими цифрами. Если у серовара присутствуют обе фазы Н-АГ, то его называют двухфазным, если 1 – монофазным.

Vi-АГ – поверхностный полисахаридный антиген S. typhi, являющийся разновидностью К-АГ, термолабильный (разрушается при кипячении за 10 минут), чувствительный к соляной кислоте и спирту, встречается только у вирулентных сальмонелл, препятствует агглютинации О-антисыворотками, явл рецептором для бактериофагов.

М-АГ – слизистый, водонерастворимый, разрушается под действием кислот и спиртов.

Факторы патогенности. Токсины: эндотоксин – липополисахарид клет стенки, высвобождается при массовой гибели возбудителей, играет основную роль в патогенезе брюш тифа, оказывая пирогенное и токсическое действие;

возбуд сальмонеллезов выделят экзотоксины – термолабильный белковый энтеротоксин, сходный с холерогеном и LT-токсином E. coli (увеличивают в кл эпителия тонкого кишечника содержание цАМФ, что приводит к повышенному выходу воды из кл и развитию диареи) + цитотоксическое действие, вызывая гибель энтероцитов.

Ферменты патогенности: гиалуронидаза, фибринолизин, лецитиназа, муциназа, протеаза, супероксиддисмутаза (инактивирует суперактивные радикалы О₂, что придает устойчивость к фагоцитозу).

Структурные и хим компоненты кл: пили I и II типов;

микрокапсула у S. typhi;

белки наружной мембраны – инвазины (обеспечивающие инвазию слизистой и резистентность к фагоцитозу, позволяющую сальмонеллам сохраняться и размножаться внутри фагоцитов);

«островки патогенности».

Резистентность у сальмонелл – достаточно высокая. Выдерживают рН в диапозоне 4-9, в водоемах, сточных водах, почве сохраняют жизнеспособность до 3 месяца, в комнатной пыли – от 80 до 550 дней. Хорошо переносят низкие Т: во льду сохраняются более 60 дней, в замороженном мясе – 6-13 мес (в толще мяса могут сохр и после тепловой обработки), размножается в мясном фарше при +5⁰С, в яйцах – до 13 мес (при хранении яиц в холодильнике могут проникать через неповрежденную скорлупу и размножаться в желтке), в колбасе – 2-4 мес, в хлебе – до 3-х мес, на овощах и фруктах – 5-10 дней. Хуже выдерживают высокую Т: при 56⁰ С выдерживают 40-60 мин, при 70⁰ С погибают через 10 мин, при 100⁰ С – моментально. Чувствительны к дезрастворам в рабочей концентрации (5% фенол, 3% хлорамин, 3% лизол вызывают гибель бактерий через 2-3 минуты) и антибиотикам.

Роль в патологии. Брюш тиф (название болезни дал Гиппократ, происходит от греч. typos – туман, спутанное сознание) – острое антропонозное инфекционное заб, характер поражением лимфоидного аппарата тонкого кишечника, бактериемией, выраженной лихорадкой, интоксикацией и розеолезной сыпью. Паратифы А и В сходны по характеру и клинич проявлениям с брюшным тифом, но протекают более легко.

Сальмонеллезы – гр полиэтиологичных острых зооантропонозных кишеч инфекций, протекающих по типу гастроэнтеритов у взрослых и токсико-септических инфекций у детей.

Эпидемиология. Источник инфекции: больные и бактерионосители. Механизм передачи: фекально-оральный (пути: пищевой, водный, контактно-бытовой). Брюшной тиф и паратиф А распр чаще водным путем (употребление воды из неглубоких загрязненных водоемов, технических водопроводов, в случаях прорыва канализационных вод). При паратифе В преобладает пищ путь (заражение чаще происходит через молоко, молоч продукты, кремы, овощные салаты). Бытовой путь реализуется, как правило, через бактерионосителей.

Патогенез и клинические особенности брюшного тифа и паратифов А и В.

1.Стадия внедрения возбуд: сальмонеллы попадают в организм через рот и преодолев барьеры неспецифической защиты организма, проникают в тонкий кишечник, где происходит их адгезия к энтероцитам за счет пилей I типа.

2.Стадия поражения лимфоидной тк: поражают пейеровы бляшки тонкого кишечника, в лимфатических фолликулах тонкой кишки сальмонеллы фагоцитируются макрофагами, с кот проникают сначала в лимфоузлы, затем через грудной проток и в кровь.

3.Бактериемия (конец инкубационного периода): с током крови макрофаги вместе с поглощенными сальмонеллами циркулируют по организму (микроорганизмы могут даже в них размножаться).

4.Интоксикация: под воздействием бактерицидных ф-ров крови сальмонеллы погибают и при этом высвобождается эндотоксин, обусловливая лихорадку и сильнейшую интоксикацию, кот сохраняется на протяжение всего заб. (соответствует периоду выраженных клинич проявл заб, Т тела достигает 39-40⁰С и держится от 4 до 8 нед).

5. Стадия паренхиматозной диффузии: макрофаги с сальмонеллами циркулируют по организму и после гибели фагоцитов микробы могут попасть в различные органы: костный мозг, селезенку, печень, желчный пузырь, кожа и т.д. (воспаление, образование гранулем).

6. Выделительно-аллергическая стадия: вместе с желчью возбуд снова попадают в тонкий кишечник, при повторном контакте с сенсибилизированной лимфоидной тк развивается гиперчувствительность немедленного типа (феномен Артюса), что приводит к некрозу пейеровых бляшек и образованию язв (кишечные кровотечения, прободение кишечника). По мере накопления антител организм постепенно освобождается от возбуд – они выделяются со слюной, потом, испражнениями, желчью и мочой.

7.Реконвалесценция.

Инкубационный период – 10-14 дней. Клиника брюш тифа, паратифов А и В характеризуется циклическим течением и проявл лихорадкой (повышение Т тела до 39-40⁰С), интоксикацией, появлением розеолезной сыпи, гепатолиенальным синдромом, нарушениями со стороны нервной (бред, галлюцинации) и сердечно-сосудистой (падение АД, коллапс) систем. Выздоровление не всегда совпадает с освобождением организма от возбудителей, этот процесс затягивается; 5 % переболевших становятся бактерионосителями.

Патогенез и клинические особенности сальмонеллезов. Возбуд попадают в организм чела с обсемененными пищ продуктами. В желудке происходит частичная гибель сальмонелл. Воротами инфекции явл кл слиз тонкого кишечника. Здесь сальмонеллы внедряются между ворсинками, колонизируют и повреждают их. Это вызывает умеренное воспал слиз оболочки. Эндотоксин, выделяющийся при разрушении сальмонелл, обуславливает интоксикацию. Вырабатываемый сальмонеллами экзотоксин (энтеротоксин) вызывает диарею и рвоту, нарушение водно-солевого обмена и обезвоживание организма. Он обладает также цитотоксическим действием, вызывая гибель энтероцитов. Сальмонеллы проникают в подлежащие тк слиз оболочки, транспортируются через нее в макрофаги и могут поступать в лимфу и кровь, вызывая бактериемию и генерализацию инфекционного процесса.

Короткий инкубационный период – 12-24 часа. Начало заб – острое: озноб, повыш Т до 39⁰С, интоксикация (головная боль, слабость, тошнота), боли в животе, диспептические расстройства (рвота, понос), признаки обезвоживания организма, падение АД. Заб протекает обычно в течение 3-5 дней и заканчивается выздоровлением. При генерализованных формах сальмонеллез протекает более тяжело и длительно. Как субклиническую форму сальмонеллеза рассматривают бактерионосительство (острое – до 3 месяцев, хроническое – более 3 месяцев).

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при брюшном тифе и паратифах – гуморальный, напряженный, длительный (не менее 15-20 лет, часто пожизненный). Образуются антитела к О-, Н-, Vi-антигенам:

1Ыми к концу 1-й нед заб появл антитела к о-аг, достигая максимума к периоду разгара (14-15 дней), а затем исчезают.

Антитела к Н-АГ появляются к концу 2-й нед, достигая максимума в период реконвалесценции и длительно сохраняясь в организме после перенесенного заболевания.

Антитела к Vi-АГ обнаруживаются у бактерионосителей брюшного тифа. Постинфекционный иммунитет при сальмонеллезах – гуморальный и клеточный, типоспецифический, ненапряженный и недлительный, опосредован SIgA.

Микробиологическая диагностика. Исслед материал: выбор материала для исслед при брюш тифе и паратифах определяется стадией заб (инкубационный период – испражнения, продромальный период, 1-я неделя заб – кровь на посев, разгар заб и период реконвалесценции, с конца 2- ой нед – моча, испражнения, желчь, соскоб из розеол, костный мозг, кровь на серодиагностику), при сальмонеллезах – испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты, кровь.

Бактериоскопический метод.

Бактериологичекий метод (основной).

Серологический метод:

Реакция Видаля (развернутая РА с О- и Н-антигенами);

РНГА с эритроцитарными О-, Н-, Vi-диагностикумами;

ИФА;

РИФ.

Молекулярно-биологический метод (ПЦР, ДНК-зонды).

Аллергологический метод (кожно-аллергическая проба с эбертином).

Специфическая профилактика проводится по эпидпоказаниям: Вакцина ТАБТе – химическая сорбированная вакцина (содержит полные антигены брюшнотифозные, паратифозные А и В, столбнячный анатоксин);

• Брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi- антигеном;

• Брюшнотифозный бактериофаг.

Неспецифическая профилактика: ранняя диагностика и изоляция больных, дезинфекция в очаге инфекции, выявление бактерионосителей, соблюдение санитарного режима в детских учреждениях, предприятиях питания, санитарно-бактериологический контроль за работой систем централизованного и нецентрализованного водоснабжения.

Лечение: ХТП и антибиотики; при сальмонеллезах применяется, в основном, патогенетическая терапия, направленная на нормализацию ВЭБ (антибиотики назначают только при генерализованных формах); спецефическое лечение – брюшнотифозные и сальмонеллезные бактериофаги.

3. Возбуд бактер дизентерии (шигеллёза): таксономия, морфология и тинкториальные св-ва, факторы вирулентности, устойчивость к действию физ и хим факторов, способы заражения и клинические проявления болезни у чела, иммунитет, методы лаб диагностики, препараты терапии и профилактики.

Семейство: Enterobacteriaceae Род: Shigella Вид: S. dysenteriae (12 сероваров); S.flexneri (9 сероваров); S. Boydii (18 сероваров); S. sonnei (1 серовар)

Форма: мелкие неподвижные палочки правильной формы с закругленными концами, располагающиеся одиночно

Спор не образуют, Капсулы нет, Жгутиков нет, Окраска по Граму –, есть пили общего типа.

Морфолог и тинктор св-ва. Шигеллы — мелкие (дл 2—3 и шир 0,5—0,7 мкм) грам- палочки с закругленными концами. В мазке из чистой культуры располаг беспорядочно. Они не образуют спор, не имеют жгутиков. У многих штаммов обнаруживают пили, некот шигеллы обладают микрокапсулой.

Токсинообр. Экзотоксин, обладающий нейротропным действием, продуцируют S. dysenteriae, и этот вид вызывает заб в наиболее тяжелой форме. Все шигеллы содержат термостабильный эндотоксин, защищающий бактерии в желчи от гибели. S. dysenteriae серовара 1 продуцирует шигатоксин

Ф-ры патоген. Инвазируют слиз оболочку толстой кишки с последующим межклет распростран. Эта способность связана с функционированием крупной плазмиды инвазии, кот детерминирует синтез белков-инвазинов. Эти белки чувствительны к трипсину, поэтому процесс инвазии начинается именно в толстой кишке. Межклет распростран связано с «белком распространения», кот вызывает лизис мембран эукариотической кл. Также шигеллы продуцируют белковый цитотоксин, кот поражает эндотелий, следствием чего явл появление в кале крови.

Антигены. Шигеллы содержат О-антигены, Shigella sonnei имеют К-антиген. Среди О-антигенов есть специфич. и групповые.

Ист инф – больной чел, носитель. Пути передачи: Дизентерия – инфекция с фекально-оральным механ передачи возбуд, реализация кот осущ пищевым, водным и контактно бытовым путями. Ф-рами передачи шигелл явл пищ продукты, вода, руки и предметы обихода, почва. Локализация поражений: ЖКТ и толстый кишечник. Клинич проявл болезни: Тяжелое течение дизентерии характе. очень быстрым развитием заб, резко выраженной интоксикацией, глубокими нарушениями деят серд-сосуд сис-мы. Болезнь начинается крайне быстро. Т тела с ознобом быстро повышается до 40°С и выше, больные жалуются на сильную голов. боль, резкую общую слабость, повыш зябкость, особенно в конечностях, головокружение при вставании с постели, полное отсут аппетита. Нередко появл тошнота, рвота, икота. Больных беспокоят боли в животе, сопровождающиеся частыми позывами на дефекацию и мочеиспускание. Стул более 20 раз в сутки, нередко число дефекаций трудно сосчитать («стул без счета»). Период разгара болезни продолжается 5–10 дней. Выздоровление происходит медленно, до 3–4 нед, полная нормализация слиз оболочки кишечника происходит через 2 мес и более.

Тяжелое течение дизентерии отмечается главным образом у детей и стариков.

Диагноз хронич дизентерии уст в случае, если заб продолжается более 3 месяцев.

Перенесенное заб не оставляет после себя надежного и длит иммунитета. Больных дизентерией обычно помещают в леч учреждение для обеспечения им надлежащего ухода и лечения. В искл случаях при наличии соответст условий (отдельная квартира, наличие ухаживающего персонала) по решению лечащего врача и эпидемиолога больной м б оставлен на дому. Среди осложнений болезни наиболее частыми явл: инфекционно-токсический шок, инфекционно-токсическое поражение н с, перитонит, пневмония.

Профилакт дизентерии основывается на проведении широких санитарных мероприятий, направл па благоустройство населенных мест, усиление санитарного надзора за пищ объектами, водопроводами. Эти меры должны сопровождаться санитарно-просветительной работой по повышению ур гигиен навыков населения, т. к. соблюдение элементарных правил личной гигиены (мытье рук перед едой и после уборной, употребл мытых фруктов и овощей и доброкачественной воды и молока) надежно предохраняет от заражения дизентерией.

Материалом для бактериоло-гического исслед явл испражнения. Пробу следует брать до начала антибактериал. терапии, лучше всего с помощью ректальных трубок, посев производить сразу же или помещать пробу в консервирующую жидкость (30% глицерина и 70% буфер. р-ра) не более чем на 1 день. Для посева отбирать комочки слизи. Кол-во шигелл в пробе м б очень скудным, поэтому посев производится на элективную среду Плоскирева или на среду обогащения - селенитовую. Выделенную чистую культуру идентифицируют по морфол., биохим св-вам и в реакции аглютинации с адсорбированными видовыми сыворотками. Опред чувствительность к а/б. Шигеллы относятся к числу бактерий, быстро приобретающих устойчивость к а/б, в большинстве случаев связанную с R-плазмидами.

С целью диаг испол серологические реакции: агглютинации, РНГА. Антитела появляются на 2ой-3ей нед заб.

Лаб подтверждение дизентерии проводится бактериологическим и серологическим методами исслед.

Бактериолог метод (высев шигелл из испражнений) при 3-кратном исслед обеспечивает подтверждение диагноза у 40–60 % пац. Материалом для бактериолог исслед явл испражнения. Пробу следует брать до начала антибактериал терапии, лучше всего с помощью ректальных трубок, посев производить сразу же или помещать пробу в консервирующую жидкость (30% глицерина и 70% буфер р-ра) не более чем на 1 день. Для посева отбирать комочки слизи. Кол-во шигелл в пробе м б очень скудным, поэтому посев производится на элективную среду Плоскирева или на среду обогащения - селенитовую. Выделенную чистую культуру идентифицируют по морфолог., биохим св-вам и в р-ции аглютинации с адсорбированными видовыми сыворотками. Определяют чувствительность к а/б. Антитела появляются на 2ой-3ей нед заб. Для выявления антител к шигеллам испол р-цию непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА). Р-цию проводят методом парных сывороток. Диагностически достоверным показателем, подтверждающим заб, явл увелич титра антител не менее чем в 8 раз. Уст этиологического диагноза острой дизентерии только на основании 4-кратного нарастания титра антител или исслед сыворотки, взятой однократно не ранее 5–6-го дня болезни, может приводить к диагностич ошибкам. Оценивают результаты РНГА в т с с учетом эпидемической обстановки, формы и сроков болезни, при этом титр однократно взятых сывороток д б не менее 1 : 400. В виду недостаточной чувствит и специфичности нецелесообразно испол для серодиагностики дизентерии реакцию агглютинации.

Препаратами выбора для леч всех пац с дизентерией явл кишечные фторхинолоны: офлоксацин по 0,2 г 2 раза в сутки или ципрофлоксацин по 0,25 г 2 р в сутки. К альтернативным препар., кот испол в клинич практике, относятся пивмециллинам и цефтриаксон (сохр эффективн против многих штаммов шигелл и могут назначаться всем возрастным гр пац), а также азитромицин, испол для лечения шигеллеза только у взрослых.

История открытия. Начало изучения шигеллёзов положили Видаль и Шантермесс в 1888 г., доказав роль бактерий в этиологии дизентерии. В 1891 г. Григорьев выделил S. dysenteriae в чистом виде, а его детальное изучение провели Киоши Шига в 1898 г. и Крузе в 1900 г. Позднее рядом авторов были выделены и изучены новые виды шигелл: в 1900 г. Флекснер, в 1915 г. Зоне, в 1932 г. Бойд и др. Род Shigella выделили Кастеллани и Чалмерс в 1919 г. и назвали его в честь японского исследователя Шига, описавшего его типовой вид.