1. Санитарная микробиология. Предмет. Цели и задачи. Особенности исследования. 2
2. Санитарно-показательные микроорганизмы. Определение. Требования. Классификация. Критерии санитарно-микробиологической оценки объектов внешней среды. 4
3. Санитарно-показательные микроорганизмы группы А и B. Характеристика. 6
4. Принципы санитарно-микробиологического контроля питьевой воды. Требования к питьевой воде. Микрофлора воды. Микробное число воды. 11
5. Микрофлора воздуха. Ее эпидемиологическое значение. Методы санитарно-микробиологической оценки (микробное число воздуха) 14
6. Санитарно-бактериологическое исследование перевязочного и шовного материала. Его значение. 15
2022
Ответ.
Санитарная микробиология – отрасль медицины профилактического направления, наука, занимающаяся разработкой методов контроля над объектами внешней среды и населения, наука, изучающая микрофлору окружающей среды и ее влияние на здоровье человека и экологическую ситуацию в различных биотопах.
ВСПОМИНАЕМ ГИГИЕНУ!!!
Цель практической санитарной микробиологии – раннее обнаружение патогенной микрофлоры во внешней среде.
При этом следует помнить, что человек и теплокровные животные являются основным резервуаром возбудителей большинства инфекционных заболеваний и подавляющее число возбудителей передается с помощью аэрогенного и фекально-орального механизмов.
Задачи современной санитарной микробиологии могут быть сформулированы следующим образом:
1. Разработка, совершенствование и оценка методов микробиологических исследований объектов окружающей среды – воды, почвы, воздуха, предметов обихода, а также пищевых продуктов.
2. Выработка нормативов, определяющих соответствие микробных биоценозов исследуемых объектов гигиеническим требованиям; совершенствование санитарного законодательства, способствующего охране объектов окружающей среды от загрязнения.
3. Оценка путей воздействия человека и животных на окружающую среду. Эта проблема интересует санитарных микробиологов прежде всего потому, что человек и животные являются источниками загрязнения окружающей среды как патогенными, так и другими разнообразными микроорганизмами.
При оценке путей воздействия особое внимание уделяется изучению:
нарушений процессов естественного самоочищения различных объектов окружающей среды, вызванных деятельностью человека (например, нарушение самоочищающей способности почвы);
природных процессов регуляции микробного населения почвы, воды, воздуха.
4. Разработка рекомендаций по оздоровлению объектов окружающей среды и контроль за эффективностью проводимых мероприятий.
Это, в частности, предупредительный и текущий санитарный надзор.
Предупредительный санитарный надзор необходим при проектировании и строительстве различных предприятий, при выборе источников водоснабжения, и т.д.
Текущий санитарный надзор – непрерывный контроль за качеством водоснабжения, работой пищевой сети, эффективностью обеззараживания сточных вод, и т.п.
5. Охрана окружающей среды. Эта задача вытекает из всех предыдущих задач санитарной микробиологии, поскольку здоровье человека напрямую зависит от качества окружающей среды
ОТЛИЧИЯ САНИТАРНОЙ микробиологии от МЕДИЦИНСКОЙ:
объекты исследования – объекты внешней среды (крупногабаритные);
сложность выделения;
постоянный динамический контроль;
комплексные методы: прямые и непрямые (чаще);
методы должны быть простыми, стандартными;
применяет специфические методы обогащения, селективные среды, другие методы физического и химического обогащения;
важная роль отводится ЭКСПРЕСС-МЕТОДАМ (ИФА, РИА, ПЦР);
часто сочетает качественные и количественные показатели, это позволяет оценить массивность загрязнения того или иного объекта.
Принципы проведения санитарно-микробиологических исследований.
Правильный забор проб. Его проводят с соблюдением всех необходимых условий, регламентированных для каждого исследуемого объекта. Соблюдается стерильность. При невозможности немедленного проведения анализа материал сохраняют в холодильнике не дольше 6-8 часов.
Серийность проводимых анализов. Большинство исследуемых объектов содержит самые разнообразные микроорганизмы, распределенные крайне неравномерно. Проводят забор серии проб из разных участков объекта. В лаборатории образцы смешивают, а затем точно отмеряют необходимое количество материала (обычно среднее по отношению к исследуемому материалу в целом).
Повторность отбора проб. Как правило, в исследуемых объектах состав микрофлоры меняется достаточно быстро, кроме того, патогенные микроорганизмы распределяются в них неравномерно. Соответственно повторный отбор проб позволяет получить более адекватную информацию.
Применение только стандартных методов исследования – дает возможность получать сравнимые результаты в различных лабораториях.
Использование комплекса тестов: прямых (выявляющих патогены) и косвенных.
Оценка объектов по совокупности полученных результатов – с учетом других гигиенических показателей (ОРГАНОЛЕПТИЧЕСКИХ, ХИМИЧЕСКИХ, ФИЗИЧЕСКИХ и т.д.)
Методы проведения санитарно-микробиологических исследований
Практическая санитарная микробиология использует два основных метода оценки санитарно-эпидемического состояния среды.
Методы ПРЯМОГО обнаружения возбудителя.
Являются наиболее точными и надежными критериями оценки эпидемической опасности внешней среды. Основной недостаток – низкая чувствительность.
Трудность выделения патогенных микроорганизмов на питательных средах обусловливают следующие факторы:
Сравнительно низкое содержание патогенных микроорганизмов во внешней среде, составляющих 1/30000 всего видового состава микрофлоры внешней среды. Кроме того, она распределена неравномерно.
Выделение одного возбудителя не всегда свидетельствует о присутствии других видов патогенов. То есть, необходимо проводить исследования практически в отношении каждого патогена, что не осуществимо.
Изменчивость патогенов. Последние, попадая во внешнюю среду, приобретают новые свойства, затрудняющие их распознавание.
Конкурентные взаимоотношения между патогенами и сапрофитами при совместном выращивании на питательных средах.
Недостаточная элективность питательных сред и необходимость использования лабораторных животных и культур тканей.
Методы КОСВЕННОЙ индикации возможного присутствия возбудителя во внешней среде.
Используют два критерия, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии возбудителя во внешней среде:
Общее микробное число (ОМЧ)
Содержание санитарно-показательных микроорганизмов (СПМ)
Общее микробное число (ОМЧ) определяют путем подсчета всех микроорганизмов в 1 грамме или 1 мл субстрата.
При этом исходят из предположения, что чем больше объект загрязнен органическими веществами, тем выше ОМЧ и тем вероятнее присутствие патогенов. Однако, это не всегда так, так как ОМЧ может быть большим за счет сапрофитов, а патогены могут отсутствовать!
Поэтому более адекватно расценивать ОМЧ как показатель интенсивности загрязнения внешней среды органическими веществами.
ОМЧ определяют двумя методами:
Прямой подсчет. Проводят под микроскопом с помощью специальных камер, например, Петрова или Горяева, либо специальных электронных счетчиков. Предварительно исследуемую пробу гомогенизируют и вносят краситель (обычно эритрозин). Можно проводить прямой подсчет и на мембранных фильтрах, через которые пропускают исследуемую жидкость или взвесь. Метод применяют в экстренных случаях. При необходимости срочного ответа о количественном содержании бактерий (например, при авариях в системе водоснабжения, при оценке эффективности работы очистных сооружений и др.). Основной недостаток – невозможность подсчитать бактерии, когда образуются их скопления или когда они «прилипают» к частицам исследуемого субстрата. Не удается подсчитать мелкие микроорганизмы, не говоря уже о вирусах. И, наконец, нельзя отличить живые от погибших микроорганизмов.
Количественный посев на питательные среды. Из приготовленных серийных десятикратных разведений исследуемой жидкости или суспензии по 1 мл переносят в стерильные чашки Петри и заливают расплавленным и остуженным до 45-50o С МПА. Равномерно смешивают жидкости и после застывания агара чашки помещают в термостат. После инкубации подсчитывают число выросших колоний и с учетом разведений высчитывают число жизнеспособных микробов в единице объема исследуемого объекта. При этом выявляются лишь мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные бактерии, способные размножаться на МПА. Таким образом, получаемые цифры значительно ниже истинного количества микроорганизмов в исследуемом объекте.
Санитарно-показательными называют микроорганизмы, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии патогенов во внешней среде. Исходят из предположения, что чем больше объект загрязнен экстрактами человека и животных, тем больше будет санитарно-показательных микроорганизмов и тем вероятнее присутствие патогенов.
Ответ.
Санитарно-показательными называют микроорганизмы, по которым можно косвенно судить о возможном присутствии патогенов во внешней среде. Исходят из предположения, что чем больше объект загрязнен экстрактами человека и животных, тем больше будет санитарно-показательных микроорганизмов и тем вероятнее присутствие патогенов.
Требования.
Микроорганизм должен постоянно обитать в естественных полостях человека и животных и постоянно выделяться во внешнюю среду.
Микроб не должен размножаться во внешней среде (исключая пищевые продукты), или размножаться незначительно.
Длительность выживания микроба во внешней среде должна быть не меньше, а даже больше, чем у патогенных микроорганизмов.
Устойчивость СПМ во внешней среде должна быть аналогичной или превышать таковую у патогенных микроорганизмов.
У микроба не должно быть во внешней среде «двойников» или аналогов, с которыми их можно перепутать.
Микроб не должен изменяться во внешней среде, во всяком случае, в сроки выживания патогенных микроорганизмов.
Методы идентификации и дифференциации микроорганизмов должны быть простыми.
Классификация.
СПМ условно разделяют на 3 группы.
Между ними нет четко очерченных границ; некоторые микроорганизмы являются как показателями фекального, так и аэрогенного загрязнения.
Все СПМ расценивают как индикаторы биологического загрязнения.
Условно выделяют следующие группы.
Группа А включает обитателей кишечника человека и животных; микроорганизмы расценивают как индикаторы фекального загрязнения.
БГКП – ОКБ, эшерихии, энтерококки, протеи, сальмонеллы; а также сульфит-восстанавливающие клостридии (включая Cl. perfringens), термофилы, бактериофаги, синегнойная палочка, кандиды, ацинетобактеры и аэромонады.
Группа В включает обитателей верхних дыхательных путей и носоглотки; микроорганизмы расценивают как индикаторы аэрогенного загрязнения.
В нее входят альфа- и бета-гемолитические стрептококки, стафилококки (плазмакоагулирующие, лецитиназа-положительные, гемолитические и антибиотикоустойчивые; в некоторых случаях определяют вид стафилококка – золотистый).
Группа С включает сапрофитные микроорганизмы, обитающие во внешней среде; микроорганизмы расценивают как индикаторы процессов самоочищения.
В нее входят бактерии-аммонификаторы, бактерии-нитрификаторы, некоторые спорообразующие бактерии, грибы, актиномицеты и др.
Содержание СПМ выражают в титрах и индексах.
Титр СПМ – наименьший объем исследуемого материала (в мл) или весовое количество (в гр), в котором обнаружена ХОТЯ БЫ ОДНА ОСОБЬ СПМ.
Индекс СПМ – количество особей СПМ, обнаруженных в определенном объеме (количестве) исследуемого объекта.
Для воды, молока и других жидких продуктов – в 1 л; для почвы, пищевых продуктов – в 1 г.
Индекс – величина, обратная титру, поэтому перерасчет титра в индекс и обратно можно производить по формуле: Т=1000/И; И=1000/Т – для жидкостей. Соответственно для почвы и пищевых продуктов Т=1/И, И=1/Т.
Как дополнительный показатель в настоящее время также используют индекс наиболее вероятного числа (НВЧ), имеющий доверительные границы, в пределах которых может колебаться истинное количество искомого микроба с 95% вероятностью. Для определения НВЧ исследования проводят 3, 5, и 10 раз. Показатель определяют по специальным таблицам Хоскенса-Муре
Критерии санитарно-микробиологической оценки объектов внешней среды.
качественный;
количественный:
- ОМЧ;
- концентрации СПМ:
- титр;
- индекс;
- НВЧ.