Материал: Ответы к итоговой МБ №4 ООИ (КубГМУ Live)

Строгий аэроб, капнофил (сущ. capnophile - организм, которому для своей жизнедеятельности требуется углекислый газ в концентрации 10-15%).

Очень требователен к питательным средам и условиям культивирования. На простых питательных средах не растет, поэтому для его культивирования к основным средам добавляют нативные белки (сыворот ка, кровь, яичный желток и др.).

В качестве источников углерода и азота используют аминокислоты (глутамин, таурин, аспарагин, L-аргинин, глицин, тирозин), поэтому их необходимо включать в среду культивирования. Наиболее подходящей бессывороточной средой следует считать среду Мюллера - Хинтона, включающую полный набор аминокислот и мясной экстракт как источник факторов роста.

Оптимум pH среды 7,2-7,4. Температурный оптимум роста 37 °С, рост наблюдается в пределах 30-38 °С. Повышенная концентрация СО2 и влажность стимулируют рост менингококков. На сывороточном агаре образует круглые бесцветные нежные колонии маслянистой консистенции диаметром от 0,5 до 1,5 мм.

В отличие от условно-патогенных нейссерий не образует пигмента. На кровяном агаре образует нежные округлые колонии слегка сероватого цвета с блестящей поверхностью.

Не дает гемолиза, что отличает его колонии от колоний стафилококков, стрептококков и гемофилов. При первичном посеве очень требователен к условиям культивирования, поэтому отсутствие роста на бессывороточном агаре при 37 °С, на сывороточном агаре при 20 °С и среде с 5 % желчи дифференцируют менингококки от условно - патогенных нейссерий.

83. Методы микробиологической диагностики менингококковых инфекций.

Для микробиологической диагностики применяют бактериоскопический, бактериологический и серологический методы.

Бактериоскопическое исследование ликвора и крови позволяет определить наличие возбудителя. При наличии гнойного ликвора готовят мазки без предварительной обработки; если ликвор прозрачный или мутный, его центрифугируют при 3500 об/мин в течение 5 мин, а затем из осадка готовят мазки, которые окрашивают по Граму, метиленовым синим и другими методами для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и определения их количества. При микроскопии мазков ликвора в положительных случаях наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина и менингококки в виде типичных грамотрицательных диплококков бобовидной формы, окруженных капсулой в виде плохоокрашенного ореола. Результаты микроскопического исследования используются только в качестве предвари тельного,

41

ориентировочного ответа, поскольку морфологически нельзя отдифференцировать менингококк от других грамотрицательных бактерий, способных вызывать менингит (гонококки, другие нейссерии, гемофилы, бранхамеллы). Для микроскопического исследования крови готовят препарат «толстой капли», который высушивают и окрашивают метиленовой синькой без фиксации. При микроскопии в положительных случаях обнаруживают на голубом фоне менингококки, имеющие типичную морфологию, окруженные капсулой в виде бесцветного ореола. Трупный материал исследуют только бактериоскопически из-за низкой жизнеспособности менингококка. Носоглоточная слизь не ми крое копируется из-за наличия в ней условно-патогенных нейссерий, морфологически сходных с менингококком. Бактериологическое исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка.

Бактериологическому исследованию подвергают носоглоточную слизь, кровь и ликвор. Посев материала для получения чистой культуры производят на плотные или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь или асцитическую жидкость. Культуры инкубируют в течение 18-24 ч при 37 °С в сосуде со свечой или в специальном термостате с повышенным содержанием (8—10 %) СО2. Идентификацию выделенной культуры проводят на основании следующих свойств:

•оксидазаположительные колонии рассматривают как возможно принадлежащие к роду Neisseria,

•наличие в культуре Neisseria meningitidis подтверждают образованием уксусной кислоты при ферментации глюкозы и мальтозы (но не лактозы, сахарозы и фруктозы);

•принадлежность к серогруппам определяют в реакции агглютинации.

Серологический метод используют для обнаружения растворимых бактериальных АГ в ликворе и других видах исследуемого мате риала или АТ в сыворотке крови. Для обнаружения АГ применяют ИФА, РИА, иммуноэлектрофорез, реакцию коагглютинации. У больных менингококковой инфекцией АТ обнаруживаются с конца первой недели болезни, достигая максимума на 2—3-й неделе, а затем их титр снижается. У больных и лиц, перенесщих менингококковую инфекцию, в сыворотке обнаруживаются специфические АТ: бактерицидные, агглютинины, гемагглютинины. В разгар менингококковой инфекции повышается уровень IgM, особенно при генерализованных формах; в период реконвалесценции, в основном, обнаруживаются IgG.

84. Формы менингококковых инфекций.

Менингококковая инфекция клинически протекает в локализованной форме: менингококконосительство, острый назофарингит или в генерализованной форме: менингококцемия, менингит, менингоэнцефалит, эндокардит, артрит, полиартрит, иридоциклит, пневмония.

1)Назофарингит – наиболее легкая форма болезни.

42

88 . Бактериоскопическая диагностика менингококковых инфекций.

Бактериоскопическое исследование ликвора и крови позволяет определить наличие возбудителя. При наличии гнойного ликвора готовят мазки без предварительной обработки; если ликвор прозрачный или мутный, его центрифугируют при 3500 об/мин в течение 5 мин, а затем из осадка готовят мазки, которые окрашивают по Граму, метиленовым синим и другими методами для определения лейкоцитарной формулы, выявления менингококков и определения их количества. При микроскопии мазков ликвора в положительных случаях наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина и менингококки в виде типичных грамотрицательных диплококков бобовидной формы, окруженных капсулой в виде плохоокрашенного ореола. Результаты микроскопического исследования используются только в качестве предвари тельного, ориентировочного ответа, поскольку морфологически нельзя отдифференцировать менингококк от других грамотрицательных бактерий, способных вызывать менингит (гонококки, другие нейссерии, гемофилы, бранхамеллы). Для микроскопического исследования крови готовят препарат «толстой капли», который высушивают и окрашивают метиленовой синькой без фиксации. При микроскопии в положительных случаях обнаруживают на голубом фоне менингококки, имеющие типичную морфологию, окруженные капсулой в виде бесцветного ореола. Трупный материал исследуют только бактериоскопически из-за низкой жизнеспособности менингококка. Носоглоточная слизь не ми крое копируется из-за наличия в ней условно-патогенных нейссерий, морфологически сходных с менингококком. Бактериологическое исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка.

89. Серологическая классификация менингококков.

По капсульным АГ выделяют девять серогрупп (А, В, С, D, X, Y, Z, W135 и 29Е), а также сравнительно недавно выделенные еще четыре серогруппы (Н, I, К, L).

Капсульные АГ некоторых серогрупп иммуногенны для человека. Штаммы серо группы А вызывают эпидемические вспышки, В, С и Y — спорадические случаи заболевания.

Высокая вирулентность представителей серогруппы А связана, по-видимому, с их высокой инвазивной активностью.

На основании различий типоспецифических АГ выделяют серотипы, которые обозначают арабскими цифрами (серотипы выявлены в серогруппах В, С, Y, W135). Особый интерес среди серотиповых АГ представляет АГ серотип 2 группы В. Он наиболее изучен и является общим для штаммов, принадлежаших к группам В, С, У, W135.

Выявлено, что штаммы, выделенные от больных с генерализованной формой менингококковой инфекции, часто относятся к серотипу 2. В связи с этим наличие АГ

44

серотипа 2 рассматривается как фактор патогенности менингококка. Серотипирование имеет большое значение в эпидемиологии, так как периодически наблюдающиеся подъемы заболеваемости связаны со сменой циркулирующих серогрупп. Во время эпидемий преобладают менингококки групп А и С, которые являются наиболее патогенными.

90. Иммунологическая диагностика менингококковых инфекций.

Приготовленные из свежих культур менингококков различных серогрупп препараты обрабатывают сывороткой, а затем флюоресцирующей сывороткой против глобулинов человека. После этого препараты изучают в люминесцентном микроскопе.

91. Специфическая профилактика менингококковых инфекций.

Проводится комплекс мер, направленных на ликвидацию источника инфекции: больных необходимо выявлять, изолировать и лечить; носителей — выявлять и санировать.

Проводится бактериологическое обследование в окружении больного с целью выявления здоровых носителей менингококка. Выявленные носители санируются антибиотиками.

С целью разрыва механизма и путей передачи разуплотняют и разобщают детские коллективы, общежития, казармы. Роспуск контактировавших лиц производится на срок от 10 до 30 дней. В очаге проводятся текущая дезинфекция, проветривание помещений, ультрафиолетовое облучение и т. п. В очаге инфекции проводится специфическая активная и пассивная профилактика.

Для создания пассивного иммунитета детям дошкольного возраста вводят однократно иммуноглобулин в дозе 1,5 -3,0 мл не позднее 7-го дня после регистрации первого случая заболевания.

Профилактический эффект иммуноглобулина сохраняется в течение нескольких месяцев после введения. Для активной иммунизации используют вакцины из очищенных капсульных поли сахаридов менингококков серогрупп А и С, В России проводят вакцинацию групп риска менингококковой вакциной А или бивакциной А+С. Кроме того, возможно проведение химиопрофилактики с применением антибиотиков в замкнутых коллективах, если имеет место хотя бы один случай менингококковой инфекции.

92. Отличия пневмококков от других стрептококков.

При длительном культивировании на бульоне начинает образовывать длинные цепочки и растет подобно стрептококку на дне пробирки.

45