Ответ.
Вода является естественной средой обитания разнообразных микроорганизмов (различные виды бактерий, грибы, простейшие и водоросли). Совокупность всех водных организмов называется микробиальный планктон.
На количественный состав микрофлоры основное влияние оказывает происхождение воды – пресные поверхностные (проточные воды рек, ручьев; и стоячие озер, прудов, водохранилищ), подземные (почвенные, грунтовые, артезианские), атмосферные и соленые воды.
По характеру пользования выделяют питьевую воду (централизованного и местного водоснабжения), воду плавательных бассейнов, лед медицинский и хозяйственную. Особого внимания требуют сточные воды.
Микрофлору водоемов образуют две группы:
автохтонные (или водные) и
аллохтонные (попадающие извне при загрязнении из различных источников) микроорганизмы.
1. Автохтонная микрофлора – совокупность микроорганизмов, постоянно живущих и размножающихся в воде. Как правило, микрофлора воды напоминает микробный состав почвы, с которой вода соприкасается. В ее состав входят микрококки, сарцины, некоторые виды Proteus и Leptospira. Из анаэробов – Bacillus cereus и некоторые виды клостридий. Эти микроорганизмы играют значительную роль в круговороте веществ, расщепляя органические отходы, клетчатку и др.
2. Биологическое загрязнение водоемов.
Со сточными, ливневыми, талыми водами в водоемы попадают многие виды микроорганизмов, резко изменяющих микробный биоценоз. Основной путь микробного загрязнения – попадание неочищенных городских отходов и сточных вод. Также – при купании людей, скота, стирке белья и др. В воду могут попадать представители нормальной микрофлоры человека, УП, патогенной (возбудители кишечных инфекций, лептоспирозов, иерсиниозов, вирусы полиомиелита, гепатита А и т.д.).
Следует помнить, что вода не является благоприятной средой для размножения патогенных микроорганизмов, для которых биотопами являются организм человека или животных.
Самоочищение водоемов
Освобождение от контаминирующих микроорганизмов наблюдается после органического загрязнения водоемов за счет КОНКУРЕНТНОЙ активации сапрофитной микрофлоры, что приводит к быстрому разложению органических веществ, уменьшению численности бактерий, особенно «фекальных».
Существует термин «сапробность» – (sapros – гнилой, греч.) обозначает комплекс особенностей водоема, в том числе состав и количество микроорганизмов в воде, содержащей органические и неорганические вещества в определенных концентрациях. Процессы самоочищения воды в водоемах происходят последовательно и непрерывно. Различают полисапробные, мезасапробные и олигосапробные зоны.
Полисапробные зоны – зоны сильного загрязнения. Содержат большое количество органических веществ и почти лишены кислорода. Количество бактерий в 1 мл воды в полисапробной зоне достигает миллиона и более.
Мезасапробные зоны – зоны умеренного загрязнения. Количество микроорганизмов – сотни тысяч в 1 мл.
Олигосапробные зоны – зоны чистой воды. Характеризуются окончившимся процессом самоочищения. Количество бактерий от 10 до 1000 в 1 мл воды.
Таким образом, патогенные микроорганизмы, попадающие в водоем, достаточно обильны в полисапробных зонах, постепенно отмирают в мезосапробных и практически не обнаруживаются в олигосапробных зонах.
При санитарно-микробиологическом исследовании воды выделяют ОКБ, энтерококки, стафилококки и патогенные микроорганизмы (сальмонеллы, холерные вибрионы, лептоспиры, шигеллы и др.).
Основания для санитарно-микробиологического исследования воды:
выбор источника централизованного водоснабжения и контроль за ним;
контроль эффективности обеззараживания питьевой воды централизованного водоснабжения;
наблюдение за подземными источниками водоснабжения (артезианские скважины, почвенные воды и т.д.);
наблюдение за источниками индивидуального водопользования (колодцы, родники и др.);
наблюдение за санитарно-эпидемиологическим состоянием воды открытых водоемов;
контроль эффективности обеззараживания воды плавательных бассейнов;
проверка качества очистки и обеззараживания сточных вод;
расследование водных вспышек инфекционных болезней.
Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды
В настоящее время регламентируется Методическими указаниями МУК 4.2.1018-01.
1. Определение ОМЧ – общее число мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, способных образовывать колонии на питательном агаре при t = 37o C в течение 24 часов.
Из каждой пробы делают посев не менее двух объемов по 1 мл в 2 чашки Петри по 1 мл воды + 8-12 мл расплавленного остуженного (45-490 С) питательного агара, перемешивают, дают застыть, ставят в термостат 37o C, 24 часа. Затем подсчитывают все выросшие на чашке колонии при увеличении в 2 раза (но не более 300 колоний на чашке). Количество колоний на чашках суммируют и делят на 2 – результат выражают в КОЕ на 1 мл воды. Допускается до 50 КОЕ на 1 мл воды.
2. Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий методом мембранной фильтрации (основной метод).
Общие колиформные бактерии – ОКБ – грам-, оксидаза-, не образующие спор палочки, способные расти на дифференциальных лактозных средах, ферментирующие лактозу до КГ при t = 37o C в течение 24 часов.
Термотолерантные колиформные бактерии - ТКБ – входят в число ОКБ, обладают всеми их признаками, кроме того, способны ферментировать лактозу до КГ при при t = 44o C в течение 24 часов.
Метод основан на фильтрации установленного объема воды через мембранные фильтры, выращивании посевов на дифференциальной питательной среде с лактозой и последующей идентификации колоний по культуральным и биохимическим признакам.
Анализируют 3 объема по 100 мл, можно дробить объемы (10, 40, 100, 150 мл). Отмеренный объем воды фильтруют через мембранные фильтры. Фильтры помещают на среду Эндо (до трех фильтров на 1 чашку) и инкубируют t0 370 С в течение 24 часов.
Если нет роста – отрицательный результат – ОКБ и ТКБ не обнаружены. Если есть типичные лактозопозитивные колонии с отпечатком на обратной стороне фильтра, подсчитывают, подтверждают их принадлежность к ОКБ и ТКБ. Для этого исследуется:
оксидазная активность,
принадлежность к грамотрицательным бактериям,
ферментация лактозы до КГ (в двух пробирках – при t = 37o C и 440 С).
Результат высчитывают по формуле Х=а∙100/V, где
а – число колоний (в сумме),
V – объем воды (в сумме),
Х – число колоний в 100 мл воды.
Результат выражают в КОЕ ОКБ (ТКБ) в 100 мл воды. В норме ОКБ (ТКБ) в 100 мл воды питьевой не должны определяться.
3. Споры сульфитредуцирующих клостридий – спорообразующие анаэробные палочковидные бактерии, редуцирующие сульфит натрия на железо-сульфитном агаре при t = 44o C в течение 16-18 часов. Метод основан на выращивании посевов в железо-сульфитном агаре в условиях, приближенных к анаэробным, и подсчете числа черных колоний.
Объем воды 20 мл прогревают на водяной бане 75-80o С в течение 15 минут для исключения вегетативных форм, затем фильтруют через бактериальный фильтр, который помещают в пробирку с расплавленным железо-сульфитным агаром (70-80o С), остужают, помещают в термостат t = 44o C на 16-18 часов.
Колифаги – вирусы бактерий, способные лизировать E.coli и формировать при t = 37o C через 18-20 часов зоны лизиса бактериального газона (бляшки) на питательном агаре. Число бляшек не подсчитывается – АНАЛИЗ КАЧЕСТВЕННЫЙ.
Показатель |
СанПиН, не более |
Общее микробное число (КОЕ/мл) |
50 |
ОКФБ (число бактерий в 100 мл) |
отсутствуют |
ТТКФБ (число бактерий в 100 мл) |
отсутствуют |
Коли-фаги (БОЕ в 100 мл) |
отсутствуют |
Запах, баллы |
2 |
Привкус, баллы |
2 |
Мутность, мг/л |
1,5 |
Цветность, град. |
20 |
Общая минерализация (по сухому остатку), мг/л |
1000 |
Общая жесткость, мг-экв/л |
7,0 |
Хлориды, мг/л |
350 |
Сульфаты, мг/л |
500 |
Нитраты, мг/л |
45 |
Фториды (для 1-2 климатических районов), мг/л |
1,5 |
Исследование сточных вод регламентируется МУ 2.1.5.800 – 99 «Организация Госсанэпиднадзора за обеззараживанием сточных вод», 1999 год. Применяют прямой посев на 4 чашки со средой Эндо по 0,5 мл (2 мл – весь объем). Затем подсчитывают количество КОЕ ОКБ и ТКБ, делают перерасчет на 100 мл воды.
Вода бассейнов исследуется по Санитарно-эпидемиологическим правилам и нормативам - СанПиН 2.1.2.1188-03. В 100 мл воды бассейнов допускается не более 1 КОЕ ОКБ, не допускается ТКБ, колифаги, золотистый стафилококк, возбудители кишечных инфекций, синегнойная палочка. Лабораторный контроль по основным микробиологическим показателям (ОКБ, ТКБ, колифаги и золотистый стафилококк) проводится 2 раза в месяц. Исследования на наличие возбудителей кишечных инфекций проводятся при неблагоприятной эпидемической ситуации.
При появлении спорадических случаев пневмоний неясной этиологии или возникновении среди посетителей бассейна эпидемических внесезонных вспышек ОРЗ проводятся исследования воды на наличие легионелл (Legionella pneumophilia), размножению которых способствует теплая вода и брызги. При дыхании мелкодисперсный аэрозоль, содержащий легионеллы, попадает в легкие, что может вызвать «болезнь легионеров» или понтиакскую лихорадку.
Получение неудовлетворительных результатов исследований воды по основным микробиологическим, паразитологическим показателям; обнаружение возбудителей кишечных инфекционных или паразитарных заболеваний, синегнойной палочки является основанием для полной смены воды в ванне. Смена воды в ванне бассейна должна сопровождаться механической чисткой ванны, удалением донного осадка и дезинфекцией с последующим отбором проб на анализ.
ЗАБОЛЕВАНИЯ ИНФЕКЦИОННОЙ ПРИРОДЫ, КОТОРЫЕ МОГУТ ПЕРЕДАВАТЬСЯ ЧЕРЕЗ ВОДУ ПЛАВАТЕЛЬНЫХ БАССЕЙНОВ
Заболевания |
Степень связи с водным фактором |
1. Аденовирусная фаринго-конъюктивальная лихорадка |
+++ |
2. Эпидермофития («чесотка пловцов») |
+++ |
3. Вирусный гепатит А |
++ |
4. Коксаки-инфекция |
++ |
5. Дизентерия |
++ |
6. Отиты, синуситы, тонзиллиты, конъюктивиты |
++ |
7. Туберкулез кожи |
++ |
8. Грибковые заболевания кожи |
++ |
9. Легионеллез |
++ |
10. Энтеробиоз |
++ |
11. Лямблиоз |
++ |
12. Криптоспоридиоз |
++ |
13. Полиомиелит |
+ |
14. Трахома |
+ |
15. Гоноррейный вульвовагинит |
+ |
16. Острые сальмонеллезные гастроэнтериты |
+ |
Связь с водным фактором: +++ - высокая, ++ - существенная, + - возможная |
|
Микробиологический анализ воды открытых водоемов регламентируется МУК 4.2.1884-04 «Санитарно-микробиологический и санитарно-паразитологический анализ воды поверхностных водных объектов».
Ответ.
Воздух – один из самых значимых объектов внешней среды. По сути – нужен жесткий контроль (хотя это неосуществимо).
Воздух является средой, в которой микроорганизмы не способны размножаться (УФЛ, сухость, температурные колебания, перемещения воздуха, нет питательных веществ). Бактериальная обсемененность воздуха закрытых помещений всегда превышает обсемененность атмосферного воздуха, в том числе и патогенными микроорганизмами, попадающими в воздух от больных людей, животных и бактерионосителей.
Микрофлору воздуха условно разделяют на резидентную (более часто обнаруживаемую) и временную, менее стойкую к воздействию различных факторов (обнаруживают спорадически).
Постоянная микрофлора воздуха формируется за счет почвенных микроорганизмов. В основном это микрококки, сарцины, B.subtilis, некоторые виды Actinomices, Penicillum, Aspergillus и др.
Временная микрофлора воздуха также формируется преимущественно за счет микроорганизмов почвы, а также за счет видов, поступающих с поверхности водоемов, загрязнения за счёт выделений из ВДП, производственная и с/х сфера также играют роль.
Контаминация воздуха патогенными микроорганизмами происходит в основном капельным путем в составе аэрозоля, образующегося при разговоре, кашле, чихании. В зависимости от размера капель, их электрического заряда, скорости движения в воздухе аэрозоль может иметь капельную и пылевую фазы, а также капельные ядрышки.
А) Капельная фаза – представлена мелкими каплями, длительно сохраняющимися в воздухе и испаряющимися до оседания.
Б) Пылевая фаза – представлена крупными, быстро оседающими и испаряющимися каплями; в результате образуется пыль, способная подниматься в воздушную среду.
В) Капельные ядрышки – мелкие капельки аэрозоля (до 100 нм), высыхая, остаются в воздухе во взвешенном состоянии и образуют устойчивую аэродисперсную систему. В них частично сохраняется влага, поддерживающая жизнеспособность микроорганизмов. Последние в составе капельных ядрышек могут переноситься на значительные расстояния.
Санитарно-микробиологические исследования воздуха.
Основной задачей исследований является гигиеническая и эпидемиологическая оценка воздушной среды, а также разработка комплекса мероприятий, направленных на профилактику аэрогенной передачи возбудителей инфекционных болезней.
При оценке санитарного состояния закрытых помещений в зависимости от задач исследования определяют ОМЧ, наличие СПМ (стафилококков, α- и β-гемолитических стрептококков, являющихся показателями контаминации микрофлорой носоглотки человека).
Отбор проб в закрытых помещениях: точки отбора на каждые 20 м2 – одна проба, по типу конверта.
Методы отбора:
седиментационные и
аспирационные – основанные на принудительном осаждении микроорганизмов из воздуха на поверхность плотной питательной среды или в улавливающую жидкость. Используют прибор для отбора проб воздуха (ПОВ – 1), пробоотборник аэрозольный бактериологический (ПАБ – 1). Отбор проб проводят со скоростью 20-25 л/мин в течение 5-4 минут. Т.о., определяется микрофлора в 100 л воздуха.
Бактериологическое исследование предусматривает:
определение общего содержания микробов (ОМЧ) в 1 м3 воздуха;
определение содержания золотистого стафилококка в 1 м3 воздуха.
Отбор проб проводят в следующих помещениях:
- операционных блоках;
- перевязочных;
- послеоперационных палатах;
- отделениях и палатах реанимации и др. помещениях, требующих асептических условий.
Пробы воздуха отбирают аспирационным методом со скоростью протягивания воздуха 25 л/мин. Количество пропущенного воздуха должно составлять 100 литров для определения ОМЧ и 250 литров для определения наличия золотистого стафилококка.