6
д'Эрелля (разрушение бактерий в результате инфицирования их бактериальными вирусами).
Кроме того Ф. д'Эрелль высказал предположение, что бактериофаг размножается внутри микробных клеток, в результате чего в окружающую среду поступают многочисленное дочернее потомство. Размножение бактериофага в микробных клетках на плотной питательной среде проявляется формированием стерильных пятен или негативных колоний. В жидкой питательной среде размножение бактериофага приводит к просветлению среды. Позднее было установлено, что бактериофаги размножаются только внутри бактерий определенных видов. Это наблюдение позволило использовать бактериофаги в лечебных целях. Ф. д'Эрелль впервые применил бактериофаги для лечения бубонной чумы в Египте и холеры в Индии. В 1934-1937 гг. Ф. д'Эрелль работал в Тбилиси, где участвовал в создании НИИ бактериофагов, микробиологии и вирусологии им. Г. Элиава (рисунок 4).
Рисунок 4 - Феликс д'Эрелль и Григорий Элиава в Тбилиси.
В последующие годы бактериофаги были обнаружены более чем у 100 видов патогенных и непатогенных бактерий. Однако изучение ультраструктуры бактериофагов стало возможным после изобретения электронного микроскопа. Первый просвечивающий электронный микроскоп сконструировали в 1931 г. немецкие инженеры-электронщики М. Кнолл (рисунок 5) и Э. Руска (рисунок 6).
Рисунок 5 - Макс Кнолл (1897-1969 гг.).
Рисунок 6 - Эрнст Руска (1906-1988 гг.).
В 1986 г. Э. Руска за разработку электронного микроскопа был удостоен Нобелевской премии. Первые электронные микрофотографии бактериофагов получил брат Э. Руска - Г. Руска (рисунок 7).
Рисунок 7 - Гельмут Руска (1908-1973 гг.) и сделанная им электронная фотография кишечной палочки, инфицированной бактериофагом.
Бактериофаги широко распространены в природе - их выделяют из воды, почвы, кишечника человека, животных и птиц, из продуктов питания, то есть из тех объектов, в которых обитают микроорганизмы. Во внешнюю среду бактериофаги могут попадать с выделениями больных, реконвалесцентов и носителей. В связи с этим бактериофаги кишечных бактерий являются показателями фекального загрязнения почвы и воды.
Бактериофаги находят широкое практическое применение. В 1921 г. Ричард Брайонг и Джозеф Мэйсин впервые описали способ лечения стафилококковых поражений кожи с помощью бактериофагов. С тех пор бактериофаги находят широкое применение для диагностики, профилактики и лечения инфекционных заболеваний.
8
Классификация бактериофагов
Вирусы бактерий объединены в класс Bacteriophagae. При классификации бактериофагов учитывают морфологию фаговых частиц, спектр действия, физикохимический состав, антигенную структуру и другие свойства. В настоящее время согласно Международной классификации и номенклатуре вирусов в зависимости от типа нуклеиновой кислоты бактериофаги подразделяются на ДНК- и РНКсодержащие. Большинство фагов относится к ДНК-содержащим вирусам с нуклеокапсидом, организованным по принципу смешанной симметрии. В состав бактериофагов может входить как одноцепочечные, так и двуцепочечные молекулы ДНК или РНК. По морфологии фаговых частиц и типу нуклеиновой кислоты бактериофаги распределены на семейства (таблица 1).
Таблица 1 – Семейства бактериофагов
Бактериофаги |
Семейства |
Особенности строения |
ДНК-содержащие |
Myoviridae |
Головка сферической или овальной |
бактериофаги |
|
формы и сокращающийся хвостовой |
|
|
отросток, двунитевая ДНК |
|
Siphoviridae |
Головка сферической формы и длинный |
|
|
несокращающийся хвостовой отросток, |
|
|
двунитевая ДНК |
|
Podoviridae |
Головка сферической формы и короткий |
|
|
несокращающийся хвостовой отросток, |
|
|
двунитевая ДНК |
|
Lipothrixviridae |
Нитевидная форма, двунитевая ДНК |
|
Plasmaviridae |
Округлая форма, двунитевая ДНК |
|
Corticoviridae |
Округлая форма, липиды в составе |
|
|
многослойной оболочки, шипы, |
|
|
двунитевая ДНК |
|
Fuselloviridae |
Форма лимона, короткий хвостовой |
|
|
отросток, двунитевая ДНК |
|
Tectiviridae |
Округлая форма, отсутствие хвостового |
|
|
отростка, шипы, двунитевая ДНК |
|
Microviridae |
Округлая форма, отсутствие хвостового |
|
|
отростка, однонитевая ДНК |
|
Inoviridae |
Палочковидная форма, однонитевая ДНК |
РНК-содержащие |
Cystoviridae |
Сферическая форма, сегментированная |
бактериофаги |
|
двунитевая РНК |
|
Leviviridae |
Сферическая форма, плюс-РНК |
По форме бактериофаги подразделяются на следующие морфологические группы или типы (рисунок 8):
-нитевидные фаги;
-мелкие фаги без отростка;
9
-кубические фаги с аналогом (рудиментом) отростка;
-фаги с коротким отростком (хвостом);
-фаги с длинным отростком и несокращающимся чехлом;
-фаги с длинным отростком и сокращающимся чехлом.
Морфологические типы бактериофагов
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|
|
|
|
|
|
Нитевидные |
Фаги |
Фаги с |
Фаги с |
Фаги с длинным |
Фаги с длинным |
фаги |
без |
аналогом |
коротким |
отростком и |
отростком и |
|
отростка |
отростка |
отростком |
несокращающимся |
сокращающимся |
|
|
|
|
чехлом |
чехлом |
Рисунок 8 – Распределение бактериофагов на морфологические типы.
Каждый бактериофаг вызывает лизис (растворение) определенного вида бактерий. Поэтому бактериофаги обозначают буквами латинского или русского алфавита с цифровым индексом, перед которыми указывают название вида бактерий (например, фаги E. coli Т2). Фаги, лизирующие дизентерийные бактерии, называются дизентерийными бактериофагами, лизирующие сальмонеллы - сальмонеллезными бактериофагами, лизирующие дифтерийные бактерии - дифтерийными бактериофагами и т. д. Бактериофаги не способны инфицировать эукариотические клетки.
По спектру литического действия выделяют следующие группы бактериофагов:
-типовые (типоспецифические) бактериофаги (Т-фаги) взаимодействуют с отдельными типами (вариантами) бактерий внутри одного вида;
-моновалентные бактериофаги (монофаги) взаимодействуют с бактериями одного вида;
-поливалентные бактериофаги (полифаги) взаимодействуют с бактериями нескольких родственных видов.
По механизму взаимодействия с клетками бактериофаги подразделяются на вирулентные и умеренные. Вирулентные бактериофаги (литические бактериофаги) проникают в бактерии, размножаются в них и выходят из бактериальной клетки, вызывая ее лизис. Умеренные бактериофаги после проникновения в клетку встраивают свою нуклеиновую кислоту в геном бактерии и не вызывают ее лизиса.
10
Строение и химический состав бактериофагов
Строение бактериофагов изучают с помощью электронной микроскопии. При этом для контрастирования образцы напыляют металлами или фосфорновольфрамовой кислотой. Особенности строения бактериофагов разных семейств представлены на рисунке 9.
ДНК-содержащие фаги
|
|
|
|
|
|
|
|
Myoviridae |
|
Siphoviridae |
Podoviridae |
Lipothrixviridae |
|
Plasmaviridae |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Corticoviridae |
|
Fuselloviridae |
Tectiviridae |
Microviridae |
|
Inoviridae |
|
|
|
РНК-содержащие фаги |
|
||||
|
|
|
|
|
|
||
|
Cystoviridae |
|
|
Leviviridae |
|
||
Рисунок 9 – Особенности строения ДНК- и РНК-содержащих фагов.
Бактериофаги разных морфологических типов и семейств значительно отличаются друг от друга по своему строению. Бактериофаги первого морфологического типа представляют собой палочковидные или нитевидные структуры (рисунок 10).