Грипп или инфлюэнца - острое инфекц заб, характер поражением слиз оболочек верхн дых путей, лихорадкой, общей интоксикацией, нарушением деят серд-сосуд и нс. Грипп отличается склонностью к эпидемическому и пандемическому распростр благодаря высокой контагиозности и изменчивости возбудителя.
Характеристика возбуд. Возбуд - вирусы гриппа относится к сем. Orthomyxoviridae, родам Influenzavirus А, В и Influenzavirus С. Вирусы гриппа - это РНКвирусы.
Морфология. Вирусы гриппа имеют сферическую форму (форму шара) - 80 - 120 нм, реже имеют нитевидную форму. Состоят из: 1) сердцевина - нуклеокапсид спирального типа симметрии (однонитчатая линейная «-» - нить РНК + белковый капсид); 2) базальная мембрана - наружная липопротеидная оболочка - суперкапсид. На поверхности оболочки находятся гликопротеиды (в виде шипов и ворсинок) 2-х типов: 1) гемагглютинин - способствует прикреплению к рецепторам кл; 2) нейраминидаза — способствует освобождению вируса из клетки.
Культивирование. Для культивирования испол кур эмбрионы, первично трипсинизированные культуры кл, иногда лаб животных. Самой удобной моделью явл кур эмбрионы 10-12 -дневного возраста. Она позволяет получить большие кол-ва вируса, что необход при производстве вак и бакпрепаратов. Заражение производят в аллонтоисную полость, на хорион-аллонтоисную оболочку, в амниотическую полость, в амнион. Наличие вируса в кур эмбрионе выявляют в р-ции гемагглютинации. Антигенная структура. Вирусы имеют внутр антиген - S и поверхностные антигены: НА-гемагглютинин и NA-нейраминидаза. S-антиген - группоспецифич, общий для целого типа, по этому антигену вирусы гриппа делятся на типы А, В и С. Это комплементсвязывающий, стабильный (неизменяющийся) антиген. НА и NA-антигены - это специфич антигены. НА-антиген вызывает образование вируснейтрализующих антител и склеивание эритроцитов. NA-антиген вызывает образование антител, частично нейтрализующих вирусы.
Характерная черта этих антигенов — изменчивость (изменяются независимо друг от друга). Варьирование их структуры приводит к появлению новых серовариантов, часто во вр 1ой эпидемии. Выделяют 13 различных типов НА и 10 типов NA. Полная замена гемагглютинина или нейраминидазы приводит к возникновению нового антигенного варианта вируса - нового подтипа. В типе А выделяют 3 подтипа: подтип А1 – H1N1, подтип А2 -H2N2 и подтип А3- г. Подтип ai циркулирует с 1947 по 1957 г.г., подтип Аа- с 1957 по 1968 г.г., подтип аз -с 1968 по 1977 г.г. Изменчивость поверхностных антигенов обусловлена 2 генетическими процессами: дрейфом и шифтом. Дрейф - незначительные изменения антигенов (точечные мутации), не выводящие штамм за пределы подтипа, но сообщающие вирусу определенную степень антигенной новизны. Дрейф развивается в динамике эпидемического процесса и снижает специфичность иммунных р-ций, развившихся в популяции в результате предшествующей циркуляции возбуд. Шифт - полная замена того или иного антигена, в результате чего появл новый подтип. Шифт происходит в результате генетич рекомбинации между штаммами вируса чела и животных. Вирус типа В менее изменчив, а тип С отличается высокой стабильностью. Токсические св-ва. Токсическое действие вируса на орг (голов боль, мышеч боли, т, катаральные явления) обусловлено белками вируса (самой вирусной частицей). Это действие строго специфично и нейтрализуется только иммунной сывороткой соответствующего типа или подтипа или сывороткой переболевших.
Лабораторная диагностика.
Р-ция торможения гемагглютинации (РТГА)
Гемагглютинины вирусов склеивают эритроциты. Это св-во испл в р-ции геммагглютинации для индикации и титрования вирусов, что необходимо для последующей постановки РТГА.
Р-ция торможения гемагглютинации основана на блокаде антигенов вирусов (гликопротеиновых «шипов»-гемагглютининов) антителами иммун сыворотки, в результате чего вирусы теряют св-во агглютинировать эритроциты.
РТГА примен для диаг многих вирус инф, возбуд кот (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещ энцефалита) могут агглютинировать эритроциты различных животных.
Для этого испол микрометод РТГА в микропланшетах. При постановке р-ции испол разведения сыворотки крови, коммерческие диагностикумы вирусов гриппа и взвесь эритроцитов. Диагноз считается полож в случае 4хкратного увеличения титра антител в парных сыворотках, полученных с интервалом в 10-14 дней. Титр сыворотки в РТГА - это разведение сыворотки в последней лунке с полным торможением гемагглютинации.
Серодиагностика гриппа в РСК Тип р-ции: р-ция связывания комплемента • Исслед материал: сыворотка крови больного, поиск антител • Диагностич препараты: комплемент в рабочей дозе, гемолитич сыворотка в рабочей дозе, стандартные вирусы гриппа с известной антигенной структурой, эритроциты барана. Эритроциты и гемолитич сыворотка входят в гемолитич сис-му • Дополнительно указать: титр, механизм РСК • Примечание: нарастание титра Ат не может происходить одновр к вирусам гриппа А и В, поэтому к интерпретации реакции необходимо отнестись критично
Исслед материал: мазки-отпечатки со слиз носовой полости, отделяемое носоглотки, кусочки легких, мозга при летальных исходах. Методы диаг: 1) метод циториноскопии - обнаружение внутриклет включений, специфич для вируса - при окраске пиоктанином под микроскопом видны ярко-красные включения вируса гриппа в кл ресничного эпителия; 2) вирусологич метод - выделение вируса гриппа из орг чела путем заражения куриных эмбрионов смывом из носоглотки больного; индикацию (присутствие) вируса проводят при помощи РГА (вирусы гриппа агглютинируют эритроциты чела и различных животных), идентификацию вируса проводят поэтапно: тип определяют в РСК, подтип гемагглютинина - в РТГА, а подтип нейраминидазы - в р-ции ингибирования активности фермента; 3) серологич метод - обнаружение нарастания титра (в 4 раза) специфич антител в сыворотке крови больного с помощью РСК, РТГА, РН в культуре кл, р-ции преципитации в геле, ИФА; 4) биологич метод - интраназальное заражение мышей - введение материала в легкие под эфирным наркозом; мыши погибают через 2 — 3 дня в результате пневмонии; 5)экспересс-диаг - выявление вирусного антигена с помощью РИФ.
Лечение и проф. Для проф и лечения в 1ые дни болезни применяют человеч лейкоцитарный интерферон (интраназально). В лечебных целях испол противовир препараты - ремантадин (грипп типа А), адапромин, виразол и иммуномодулирующие препараты - дибазол, продигиозан, левомизол. При тяжелом течении гриппа, особенно у детей, применяют донорский противогриппозный иммуноглобулин, а также препараты - ингибиторы клет протеаз (гордокс, контрикал, аминокапроновая к-та). Спецпроф. Испол перечисленные противовирусные препараты и иммуномодуляторы, а также вак - живые и инактивированные: 1) живые моновакцины для перорального применения – аттенуированные штаммы вирусов, циркулирующих в наст вр (А1, А3 и В); проявл наиб иммуногенность; 2) цельновирионные вак из вирулентных штаммов, инактивир формальдегидом или УФ-лучами; 3) субъединичные гриппозные вак только из поверхностных антигенов - НА и NAантигенов (обладают минимальной реактогенностью). Для получения вак вирусы культивируют в кур эмбрионах и на культуре кл кур эмбрионов. При введении вак формируется местный и гуморал иммунитет. Вакцинацию осущ в периоды наибольшего риска развития эпидемий. Она в большей степени показана лицам младшего и преклонного возраста. Примен убитых вак требует ежегодной ревакцинации; их эффективность не превышает 60 - 70%. Т.к. часто наблюдаются антигенные вариации возбуд, то набор антигенов соответствующ вируса для иммунизации может быть определен только после начала вспышки заболевания.
Способность вируса гриппа к антиген изменчивости опред высокую восприимчивость населения и основ эпидемиолог особенности этой инф: повсеместное распростр, кор интервалы между эпидемиями (1 – 2 г для гриппа типа A и 2 – 4 – для гриппа типа В) и вовлечение в эпидемич процесс всех возрастных гр населения.
Внутр структуры вируса экранизированы от действия внеш среды и не изменяются. Изменчивость присуща антигенам суперкапсида, причем гемагглютинины и нейраминидаза изменяются независимо друг от друга благодаря 2 генетич механизмам – дрейфу и шифту. Антигенный дрейф(от англ слова дрейф –медленное теч) вызывает незначит изменения , обусловленные точечной мутацией, причем в большей степени происходит изменение структуры гемагглютинина. Это приводит к развитию штаммовых различий. В результате антигенного дрейфа могут возникать эпидемии (через 3-4- г). Шифт– (от англ слова сдвиг, скачок) – это полная замена гена, кот приводит к появл нового антигенного варианта вируса. Полагают, что шифт – это результат генетич рекомбинации, т.е.обмена генетич ин-ции между вирусами чела и животных, кот приводит к смене подтипа НА илиNА (а иногда – обоих). Такая изменчивость может привести к появл новых вариантов вирусов, способных вызывать пандемию.
Вирусы гриппа В и С лишены штифтовой изменчивости, поэтому вирусы Гриппа В редко вызывают эпидемии, а вирусы гриппа С обладают еще меньшей изменчивостью и вызывают спорадические заб или небольшие вспышки.
Для диаг гриппа испол след методы: - экспресс-методы обнаружения вируса; - выделение вирусов гриппа и их идентификация; - методы серологической диагностики.
В кач-ве экспресс-методов диаг гриппа испол РИФ, ИФА и ПЦР. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) или метод флюоресцирующих антител (МФА) позволяет обнаружить антигены вируса гриппа через 2-3 ч после отбора исслед материала. Для этого готовят препараты на стекле и обрабатывают их гипериммунными, люминесцентными сыворотками.
Микроскопирование проводят c помощью люминесцентного микроскопа.
Пораженные вирусом кл обладают специфическим свечением.
Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет обнаружить в исслед материале Родоспецифический антиген вирусов гриппа B. (рибонуклеопротеин) с помощью тест-систем, содержащих моноклональные антитела к рибонуклеопротеину (РНП) соответствующих вирусов. Моноклональные антитела сорбируют в лунках планшетов, после чего к ним последовательно добавляют исслед материал, конъюгат (антитела к РНП, меченые пероксидазой) и субстрат (смесь перекиси водорода с ортофенилендиамином). + результат проявл желтой окраской содержимого лунок. Интенсивность окраски измеряется с помощью спектрофотометров (ридеров). С помощью ИФА можно выявлять не только вирусный антиген, но и противовирусные антитела в сыворотке крови.
Полимеразная цепная р-ция (ПЦР) позволяет выявлять в исслед материале генетич последовательности вирусов гриппа и идентифицировать их методом электрофореза.
Выделен вирусов гриппа и их идентификация (вирусологич метод) проводится с испол кур эмбрионов или клет культур.
При испол 9-11-дневных куриных эмбрионов заражение проводят в амниотическую или аллантоисную полости. Из клет культур испол первич культуру кл почек обезьян, клетки почек собак и др.
Индикацию вирусов в амниотической или аллантоисной жидкости кур эмбрионов проводят с помощью р-ции гемагглютинации с эритроцитами морской свинки или чела. Индикацию вирусов в культуре кл осущ по цитопатическому д-вию (ЦПД), образованию "бляшек", "цветной пробе", р-ции гемагглютинации (РГА) и гемадсорбции. Идентификацию вирусов проводят по антигенной структуре. Чаще всего тип вирусов гриппа определяют в РСК, а подтип вируса - в РТГА.
Серологич диаг гриппа основывается на выявлении возрастания титра противовирусных антител в сыворотке крови в динамике заб. Для этого испол микрометод РТГА в микропланшетах. При постановке р-ции испол разведения сыворотки крови, коммерческие диагностикумы вирусов гриппа и взвесь эритроцитов. Диагноз считается + в случае 4хкратного увеличения титра антител в парных сыворотках, полученных с интервалом в 10-14 дней. Кроме РТГА для серологической диагностики используют также ИФА
Препараты для специфич леч гриппа: римантадин, амантадин, донорский нормальный Ig с высоким содержанием противогриппозных антител.
Специфич плановая проф состоит в применении вак. Вакцинацию проводят не менее чем за 1 мес до нач эпид сезона (сен-окт), чтобы успел сформироваться активный иммунитет. Вакцинация рекомендована прежде всего детям, лицам из гр высокого риска, персоналу лечеб учреждений и т.п разработано несколько разновидностей вак для проф гриппа а и б, приготовлен на основе штаммов, прогностически «актуальных» в данный эпид сезон, кот обновляются 1 раз в 2-3 года. В наст вр в россии для проф гриппа разрешены к применению живые вак, инактивированные цельновирионные вак, хим (в т ч полимер-субьединичная) и сплит-вак.
ПАРАГРИПП относится к острым респираторным вирус инф. Заб характ поражением верх дых путей и умеренной интоксикацией. Таксономическое положение. Возбуд парагриппа чела явл вирусы, относящиеся к сем Paramyxoviridae, роду Respirovirus (серотипы HPIV-1 и HPIV-3) и роду Rubulavirus (серотипы HPIV-2, HPIV-4). Заб у людей вызывают вирусы парагриппа серотипов 1, 2 и 3, причем основным патогеном для чела явл вирус парагриппа серотипа 3.
Структура вируса. Вирион имеет сферическую форму диаметром 150 нм. Геном вирусов парагриппа чела представлен одноцепочечной нефрагментированной молекулой минус-РНК. Геном вирусов рода Respirovirus и кодируемые им структурные белки. Геном вируса парагриппа покрыт нуклеопротеином, образуя нуклеокапсид спирального типа симметрии. Нуклеопротеин связан с фосфопротеином Р и белком L. Фосфопротеин Р и белок L явл составными частями РНК-зависимой РНКполимеразы. Снаружи вирусная частица имеет наружную оболочку (липидный бислой) со встроенными гликопротеиновыми шипами, образованными гемагглютинином-нейраминидазой HN и белком слияния F. Под наружной суперкапсидной оболочкой располагается матриксный белок М.
Патогенез. Вход воротами инф явл слиз оболочки верх дых путей (глотки и гортани). Вирус после адсорбции проникает в эпителиал кл респираторного тракта, размножается в них, вызывает гибель кл и воспаление. В течение непродолжит вр отмечается вирусемия. Продукты распада кл обусловливают интоксикацию орг. Заб может сопровождаться бактериал осложнениями. Клиника. Инкубац период при парагриппе составляет от 1до 6 дней. При парагриппе поражается гортань (ларингит, ларинготрахеит), бронхи (бронхит), слиз оболочка носа (ринит). Заб сопровождается повыш т тела до 38ОС, слабостью, насморком, першением или болью в горле, кашлем. Продолжит болезни составляет 5-7 дней. Кашель может сохр до 2 недель и более. Иммунитет. После перенесенного заб развивается непрочный и непродолжит типоспецифич иммунитет. Возможны повтор заболевания.
КОРЬ. - острое высококонтагиозное заб, характ лихорадкой, катаральными явлениями и сыпью, поражением слиз оболочкой глаз; встречается, в основном, у детей. Характ возбуд. Вирус кори - это РНК-вирус, относится к сем. Paramyxoviridae, роду Morbillivirus. Морфология. Имеет круглую форму (120-130 нм), 2 оболочки: капсид (белки) и суперкапсид (углеводы и липиды).
Структура вируса. Морфология вируса кори типична для парамиксовирусов: вирион сферической формы, диаметр вириона составляет 150-250 нм, снаружи вирион покрыт липопротеиновым суперкапсидом с шипами длиной до 8 нм. Геном вируса кори предст собой одноцепочечную нефрагментированную молекулу минус-РНК. В геноме вируса закодирована информация о 6 структурных белках: N, P, M, F, H и L. Снаружи вирусная частица имеет суперкапсид – липидный бислой. В состав суперкапсида вкл белки Н (гемагглютинин) и F (белок слияния), образующие на поверхности оболочки шипы. Изнутри к суперкапсиду прилегает матриксный белок М. В центре вирусной частицы располагается нуклеокапсид спирального типа симметрии. В состав нуклеокапсида входит нуклеопротеин (белок N), фосфопротеин (Р-белок) и L-белок. Белки Р и L ассоциированы с РНК-зависимой РНКполимеразой. Вирус кори обладает гемагглютинирующей и гемолитической активностью. Нейраминидаза отсутствует.
Патогенез и клиника. Вход ворота - слиз оболочка верх дых путей. Первоначально вирусы размножаются в эпителии верхних отделов дых путей и регионарных лимфоузлах, а затем поступают в кровь. Вирусемия носит кратковр характер и развивается на 3-5ые сутки инкубац периода. Вирус распространяется с кровью по орг и фиксируется в кл ретикулоэндотелиальной сис-мы. Гибель инфицир кл приводит к развитию 2ой волны вирусемии (вторич вирусемия). Циркуляция вируса в крови обусловливает повреждение стенок сосудов, в результате чего появляется сыпь, отек тк и некротические изменения в них. Инкубац период - 8 - 13 д. Продромальный период протекает по типу острого респираторного заб: повыш т, катаральные явления, светобоязнь. Затем на слиз оболочках и коже появл сыпь, кот распростр сверху вниз (лицо, шея, туловище, конечности). Сыпь вначале мелкопятнистая, быстро превращается в крупнопятнистую, обильную, местами сливную. Сыпь сильно обезображивает лицо, придавая ему «корявый» вид. С момента появления сыпи т снижается и самочувствие улучшается. Меньше становится кашель, катаральные явления. Если не присоед осложнения, то через несколько дней наступает выздоровление. Заб длится 7 - 9 д. Сыпь исчезает в том же порядке (появл мелкое отрубевидное шелушение). В не осложненных формах корь имеет легкое течение, но часто связана со вторич инф, что приводит к развитию осложнений и к высокой смертности. Осложнения: бронхиты, пневмонии, перикардиты, отиты, менингиты, коревые колиты. В редких случаях - острый энцефалит и подострый панэнцефалит - постепенное поражение ЦНС, чаще у детей 5-7 лет, перенесших корь, заканчивающееся смертью. В развитии осложнений большое значение имеет способность вируса кори подавлять активность Т-лимфоцитов и вызывать ослабление иммунных реакций.
Иммунитет. После перенесенного заб остается прочный, пожизненный иммунитет, обусловленный наличием антител. Сыворотка переболевших людей в течение многих лет способна нейтрализовать вирус кори. Пассивный иммунитет у детей сохраняется 6 мес.
Специф проф. кори проводят с помощью живых коревых вак из аттенуированных штаммов или ассоциированных вак (против кори, паротита, краснухи) в соответствии с календарем профилактич прививок. Вакцинация детей проводится в возрасте 1 года, ревакцинация - в возрасте 15-18 мес. В Р Ф разрешены к применению след вак против кори: - вак живая коревая культуральная сухая (Россия); - живая вак против кори Rouvax (Франция); - живая вак против кори, паротита и краснухи M-M-R-II (Нидерланды); - живая вак против кори, паротита и краснухи Priorix (Бельгия).
КРАСНУХА. Сем — Togaviridae Род — Rubivirus вид — возбуд краснухи (Rubella virus).
Вирион (вирусная частица) возбуд предст форму сферы. Генетич материал выполнен одноцепочечной РНК, покрытой капсидом и внеш липидным контуром, на поверхности кот локализуются шипы (при их помощи вирус прикрепляется к кл). В структуре вируса различают 3 белка: С, Е1 и Е2. Е1 (гемагглютинин) и Е2 (протективный антиген) — гликопротеины (или шипы), локализующиеся во внеш покрове вириона. Имеют единый серотип.
Вирус способен разрушать и склеивать человеч эритроциты (гемолитич св-ва), благодаря наличию нейраминидазы поражает нервную ткань.
Очень нестоек в окр среде: восприимчив к уф излучению, при подсушивании и воздействии дезинфектантов (ср-в против микроорг) погибает мгновенно. Неплохо сохр при пониженных т. Возможна культивация вируса на культурах клеток
Сугубо антропоноз. Ист инф — заражённый чел (не искл больного с атипичной формой краснухи). Инфицир заразен от последней нед инкубации и до 1ой нед после появл сыпи. Выделение заражающих вирионов у детей с врожденной краснушной инф (синдром врождённой краснухи — СВК) возможно до 2х л. Наиб высокий ур риска СВК представляется в тех районах, где у молодых женщин нет коллективного иммунитета к данному заб (после вакцинации или ранее перенесённой краснухи). До того, как в обиход ввели прививки от вируса краснухи, примерно 4 новорождённых ребёнка из тысячи рождались с СВК. Сезонный характер заб — весенне-зимний. После перенесения инф и прохождения полного курса вакцинации возникает стойкий пожизненный иммунитет (в некот случаях после прививок требуется ревакцинация во взрослом возрасте, что особенно актуально у женщин детородного возраста, которые не болели краснухой).
В основном краснухой болеют дети, кот переносят заб сравнительно благоприятно, и подростки. Сейчас же это заб зачастую возникает и у взрослых. Причина тому — отказ бол-ва людей от проф краснухи (вакцинац).
Общие симптомы краснухи.Нач заб характ лёгким недомоганием, терпимыми голов болями, лёгким ознобом, болями в суставах и мыш, наруш сна (бессонницей), ухудш аппетита. Т тела зачастую субфебрильная (37,-38).
Симптомы краснухи со стороны органов дыхания и глаз. Наступает першение в горле, лёгкий сухой кашель, заложенность носа/насморк, светобоязнь, покраснение глаз.
Сыпь. В конце 1го дня на кожных покровах появл высыпание, с приходом кот значимо возрастает выраженность общеинфекц синдрома и воспалит процесса слизистых оболочек.
Во время осмотра обнаруживаются небольшие пятнышки, появляющ повсеместно (кроме подошв и ладоней). У взрослых пац они м б макуло-папулёзными. К признакам краснухи также относят бледно-розовую сыпь со сгущением в обл лица в виде «бабочки» и в плечевом поясе, иногда в районе локтевых сгибов — симптом Пастиа (при этом цвет кожи остаётся неизменным). Часто чел, больной краснухой имеет вид «ошпаренного кипятком». Угасание сыпи происходит за 3-4 дня без шелушения и пигментации.
Сыпь на нёбе. Во вр провед фарингоскопии можно отметить умеренную гиперемию слиз оболочки ротоглотки (покраснение вследствие притока крови), на слиз оболочке мягкого нёба м б обнаружена энантема — небольшие пятнышки, имеющие бледно-розовый окрас (пятна Форхгеймера).
Поражение лимфатич узлов, селезёнки и печени. Гр затылочных, заднешейных и околоушных (регионарных) лимфоузлов увеличены, слабо болезненны. Иногда выявляется укрупнение селезёнки и печени.
Специф проф: живые и убитые вак, ассоциированные вак (против кори, паротита, краснухи). Вакцинация девочек 12-14 лет и женщин детородного возраста при отсут у них антител против возбуд краснухи. Вак не вводить беременным. Избегать беременности в теч 3 мес после введ живой вак