Полученные нами данные о снижении экспрессии гена D-глюкуронил С5-эпимеразы в опухолях человека, и антипролиферативном эффекте восстановленной экспрессии гена эпимеразы на пролиферацию опухолевых клеток in vitro и in vivo дают возможность рассматривать ген D-глюкуронил С5-эпимеразы как новый потенциальный регулятор клеточной пролиферации и роста опухолей, а так же как возможную основу для создания новых препаратов для генотерапии рака легкого.
Выводы
1. Экспрессия гена D-глюкуронил С5-эпимеразы показана для всех исследованных тканей человека, с наивысшим уровнем экспрессии в тканях молочной железы и легкого и меньшей экспрессией в тканях почки, тимуса и щитовидной железы.
2. В злокачественных опухолях молочной и предстательной железы человека происходит значительное снижение экспрессии D-глюкуронил С5-эпимеразы (84% пациентов в случае молочной железы и 45% пациентов в случае предстательной железы), при гиперплазии и доброкачественных новообразованиях экспрессия гена значительно снижается только у 7-20% пациентов.
3. Усиление экспрессии гена D-глюкуронил С5-эпимеразы супрессирует в опухолевых клетках при введении плазмидной конструкции, несущей полноразмерную кДНК эпимеразы супрессирует пролиферацию опухолевых клеток in vitro для всех исследованных клеточных линий - аденокарциномы молочной железы (MCF7), предстательной железы (LNCaP) и мелкоклеточного рака легкого человека (U2020).
4. D-глюкуронил С5-эпимераза подавляет формирование опухолей у мышах SCID - при инокуляции экспрессирующих эпимеразу опухолевых клеток U2020, опухоли образовывались лишь у 5 из 10 мышей SCID, тогда как в контроле опухоли образовывались у 5 из 6 мышей. В выросших опухолях экспрессия D-глюкуронил С5-эпимеразы практически отсутствовала как на уровне мРНК так и на белковом уровне.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Ещенко Т.Ю. Экспрессия декорина и D-глюкуронил С5-эпимеразы в нормальной ткани и опухоли молочной железы человека. // XLII международная научная студенческая конференция «Студент и научно-технический прогресс. - 2004. - Новосибирск, Россия. - С. 15.
2. Ещенко Т.Ю. Экспрессия гена D-глюкуронил С5-эпимеразы в нормальной и опухолевой ткани молочной железы человека. // 8-ая Международная Пущинская школа- конференция молодых ученых “Биология - наука XXI века”. - 2004. - Пущино, Россия. - С. 24.
3. Григорьева Э.В., Ещенко Т.Ю., Герасимов А.Е., Сидоров С.В., Гуляева Л.Ф. D-глюкуронил С5-эпимераза как возможная причина снижения уровня декорина в активно прилиферирующих клетках. // Российская научно-практическая конференция «Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии». - 2004. - Томск, Россия. - С. 111.
4. Рыкова В.И., Бородина А., Ещенко Т., Григорьева Э., Сидоров С., Чернаков А. Изменение состава протеогликанов в опухолевой ткани молочной железы человека. // Российская Научно-практическая конферения «Новые технологии в онкологии» - 2005. - Барнаул, Россия. - С. 17
5. Grigorieva E., Eshchenko T., Borodina A., Chernakov A.E., Sidorov S.V., Rykova V.I. Proteoglycans as potential modulators of cell proliferation in breast cancer. // Int J Mol Med. - 2005. - Vol. 16. Supl. 1. - P. 25.
6. Zaidman AM, Zaidman MN, Korel AV, Mikhailovsky MA, Eshchenko T.Y., Grigorieva EV. Aggrecan gene expression disorder as aetiologic factor of idiopathic scoliosis. Stud Health Technol Inform., 2006, 123:14-7.
7. Grigorieva E., Eshchenko T., Pavlova T., Rykova V.I., Chernakov A., Zabarovsky E., Sidorov S.V. Human D-Glucuronil C5-epimerase is a potential tumor suppressor gene. // Int J Mol Med. - 2007. - Vol. 20. Supl. 1. - P. 75.
8. Eshchenko T.Y., Rykova V. I., Chernakov A.E., Sidorov S. V., Grigorieva E.V.?Expression of Different Proteoglycans in Human Breast Tumors. // Biochem (Moscow). - 2007. - Vol. 72. - No. 9. - P. 1016-1020.
9. Rykova V.I, Grigorieva E.V. Chernenko A.V., Eshchenko T.Y., Dymschic G.M.. Proteoglycans and human breast cancer. // Bull ExpBiol Med. - 2007. - Vol. 144. - No. 9. - P. 310-312.
10. Eshchenko T.Y., Vergbitskaya N.E., Nepomnyaschih G.I., Aidagulova S.V., Rykova V.I., Grigorieva E.V. Immunohistochemical analysis of hondroitin sulfate AC and decorin location in human breast cancer. // Surgery, Morphology, Lymphology. - 2007. - Vol. 4. - No. 7. - P. 18-20.
11. Eshchenko T., Chernakov A., Zabarovsky E., Sidorov S, Grigorieva E. D-glycuronyl C5-epimerase expression is lost in human breast fibroadenoma. // E J Cancer. - 2008. - Vol. 6. - No. 7. - P. 81.
12. Eshchenko T., Domanitskaya N., Pavlova T., Kashuba V., Verzhbitskaia N.E., Zabarovsky E.R., Grigorieva E.V. D-glucuronyl C5-epimerase suppresses small-cell lung tumour formation in vivo. // Int J Mol Med. - 2008. - Vol. 22. Supl. 1. - P. 5.
13. Eshchenko T., Domanitskaya N., Pavlova T., Kashuba V.I., Nepomnyashchih G.I., Aidagulova S.V., Zabarovsky E.R., Grigorieva E.V. Antiproliferative effect of D- glucuronyl C5-epimerase to human breast cancer.// Anticancer Res. - 2008. - Vol. 28. - No. 53. - P. 103.
14. Eshchenko T., Domanitskaya N., Pavlova T., Kashuba V.I., Nepomnyashchih G.I., Aidagulova S.V., Zabarovsky E.R., Grigorieva E.V Heparan sulfate epimerase: a new potential marker and target for cancer diagnosis and treatment. // Russian Conference with International participation «Molecular Oncology» - 2008. - Novosibirsk, Russia. - P. 21.
15. Grigorieva E., Eshchenko T., Rykova V.I., Chernakov A., Zabarovsky E.R., Sidorov S.V. Decreased expression of human D-glycuronyl C5-epimerase in breast cancer. Int J Cancer. - 2008. - Vol. 122. - No. 5. - P. 1172-1176.
Список используемых сокращений
ПГпротеогликаны
ГАГгликозаминогликаны
ВКМ внеклетчный матрикс
GAPDH глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназа
GlcUA глюкуроновая кислота
IdoUA идуроновая кислота
ГСгепарансульфат
ГСПГ гепарансульфат протеогликан
ПЦР полимеразная цепная реакция
мРНКматричная рибонуклеиновая кислота
GLCE D-глюкуронил С5-эпимераза
СоискательТ.Ю. Прудникова