Материал: Zanyatie_36_Itog_po_razdelu

Лаб диаг. Иссл кровь, спинномозговую жидкость, пунктаты лимфатич узлов, остатки плодных оболочек, трупный, биопсийный материал.

1. Микроскопич метод. Микроскопируют мазки и срезы из исслед материала, окрашенные по Романовскому-Гимзе.

2. Биологич метод. а) клинич материалом от больного заражают животных (мышей, хомяков, кроликов) внутрибрюшинно или интрацеребрально. В образующемся экссудате и в ЦНС этих животных выявляют большое кол-во паразитов, их цист и псевдоцист. б) биоптатом или биологическими жидкостями от больного заражают 7-8-суточные куриные эмбрионы или культуры клеток (HeLa).

3. Серологич метод. Выявляют антитела к токсоплазмам с помощью РСК, РПГА, РИФ, ИФА, латекс-агглютинации в сыворотке больного. Испол высокоспецифичную и чувствительную пробу Сейбина-Фельдмана. Механизм ее состоит в том, что специфич антитела к токсоплазмам модифицируют клет мембрану токсоплазм и живые токсоплазмы не окрашиваются метиленовым синим после их совместной инкубации с сывороткой больного. При отсутствии же антител в сыворотке токсоплазмы окрашиваются в синий цвет.

4. Аллергич метод – кожная проба с токсоплазмином – наиб доступный способ диаг. Проба полож с 4 нед заб и сохр в течение многих л. Полож результат свидетельствует лишь о заражении в прошлом и указывает на необходимость тщательного обследования. Лечение. Препараты выбора – сульфаниламиды и пириметамин, применяемые комбинированно. Применяют и др препараты: хлоридин+сульфадимезин или делагил + тетрациклин, хингамин. При хронич формах обязательно проводится курс специфич иммунотерапии токсоплазмином.

Проф. Для предупреждения заб проводятся ветеринарно-санитарные мероприятия, уничтожение диких грызунов, больных кошек. Необходимо соблюдать гигиенич требования: полноценная термическая обработка мяса, употребление в пищу вымытых овощей, зелени, фруктов, мытье рук перед едой. Спец проф нет.

ЛЕЙШМАНИОЗ

Лейшманиозы — инф, вызываемые лейшманиями — простейшими, относящимися к сем Trypanosomatidae. Чел заражается лейшманиозами через укус москитов, В наст вр известно 3 гр леншманиозов чела. В восточном полушарии кожный лейшманиоз представлен несколькими разновидностями, из кот 2 известны в Среднеазиатских республиках СССР: городской тип, вызываемый L. tropica minor, и сельский тип — возбуд L. tropica major; в западном — форма, вызываемая L. tropica mexicana. Кожно-слиз американский лейшманиоз. Соответственно различают неск разновидностей возбуд. Внутр, висцеральный, лейшманиоз. В ряде стран встречается лейшманиоз собак, протекающий как генерализован инф, часто со специфич поражением кожи.

Биология паразита. Лейшманиальные формы имеют овальную или круглую форму размером 3—5x1—3 u с круглым или овальным ядром размером 0,7-0,8u. Помимо ядра, в цитоплазме паразита имеется более мелкое образование — кинетопласт — округлой формы или в виде палочки, иногда слегка изогнутой. Цитоплазма по Романовскому окрашивается в голубой или слегка сиреневый цвет, ядро —в красно-фиолетовый, кинетопласт — несколько темнее, чем ядро.

Лейшмании — внутриклет паразиты, размножающиеся в свободных макрофагах и гнстофагоцитных (ретикуло-эндотелиальных) кл. Число лейшманий в кл может достигать нескольких десятков. При разрыве клетки, спонтанном или механическом (при приготовлении препарата), паразиты освобождаются и лежат вне кл. Лейшмании размножаются простым делением надвое: сначала делится кинетопласт, затем ядро, после этого цитоплазма.

Лептомонадная форма подвижная стадия паразита со жгутом, имеет удлиненную, веретеновидиуга форму, длина 10 —20 u, ширина 5-6 u. Задний конец лептомонад часто слегка закруглен; передний, от кот отходит жгут, заострен. Жгут длиной 15—20 u; он берет начало у кинетопласта, находящегося вблизи от переднего конца тела паразита. У части лептомонад в цитоплазме обнаруживаются валютиновые гранулы. Часть лептомонад в культурах, особенно старых, принимает лейшманиевидную форму. Получены также культуры на курином эмбрионе и па культуре ткани. Переносчиками возбуд при лейшман позах явл москиты —мелкие кровососущие насекомые, относящиеся к роду Phlebotomus, семейству Phlebotomidae. Москиты заражаются лейшманиями, питаясь на зараженных людях I животных. Когда зараженный москит пьет кровь на людях или на животных, лептомонады из глотки попадают через хоботок в ранку и затем внедряются в клетки и там превращаются в лейшманиальные формы.

11. Характеристика патогенных микоплазм

Микоплазмы – это бак, кот относятся к отд. Tenericutes, классу Mollicutes (мягкокожие). Это самые мелкие грам"-" бак (0,3-0,9 мкм). Главная черта– отсут клет стенки. Кл окружены только ЦПМ, поэтому они имеют разнообразную форму: кокки, палочки, колбовидные, грушевидные или нитевидные (до 150 мкм). Снаружи ЦПМ – капсулоподобный слой, в цитоплазме – нуклеоид, рибосомы, мезосомы. Спор не образуют. Бол-во микоплазм неподвижны, но у некот имеются структуры, кот приписывают ф-цию движения. На плотн среде образуют колонии, напоминающие яичницу (непрозрачная центр часть окружена просвечивающимся периферич кругом). Микоплазм обнаруживают в живом состоянии при фазово-контрастной микроскопии и путем электронной микроскопии. Вызывают заб у чела по типу острой респираторной инфекции (Mycoplasma pneumonia). Лаб диагностика респираторного микоплазмоза основана на прямых методах выявления микоплазм и серологических реакциях определения специфических антител. Проводят серологическое исследование на M. pneumoniae (на специфические антитела IgM, IgG и IgA). Антитела класса IgM являются индикатором первичного инфицирования.

Это антропонозные бактериал инф, вызыв микоплазмами, по­ражающими, в зависимости от вида возбу­д, органы дыхания или мочепол тракт и редко др органы. Они занимают промежуточное положение между вирусами и бак, т к имеют черты, присущие данным гр микроорг.

Отличия микоплазм от других прокариот: 1.Главная особенность микоплазм — отсут клет стенки;

2.3хслойная цитоплазматич мембрана толщиной 7,5–10 нм, содерж в значит кол-ве холестерин, стабилизирующий мембрану микоплазм; сами микоплазмы неспособны к синтезу стеринов и для роста нуждаются в них; 3.Минимальное кол-во органелл (нуклеоид и рибосомы);

4.Малый размер генома, наименьший у прокариотов; 5.Вследствие малого генома микоплазмы обладают огранич биосинтетич способностями, и их приходится длит культивировать на сложных бесклет пит средах, обогащенных липидами, белками, предшественниками нуклеин к-т.

Морфология Бол-во из них – факультативные анаэробы. Т к микоплазмы не имеют ригидной оболочки, они очень полиморфны. В мазках из культур обна­руживаются различные микроструктуры: грану­лы, в виде крошечных кокков и элементарных телец; крупные шары; кольца; палочки, нити и ветвящиеся мицелиальные формы; аморфные массы, меняющиеся в конфигурации. Размеры микоплазм варьируют от 125–250 нм у мелких гранулярных форм до 0,4 –150 мкм у нитевидных структур. Микоплазмы не образуют жгутиков, капсул и спор.

Патогенные представители родов Mycoplasma и Ureaplasma

Микоплазмы – самые мелкие прокариоты (125-150 нм) способные самостоят размножаться. Глав особен микоп – отсут клет стенки. Они окружены капсулоподобным слоем, под кот находится лишь тонкая 3хслойная мембрана толщиной 7,5- 10 нм, содержащая в значит кол-ве холестерин. Для микоплазм характерна уникальная для прокариот потребность в стеролах (холестерине). Холестерин стабилизирует мембрану микоплазм.

12. Характеристика риккетсий

Возбудитель - Rickettsia prowazekii (риккетсии Провацека), относится к роду Rickettsia, семейству Rickettsiaceae, отдел Gracilicutes

Риккетсии занимают промежуточное положение между бактериями и вирусами.

Сходство с бактериями: · строение клет стенки; · наличие ДНК и РНК; · размножение бинарным делением (удваиваются только через 8-12 часов).

Сходство с вирусами: · высокое содержание липидов и низкое –углеводов; · облигатные внутриклет паразиты.

Возбуд сыпного тифа: Семейство: Rickettsiaceae Род: Rickettsia Вид: R.prowazekii, R. Typhi, R. Rickettsii (лихорадка скалистых гор), R. Conorii, R. Sihirica и др.

Морфология: Форма: полиморфные мелкие неподвижные палочки или сферические кл, располож одиночно

Споры – , Капсула микро, Жгутики –

Окраска по Граму –, по Здоровскому (риккетсии окрашиваются в ярко-розовый или рубиново-красный цвет, цитоплазма кл — в голубой цвет, ядра — в синий цвет.), по Романовскому-Гимзе

Морфология.Риккетсии сыпного тифа - это полиморфные бактерии. Выделяют 4 морфологические группы

1) кокки - мелкие зернистые кл овоидной формы; характерны для интенсивного размножения возбудителя;

2} короткие палочки, имеющие 2 зерна по полюсам; характерны для интенсивного размножения возбудителя; 3) длинные палочки (3-4мкм), имеющие 2 или 4 зернышка попарно расположенные по полюсам; характерны для более медленного размножения;

4) нитевидные многозернистые формы (своеобразный «мицелий»); характерны для фазы замедленного роста. Риккетсии - это облигатные внутриклет паразиты, кот способны размножаться только внутри живых кл, испол их ферментные сис-мы. Размножаются риккетсий так же, как и др бак, - путем поперечного деления клетки. Строение риккетсий также аналогично строению др бак. Имеют оболочку, протоплазму, зернистые включения, ДНК и РНК. Для дифференциации различных видов риккетсий учитывают способность размножаться в цитоплазме и/или ядре. Риккетсии Провацека размножаются только в цитоплазме.

Тинкториальные св-ва; грам"-", по Романовскому - Гимзе окрашиваются в красный цвет. Культуральные и биохим св-ва. Имеют аэробный тип дыхания (поглощают О2 и выделяют СО2). В процессе дыхания кл активно расщепляют глутаминовую к-ту и не расщепляют глюкозу. Т.к. риккетсии явл облигатными внутриклет паразитами, они не способны размножаться на бесклеточных средах и мертвых тканевых субстратах. Хорошо размножаются в живых тк с пониженным метаболизмом. Применяют след методы культивирования: 1) в желточном мешке куриного эмбриона; 2) в тканевых культурах (фибробласты куриных эмбрионов или стационарные линии, н, клетки McCoy); 3) в организме лаб животных - заражают интранозально белых мышей, в легких которых накапливается большое количество риккетсий. Температурный оптимум для выращивания 32-35°С, рост угнетается при 40°С; быстро погибают при 56°С. Ускоренные методы: на платяных вшах, кот заражают путем введения в кишку взвеси риккетсий при помощи спец капилляров, или на личинках вшей, кот кормят дефибрированной кровью с риккетсиями через мембрану кожи трупа. Культивирование используют для получения вакцины и риккетсиозного антигена.

Антигенная структура. Имеют 2 основные антигена: 1) поверхностный термостабильный липополисахарид -растворимый групповой антиген, обладает сходством с антигенами протея ОХ19, ОХк и ОХ2; 2) соматический термолабильный белковополисахаридный антиген - нерастворимый (корпускулярный) видоспецифический антиген. Для постановки серологич р-ций испол и корпускулярные и растворимые антигены. Токсинообразование. Образуют токсические в-ва, кот играют важную роль в патогенезе риккетсиозов. Токсины повреждают кл эндотелия сосудов, повышают проницаемость капилляров, обладают гемолитическими св-вами. Токсины - это термолабильные белки, кот разрушаются при гибели кл, Т.о. по своей природе они, как и экзотоксины, явл белками. Но от экзотоксина их отличает неотделимость от микробных кл и чрезвычайная неустойчивость. Токсическими св-вами обладает только живая взвесь риккетсий. В то же вр они не являются и эндотоксином, т.к. имеют белковую природу и неустойчивы к действию формалина. Под влиянием формалина происходит детоксикация риккетсий без потери антигенных свойств. Peзистентность во внеш среде низкая. Риккетсии Провацека быстро погибают к окр среде. Они чувствительны к действию высоких т, дез. В-в. Высоко чувствительны к а/б тетрациклинового ряда и левомицетину. Однако риккетсий хорошо сохр при низких т (консервируются при т - 20°С;- 70°С). Долго сохр в высушенном состоянии и сухих фекалиях вшей - 1-3 года. Лиофилизация обеспечивает неопределенно долгое сохранение. Резистентны к сульфаниламидам и некоторым а/б. Эпидемиология. Ист инфекции — больной человек (антропонозное заб). Путь передачи - трансмиссивный. Специфич переносчик - платяная вошь. Вши заражаются при сосании крови больною чела Риккетсии размножатся в кл эпителия желудка и кишечника и выделяются в просвет кишечника (на 5-ый день заражения риккетсии появляются в фекалиях вшей). В слюнных железах, в сосательном аппарате вшей риккетсии отсут, поэтому с укусом не передаются. При укусе вши испражняются, укус сопровождается зудом, при расчесывании места укуса чел втирает в него фекалии вшей, содержащие риккетсий, и, т.о. заражается. Др путей заражения нет. Т.о. возникновение и распростр сыпного тифа связано с вшивостью (педикулезом). Сыпной тиф распространен повсеместно. В отличие от др риккетсиозов не имеет истинных эндемичных очагов, но имеет некоторую «эндемичность» для стран Магриба, юга Африки, Центр и Южной Америки, некот азиатских регионов. Чаще регистрируется весной и летом Входные ворота - ранка от укуса вшей. Риккетсии попадают и кровь и проникают в кл эндотелия, который выстилает кровеносные сосуды. Возбуд размножается внутри кл и образует эндотоксин. Под действием токсина кл эндотелия разрушаются, риккетсии вновь попадают в кровь и заражают новые кл. В результате истончаются стенки сосудов и повышается их проницаемость, что приводит к выходу плазмы в тк, уменьшению объема крови. Процесс может захватить всю толщу сосудистой стенки с ее круговым некрозом, что приводит к образованию тромба, закупорке сосуда и нарушению кровообращения (гемодинамики). Преимущественно поражаются мелкие сосуды - капилляры (вокруг пораженных сосудов формируются гранулемы), что ведет к нарушению микроциркуляции и различных органах и тк: головном мозге, миокарде, почках и других органах, в результате чего развиваются менингоэнцефалит, миокардит и гломерулонефрит. В орг больных риккетсии могут длительно сохраняться в гранулемах и после выздоровления, что служит причиной появления рецидивных форм сыпного гифа - болезни Бриля. Инкубационный период - 12-14 дней. Заб начинается с повышения т (за пике заб 40-41°С), мучительной головной боли, сопровождается бессонницей, мышечными болями, возбуждением. На 4-5 день появляется специфическая сыпь петехиального характера вследствие расширения и повреждения капилляров кожи. У больных отмечается гиперемия кожи лица, шеи, верхней части грудной клетки, красные «кроличьи» глаза. Присоединяются поражения ЦНС (бред, галлюцинации), сердечнососудистой сис-мы, надпочечников. Различают легкое и различной степени тяжести течение болезни. Заб длится около 21 дня. При тяжелых формах может наступить смерть в результате поражения надпочечников, нервной и сердечно-сосудистой сис-ем. Для болезни Бриля характерно более легкое течение, стертая клинис картина, трудность выделения возбуд из крови, определенные особенности серодиагностики. Заб регистрируется среди населения, подвергавшегося в прошлом эпидемии сытимо тифа.

Для диаг микоплазмозов и уреаплазмозов испол культуральный, серологич и молекулярно-биолог методы.

Культуральный (бактериологич) метод. Для культивирования микоплазм испол жидкие и плотные селективные пит среды, обогащенные лошадиной сывороткой, экстрактом дрожжей, мочевиной, L-цистеином. Для подавления роста посторонней микрофлоры в среды добавляют пенициллин. Микоплазмы растут в аэробных условиях при 37ОС. Для культивирования испол среду IST. Культуральное исслед явл “золотым стандартом” диаг микоплазмоза. Точность диаг составляет 100%. Обнаружение микоплазм и уреаплазм в исслед материале более 104 КОЕ/мл (г) свидетельствует о заб. Ускоренный бактериологич метод для выявления генитальных микоплазм и уреаплазм основан на способности микоплазм расщеплять аргинин, а уреаплазм - мочевину с образованием щелочи.

Серологич методы. 1м из методов диаг явл исслед мазков-отпечатков в РИФ (р-ция непрямой иммунофлюоресценции). При этом микоплазмы и уреаплазмы окрашиваются в 14 ярко-зеленый цвет на поверхности кл, а цитоплазма эукариотических кл – в красно-бурый цвет. Иммуноферментный анализ (ИФА) направлен на выявл антител классов IgA, IgM и IgG к микоплазме и уреаплазме. При первич инфицировании сначала образуются антитела классов М и А, а затем класса G. При повторном инфицировании быстро нарастают титры антител классов G и А; возможно отсут антител класса М. Молекулярно-биологич метод. Для диаг микоплазмозов наиболее широкое распростр в лаб практике получил метод ПЦР с праймерами на гены 23S и 16S рРНК микоплазм.

Лечение. Для леч микоплазмозов испол а/б (макролиды, хинолоны). При назначении леч микоплазменной инфекции выбор а/б производят с учетом клинич формы, тяжести заб, наличия осложнений, беременности. А/б назначают с учетом чувствительности к ним возбуд. Антибиотикотерапию назначают в случае выявления облигатно патогенного вида – M. genitalium. Для условно-патогенных микоплазм диагностически значимым явл выявление возбуд в концентрации 104 и более микробных клеток в 1 мл материала.

Диаг осущ на основании эпидемиологич данных и результатов серологических методов исслед. Выделение возбуд не проводят из-за сложности культивирования риккетсий. При необходимости выделение возбуд проводят только в специализированных риккетсиологических лаб. Основными методами диаг явл серологич (РСК, РНГА, ИФА и др.). При испол РСК диагностически значимым считают титр 1:160. Полож результат в РНГА получают с 3-5 дня болезни, диагностически значимым является титр 1:1000. С помощью ИФА опред специфические IgM и IgG. Для выявления ДНК возбудителя используют ПЦР.