Таким образом, можно сделать вывод, что в подсобном хозяйстве «Новая Тура» и ООО «ТАТМИТ Агро» наилучшие показатели по многоплодию имели свиноматки крупной белой породы с генотипом МM гена ESR. У гетерозигот (WM) наблюдались наихудшие показатели по проценту мертворождённых поросят - 5,4 и 7,3%, что в 1,1-1,7 раза выше, чем у гомозигот (WW и MM).
2.2.16 Воспроизводительные качества свиней с разными генотипами по локусу гена RYR1
Популяции свиноматок подсобного хозяйства «Новая Тура» и ООО «ТАТМИТ Агро» было представлено особями, имеющими только один генотип по гену RYR1 - NN. Животные с генотипом NN гена RYR1 имели общее количество рождённых поросят в среднем на одну свиноматку - 11,44 и 12,07. При этом количество рождённых живых поросят составило 10,93 и 11,25 поросят в среднем на одну свиноматку. Процент мертворождённых поросят от свиноматок, несущих в своём геноме N аллель гена RYR1 был на уровне 4,5-6,8%.
Таким образом, исследования показали, что воспроизводительные качества у основных свиноматок крупной белой породы с генотипом NN по гену RYR1 были на среднем уровне.
2.2.17 Воспроизводительные качества свиней с разными генотипами по локусу гена H-FABP
Проведённые исследования показали, что свиноматки с генотипом ВВ по гену H-FABP превосходили свиноматок с другими генотипами по общему количеству рождённых поросят (на 0,66-2,03 поросёнка) и по количеству рождённых живых поросят (на 0,58-1,62 поросёнка) в среднем на одну свиноматку. При этом наибольшая разница по этим показателям была в ООО «ТАТМИТ Агро» между животные с генотипом АВ, ВВ и АА - 1,37-2,03 (Р<0,01 и Р<0,001) и 1,62 (Р<0,05 и Р<0,001) поросёнка. Наименьшие показатели воспроизводительных качеств отмечены у животных с генотипом АA. Процент мертворождённых поросят от свиноматок с разными генотипами H-FABP уменьшался в ряду ВВ > АА > АВ (подсобное хозяйство «Новая Тура») и АВ > ВВ > АА (ООО «ТАТМИТ Агро»).
Таким образом, в подсобном хозяйстве «Новая Тура» и ООО «ТАТМИТ Агро» наилучшие показатели по многоплодию имели свиноматки крупной белой породы с генотипом ВВ гена H-FABP. У животных с данным гомозиготным генотипом (ВВ) в основном наблюдался более высокий процент мертворождённых поросят - 7,3-10,4%, что в 1,5-2,5 раза выше, чем аналогов.
2.2.18 Воспроизводительные качества свиней с разными генотипами по локусу гена MC4R
Исследования свиноматок также показали, что свиноматки, несущие в своём геноме В аллель гена MC4R превосходили свиноматок с гомозиготным генотипом АА по общему количеству рождённых поросят (на 0,33-0,60 поросёнка) и по количеству рождённых живых поросят (на 0,36-0,54 поросёнка) в среднем на одну свиноматку. Процент мертворождённых поросят от свиноматок с разными генотипами по гену MC4R уменьшался в ряду АВ > АА > ВВ (подсобное хозяйство «Новая Тура») и АА > АВ (ООО «ТАТМИТ Агро»).
Таким образом, можно сделать вывод, что в подсобном хозяйстве «Новая Тура» и ООО «ТАТМИТ Агро» наилучшие показатели по многоплодию имели свиноматки крупной белой породы с генотипами АВ и ВВ гена MC4R. При этом у аналогов с генотипом АА и АВ наблюдался самый высокий процент мертворождённых поросят - 3,8-7,1%, что в 1,2-2,0 раза выше, чем у сверстниц.
2.2.19 Воспроизводительные качества свиней с разными комбинациями генотипов генов PRLR и ESR, напрямую связанных с данными показателями
Нами были проанализированы воспроизводительные качества свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов PRLR / ESR. В подсобном хозяйстве «Новая Тура» наибольшие показатели по количеству рождённых (12,25-14,00) и по количеству живых поросят при рождении (12,00-13,00) были у животных с комбинациями генотипов PRLR BB / ESR WW, PRLR BB / ESR WM и PRLR BB / ESR MM. Данные комбинации генотипов превосходили по этим показателям аналогов с другими комбинациями генотипов PRLR / ESR на 0,56-2,86 и 0,80-2,76 поросят соответственно. Причём комбинация генотипов PRLR BB / ESR WW с показателями 14,00 и 13,00 поросят имела достоверное превосходство над генотипами PRLR AA / ESR WW, PRLR AA / ESR WM, PRLR AA / ESR MM, PRLR AB / ESR WW, PRLR AB / ESR WM на 2,31-2,83 (Р<0,01 и 0,001) и 1,92-2,76 (Р<0,05 и 0,001) поросят соответственно. Процент мертворождённых поросят от свиноматок с разными комбинациями генотипов по гену PRLR / ESR уменьшался в ряду PRLR AB / ESR WM > PRLR BB / ESR WW > PRLR AA / ESR MM > PRLR AA / ESR WM > PRLR AB / ESR WW > PRLR AA / ESR WW и PRLR AB / ESR MM > PRLR BB / ESR MM > PRLR BB / ESR WM.
Тогда как в ООО «ТАТМИТ Агро» наибольшие показатели по количеству рождённых (11,90-13,78) и по количеству живых поросят при рождении (11,20-12,33) были у животных с комбинациями генотипов PRLR AA / ESR MM, PRLR AВ / ESR MM, PRLR BB / ESR WM и PRLR BB / ESR MM.
Представленные комбинации генотипов превосходили по этим показателям сверстниц с другими комбинациями генотипов PRLR / ESR на 0,17-2,38 и 0,20-1,89 поросят соответственно. Причём комбинация генотипов PRLR BB / ESR MM с показателями 13,78 и 12,33 поросят имела достоверную разницу с комбинациями генотипов PRLR AA / ESR WM, PRLR AA / ESR MM, PRLR AB / ESR WW, PRLR AB / ESR WM, PRLR AB / ESR MM и PRLR BB / ESR WM на 1,21-2,38 (Р<0,05-0,001) и 1,40-1,89 (Р<0,05-0,01) поросят соответственно. Процент мертворождённых поросят от свиноматок с разными комбинациями генотипов по гену PRLR / ESR уменьшался в ряду PRLR BB / ESR MM > PRLR AA / ESR WM > PRLR BB / ESR WW > PRLR AB / ESR WW > PRLR AB / ESR WM > PRLR AA / ESR MM > PRLR BB / ESR WM > PRLR AA / ESR WW > PRLR AB / ESR MM.
Таким образом, исследования показали, что только две комбинации генотипов PRLR BB / ESR WM и PRLR BB / ESR MM среди изучаемых основных свиноматок крупной белой породы характеризуются достаточно высоким многоплодием и встречались как в подсобном хозяйстве «Новая Тура», так и в ООО «ТАТМИТ Агро».
2.2.20 Воспроизводительные качества свиней с разными комбинациями генотипов генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R
Нами были изучены воспроизводительные качества свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов PRLR / ESR / RYR1 / H-FABP / MC4R. Исследования показали, что в подсобном хозяйстве «Новая Тура» свиноматки с наиболее распространёнными комбинациями генотипов PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR AA / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR AA / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AB, PRLR AA / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AB обладали показателями по количеству рождённых (11,07-11,86) и по количеству живых (10,57-11,43) поросят при рождении, близкими к средним значениям по стаду - 11,44 и 10,93 поросят. У шести комбинаций генотипов PRLR AB / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R BB, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AB, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AB, PRLR BB / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R BB, PRLR BB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA и PRLR BB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA показатели по количеству рождённых (12,00-14,00) и по количеству живых (12,00-13,00) поросят были выше или равны количеству - 12 поросят.
При проведении исследовании в ООО «ТАТМИТ Агро» было выявлено, что свиноматки с наиболее встречающимися комбинациями генотипов: две комбинации генотипов имели более высокие показатели по количеству рождённых (13,25-14,4) и по количеству живых (12,75-13,00) поросят при рождении по сравнению со средними значениями по стаду - 12,07 и 11,25 поросят; однако три аналогичные комбинации генотипов имели данные ниже, чем в среднем по стаду - 11,00-11,60 и 10,20-10,40 поросят соответственно. У девяти комбинаций генотипов PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AВ, PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AA / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AB, PRLR AB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AB, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR BB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AB и PRLR BB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA показатели по количеству рождённых (12,33-14,40) и по количеству живых (12,00-13,33) поросят были выше или равны количеству - 12 поросят.
Таким образом, исследования показали, что использование комбинаций генотипов из пяти генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R позволило увеличить в подсобном хозяйстве «Новая Тура» и ООО «ТАТМИТ Агро» показатели воспроизводительной способности у основных свиноматок крупной белой породы, в частности количество рождённых и количество живых поросят в сравнение со средними значениями по стаду на 0,06-2,33 и 0,07-2,08 поросят соответственно.
2.2.21 Экономическая эффективность использования свиней с разными комбинациями генотипов генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R
Экономическая эффективность использования свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R определялась согласно методических рекомендаций Шмакова Ю.И. и др. (Шмаков Ю.И., Комаров Л.Л., Черекаев Н.В. Методические рекомендации по определению экономического эффекта от внедрения результатов научно-исследовательских работ в животноводство. Дубровицы. 1984. 30 с) с учётом методики расчёта стоимости новорождённых поросят (Никитин И.Н., Апалькин В.А. Организация и экономика ветеринарного дела. 5-е изд. прераб. и допол. М.: «КолосС». 2006. 368 с). Для этого использовали следующие формулы:
От свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R с учётом коэффициента (10,9) получена расчётная живая масса поросят при рождении от 1 свиноматки 82,84-141,70 кг - подсобное хозяйство «Новая Тура» и 98,10-145,30 кг - ООО «ТАТМИТ Агро».
В результате этого свиноматки с разными комбинациями генотипов генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R в сравнении с аналогами с комбинациями генотипов PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA (подсобное хозяйство «Новая Тура») и PRLR BB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AA / ESR WM/ RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA (ООО «ТАТМИТ Агро») выдали дополнительное количество основной продукции (в виде живой массы) в пределах 9,81-58,86 кг (11,8-71,1%) и 3,60-47,20 кг (3,7-48,1%) соответственно. При этом разница по стоимости дополнительной продукции в расчёте на 1 свиноматку составила 691,61-4149,63 руб. (подсобное хозяйство «Новая Тура») и 248,77-3264,17 руб. (ООО «ТАТМИТ Агро») соответственно.
Таким образом, расчёт экономической эффективности убедительно показал, что от свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R получено прибыли на 248,77-4149,63 руб. больше, чем от сверстниц с комбинациями PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA и PRLR BB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AA / ESR WM/ RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
На основании проведенных исследований сделаны следующие выводы:
1. Апробированная техника (аммиачный и комбинированный щелочной способы) экстрагирования ДНК из крови свиней по сравнению с ранее разработанной и оптимизированной техникой на крови крупного рогатого скота также пригодна для проведения генно-молекулярных исследований.
2. Усовершенствованные протоколы постановки ПЦР и ПЦР-ПДРФ для генотипирования свиней по локусам генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R являются допустимыми в плане точности определения аллельного полиморфизма искомых генов.
3. В стадах основных свиноматок крупной белой породы по частоте встречаемости преобладал только один аллель: по гену RYR1 это аллель N - 1,0, по гену H-FABP аллель А - 0,595-0,520, по гену MC4R аллель А - 0,80-0,87; тогда как по другим генам данные показатели были противоположные: по гену PRLR аллели А - 0,77 и В - 0,51, по гену ESR аллели W - 0,535 и M - 0,550 соответственно.
4. В стадах основных свиноматок крупной белой было 9 из 9 возможных комплексных генотипов PRLR / ESR. Наибольшей встречаемостью комплексных генотипов (в пределах от 11,5 до 24,0%) характеризовались группы животные с комбинациями PRLR AA / ESR WW, PRLR AA / ESR WM, PRLR AB / ESR WM, PRLR AB / ESR WM, PRLR AB / ESR MM, PRLR AB / ESR WW, PRLR BB / ESR WM.
5. Выявлено, что в стадах основных свиноматок крупной белой породы было 23 и 30 из 243 возможных комплексных генотипов PRLR / ESR / RYR1 / H-FABP / MC4R. Более высоким распространением отличались 7 групп свиней с комплексными генотипами PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR AA / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA по 14,0%, PRLR AA / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AB, PRLR AA / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AB по 10,0% и PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA - 9,2%, PRLR AA / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR AB / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA, PRLR AB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AB, PRLR BB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA по 5,7%.
6. Анализ основных свиноматок крупной белой породы с разными генотипами PRLR, ESR, H-FABP и MC4R по репродуктивных качествам показал, что животные с генотипами BB по гену PRLR, MM по гену ESR, BB по гену H-FABP, AB и BB по гену MC4R имели наибольшие значения по общему количеству и по количеству рождённых поросят 12,52-12,57 и 11,52-12,29; 11,70-12,81 и 11,22-12,00; 12,92-12,95 и 11,58-12,00; 11,67-12,32 и 11,15-11,59; это несколько выше, чем у свиней с другими генотипами на 0,57-1,23 и 0,24-1,76 (PRLR); 0,10-1,26 и 0,62-1,23 (ESR); 0,66-2,03 и 0,58-1,62 (H-FABP); 0,33-0,60 и 0,36-0,54 (MC4R) поросят соответственно.
7. Исследования основных свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов PRLR / ESR по воспроизводительным качествам показал, что 7 групп свиньи с комбинациями PRLR BB / ESR WW, PRLR BB / ESR WM, PRLR BB / ESR MM, PRLR AA / ESR MM, PRLR AВ / ESR MM, PRLR BB / ESR WM и PRLR BB / ESR MM выгодно отличались от сверстниц с другими комбинациями (11,90-13,78 и 11,20-13,00 - количество рождённых и живых поросят) на 0,17-2,86 и 0,20-2,76 поросят соответственно.
8. Оценка основных свиноматок крупной белой породы с разными комбинациями генотипов PRLR / ESR / RYR1 / H-FABP / MC4R по репродуктивным качествам показали, что 5 комбинаций (PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AB, PRLR BB / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R BB, PRLR BB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR BB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AA / MC4R AA) одно хозяйства и 8 комбинаций (PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AВ, PRLR AA / ESR WW / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR AB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AB, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA, PRLR AB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AA, PRLR BB / ESR WM / RYR1 NN / H-FABP BB / MC4R AB, PRLR BB / ESR MM / RYR1 NN / H-FABP AB / MC4R AA) другого хозяйства с количество рождённых (12,00-15,00) и живых (11,80-13,33) поросят превосходили средние значения по стаду на 0,56-2,56 и 0,75-2,08 поросят соответственно.
9. Использование ДНК - анализа в генотипировании свиноматок крупной белой породы по локусам генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R позволило дополнительно получить за опорос 3,7 - 71,1% расчётной живой массы поросят при рождении, что составляет в денежном выражении 248,77 - 4149,63 руб.
На основании проведенных исследований предлагается производству:
1. Лабораториям, проводящим генно - молекулярные исследования, рекомендуем использовать апробированные способы экстракции ДНК и усовершенствованную технику генотипирования свиней по локусам генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R.
2. Свиноводческим хозяйствам, занимающимся разведением племенных свиней разных пород, с целью повышения и улучшения у них хозяйственно-полезных признаков рекомендуем в качестве дополнительного критерия при отборе свиней использовать комбинации генотипов по локусам генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R.
3. Исключить из селекционного процесса свиней с нежелательными генотипами и комбинациями генотипов по локусам генов PRLR, ESR, RYR1, H-FABP, MC4R.