Материал: Practicum_po_microbiologii

Внимание! Если размещение файла нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам

а) методы окраски: по Граму, по Романовскому-Гимзе;

б) микрокартина: в отличие от бактерий микоплазмы лишены клеточной стенки, в связи с этим они полиморфны: шаровидные, нитевидные, ветвистые, по своим размерам очень мелкие – от 0,1 до 0,25 мкм (рис. 144);

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) капсулу не образуют;

е) неподвижны.

3.Культивирование:

а) посев на питательные среды: используют специальные среды, содержащие полноценный белок, холестерин, нуклеиновые кислоты, углеводы и факторы роста. К ним относятся, например, среда Эдварда (отвар сердца крупного рогатого скота, пептон, сыворотка лошади, дрожжевой экстракт) и др.;

б) особенности выделения возбудителя:

- факультативные анаэробы;

- оптимальная температура 37°С;

- срок культивирования от 3 до 7 суток.

в) культуральные свойства:

- на жидких средах – помутнение и мелкозернистый осадок;

- на плотных средах – мелкие, с уплотненным центром и нежным ажурным краем колонии (яичница «глазунья»);

Рис. 144. Возбудитель микоплазмоза из чистой агаровой культуры. Увеличение х900

г) биохимические свойства:

- весьма вариабельны;

- ферментируют углеводы;

- протеолитическими свойствами не обладают;

- некоторые виды разжижают желатин;

- вызывают гемолиз на кровяных средах.

4. Биопроба:

- заражают животных в зависимости от вида микоплазм: телят, ягнят, цыплят, куриные эмбрионы,

Б. Серологический метод:

- используют РА и РСК,

- при диагностике респираторного микоплазмоза птиц – реакцию капельной агглютинации с цельной кровью (ККРА) или сывороткой крови (СКРА).

В. Аллергический метод:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- разработаны живые и инактивированные вакцины, которые находятся в стадии изучения.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не применяются.

7. Химиотерапия:

- не чувствительны к пенициллину,

- используют препараты тетрациклинового и фторхинолонового ряда

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить под микроскопом готовые препараты микоплазм.

2. Изучить культуральные свойства микоплазм, выросших на плотной питательной среде.

3. Поставить РА на стекле капельным методом.

Тема 49. Возбудители риккетсиозов

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителей и методы микробиологической диагностики риккетсиозов.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации нужны таблица-схема микробиологической диагностики риккетсиозов, готовые фиксированные неокрашенные препараты риккетсий (вакцинный штамм) и окрашенные по Романовскому-Гимзе, риккетсионный антиген для РА.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические свойства риккетсий.

2. Культивирование на биологических моделях.

3. Методы микробиологической диагностики риккетсиозов.

1. Классификация возбудителя:

Сем.: Rickettsiaceae

Род: Rickettsia

Виды: R. burnetti – лихорадка Ку;

R. ovina – риккетсиоз овец;

R. ruminantium – сердечная водянка крупного рогатого скота;

R. canis – риккетсиоз (эрлихиоз) собак.

2. Общая характеристика болезни:

Лихорадка Ку – природно-очаговая инфекционная болезнь, которая у с.-х. животных протекает бессимптомно, при клиническом проявлении характеризуется кратковременной лихорадкой, пневмонией, конъюнктивами, абортами, маститами.

3. Восприимчивые животные:

- крупный рогатый скот и другие животные. Болеет так же и человек.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение происходит алиментарно, аэрогенно и трансмиссивно (через укусы клещей);

- внедряются в клетки тканей и органов лимфоидно-макрофагальной системы, кровь и лимфу; фагоцитированные риккетсии не лизируются (незавершенный фагоцитоз);

- факторы вирулентности – эндотоксины.

Методы диагностики (рис. 145):

Рис. 145. Схема лабораторной диагностики лихорадки Ку

А. Бактериологическая диагностика:

1. Материал для исследования:

- кусочки паренхиматозных органов, кровь, клещи, сыворотка крови (для серологических исследований).

2. Микроскопия:

а) методы окраски: по Здродовскому, по Граму;

б) микрокартина: полиморфны – кокковидные до 0,5 мкм, палочковидные – до 3-4 мкм, нитевидные – до 10-40 мкм;

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) капсулу не образуют;

е) неподвижны.

Окраска по Здродовскому:

1) разведенный фуксин – 5 мин;

2) промыть водой;

3) 0,5%-ный раствор лимонной кислоты – 1-3 с;

4) промыть водой;

5) 0,5%-ный раствор метиленовой сини – 10 с.

Риккетсии окрашиваются в красный цвет на голубом фоне.

3. Культивирование на биологических моделях:

Риккетсии являются строгими внутриклеточными паразитами, поэтому не растут на искусственных питательных средах. Для их выделения заражают биологические модели: куриные эмбрионы, культуры клеток, белых мышей, морских свинок (рис. 146, 147).

Б. Серологический метод:

- используют РСК, РДСК, РИФ, ИФА.

В. Аллергический метод:

- в ветеринарной практике не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- не разработаны.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не разработаны.

Рис. 146. Способы заражения куриного эмбриона: 1 - в амнион; 2 - в аллантоисную полость; 3 - в желточный мешок

Рис. 147. Вскрытие куриного эмбриона

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить морфологические свойства риккетсий, просматривая готовые, окрашенные по Романовскому-Гимзе препараты. Затем окрашивать готовые фиксированные препараты по методу Здродовского и микроскопировать.

2. Ставить РА с риккетсиозным антигеном на стекле.

3. Изучить лабораторные методы диагностики риккетсиозов.

Тема 50. Возбудители хламидиозов

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителя и методы микробиологической диагностики хламидиозов.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходима таблица-схема микробиологической диагностики хламидиозов, готовые фиксированные неокрашенные препараты хламидий (вакцинный штамм), окрашенные препараты по Маккиавеллу, вакцинный штамм возбудителя и эритроциты для постановки РГА.

1. Классификация возбудителя:

Сем.: Chlamydiaceae

Род: Chlamydia

Виды: 1. Ch. trachomatis (подгруппа А – возбудитель трахомы человека);

2. Ch. psittaci (подгруппа Б – возбудитель орнитоза и хламидийных абортов с.-х. животных)

2. Общая характеристика болезни:

1. Орнитоз (пситтакоз) – инфекционная болезнь, которая у птиц проявляется поражением желудочно-кишечного тракта, истощением, параличами конечностей и крыльев; у сельскохозяйственных животных (телята, свиньи); у человека – респираторного аппарата.

2. Хламидийный аборт – хроническая инфекционная болезнь крупного и мелкого рогатого скота, свиней, кобыл, характеризующаяся абортами, могут возникать пневмонии, энтериты, полиартриты, иногда происходит нарушение центральной нервной системы.

3. Восприимчивые животные

- все виды, включая птиц. Болеет и человек.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- основные пути заражения – аэрогенный, алиментарный и половой;

- при аэрогенном заражении развитие происходит в легких и регионарных лимфатических узлах, что приводит к нарушению целостности эпителия и кровеносных сосудов. Возбудитель далее проникает в кровь, паренхиматозные органы, кишечник, вызывая токсемию;

- хламидии при беременности размножаются в плаценте, вызывая плацентит и некрозы;

- основным фактором вирулентности у них является некротоксин.

Методы диагностики (рис. 148):

А. Микробиологическая диагностика:

1. Материал для исследования:

- на орнитоз: от птиц – кишечник, от млекопитающих – некротизированные участки легких, паренхиматозных органов и кишечник;

- на хламидийный аборт – абортированный плод, околоплодные оболочки, выделения из шейки матки и влагалища.

2. Микроскопия:

Источник: https://files.student-it.ru/previewfile/279395