3 воздуха, 1 г почвы, 1 мл воды)
Содержание санитарно-показательных бактерий оценивают по титру и индексу:
Титр – минимальный объем или масса исследуемого материала, в которых обнаруживают спб.
Индекс – количество спб, содержащихся в 1 м
3 воздуха, 1 г почвы, 1 мл воды.
-
Микрофлора почвы. Факторы, влияющие на количественный и видовой состав микробов почвы. Почва как фактор передачи инфекционных заболеваний. Санитарно-показательные мо. Методы оценки санитарно-бактериологического состояния почвы.
Почва – естественная среда мо, принимающих участие в круговороте веществ в природе, почвообразовании и самоочищении почвы. Микробы из почвы попадают в воздух и воду.
Пахотный слой почвы толщиной 10-15 см содержит наибольшее количество мо. По мере углубления количество мо уменьшается вплоть до их исчезновения на глубине 3-4 м.
К микрофлоре почвы относятся:- спорообразующие палочки родов Bacillus и Clostridium
- аммонифицирующие – непатогенные бациллы, псевдомонады, протей
- азотфиксирующие - Azotobacter, Azomonas, Mycobacterium
- простейшие
- грибы
- цианобактерии
Патогенные спорообразующие палочки могут длительно сохраняться и размножаться в почве. Представители семейства Enterobacteriaceae попав в почву с фекалиями, отмирают.
В чистых почвах кишечная палочка и протей встречаются редко. Обнаружение бактерий группы кишечной палочки в значительных количествах указывает на загрязнение почвы фекалиями.
Факторы, влияющие на качественный и количественный состав микроорганизмов почвы
1. Тип почвы (тундровая, подзолистая, черноземная, сероземная).
2.Влажность почвы.
3.Аэрация (Почвы, богатые влагой, плохо аэрируются. В этих условиях преобладают анаэробы, а песчаные почвы аэрируются лучше, поэтому в них больше аэробов.)
4.Температура почвы.
5.Адсорбционная способность почв.
В почве большинство представителей нормальной и патогенной микрофлоры человека длительно не выживают.
Классификация почвенных патогенных мо: -
Патогенные мо, постоянно обитающие в почве (возб. Ботулизма). Бактерии попадают в почву с испражнениями человека и животных, их споры сохраняются в ней неопределенно долго.
-
Патогенные мо, дл которых почва – вторичный резервуар (возб. Сибирской язвы) – попадают в почву с фекалиями человека и животных, прочими выделениями, а также трупами животных. При благоприятных условиях они могут сохраняться и размножаться длительное время в виде спор.
-
Патогенные мо, попадающие в почву с выделениями человека или животных и сохраняющиеся в течение нескольких месяцев или недель - в эту группу входят различные споронеобразующие бактерии. Основные факторы, приводящие к быстрой гибели мо, - неспособность к спорообразованию и антагонистические свойства микрофлоры почвы
Эпидемиологическое значение почвы состоит в том, что в ней, несмотря на антагонизм почвенной сапрофитной микрофлоры, возбудители инфекционных заболеваний могут достаточно продолжительное время сохранять жизнеспособность, вирулентность и патогенность. Так, в почве, особенно в ее глубоких слоях, сальмонеллы брюшного тифа могут выживать до 400 сут. В течение этого времени они могут загрязнять подземные источники водоснабжения и заражать человека. Достаточно длительное время в почве могут сохраняться не только патогенные микроорганизмы, но и вирусы.
Особенно долго (20-25 лет) в почве сохраняются споры анаэробных микроорганизмов, которые постоянно встречаются в почве населенных мест. К ним относятся возбудители столбняка, газовой гангрены, ботулизма, сибирской язвы. Длительное пребывание в почве указанных патогенных микроорганизмов и их спор является причиной возникновения соответствующих инфекционных заболеваний при попадании в рану человека загрязненной почвы, употреблении загрязненных пищевых продуктов.
Загрязненная почва может выполнять роль фактора передачи человеку возбудителей как антропонозных, так и зооантропонозных инфекций. Среди антропонозных - кишечные инфекции бактериальной природы (брюшной тиф, паратифы А и Б, бактериальная и амебная дизентерия, холера, сальмонелле-зы, эшерихиоз), вирусной этиологии (гепатит А, энтеровирусные инфекции - полиомиелит, Коксаки, ECHO) и протозойной природы (амебиаз, лямблиоз). К зооантропонозам, которые могут распространяться через почву, относятся: лептоспироз, в частности безжелтушная форма, водная лихорадка, инфекционная желтуха, или болезнь Васильева-Вейля, бруцеллез, туляремия, сибирская язва. Через почву могут передаваться также микобактерии туберкулеза. Особенно велика роль почвы в передаче глистных инвазий (аскаридоза, трихо-цефаллеза, дифиллоботриоза, анкилостомидоза, стронгилоидоза). Для указанных инфекций и инвазий характерен фекально-оральный механизм передачи, который для кишечных инфекций является ведущим, а для других -одним из возможных.
Фекально-оральный механизм передачи инфекционных заболеваний через почву - многоэтапный процесс, характеризующийся последовательным чередованием трех фаз: выделение возбудителя из организма в почву; пребывание возбудителя в почве; внедрение возбудителя в видово-детерминированный организм биологического хозяина и сводится к следующему. Патогенные микроорганизмы или яйца геогельминтов с экскрементами больного человека или носителя инфекции или же больного животного (при зооантропонозных инфекциях) попадают в почву, в которой какое-то время сохраняют жизнеспособность, патогенные и вирулентные свойства. Находясь в почве, возбудители инфекционных заболеваний могут попасть в воду подземных и поверхностных источников, а оттуда в питьевую воду, с которой попадают в организм человека. Кроме того, из почвы возбудители могут попасть на овощи, ягоды и фрукты, на руки. Их распространяют также грызуны, мухи и другие насекомые.
Санитарно-показательными микроорганизмамипочвыявляются:
а) E. сoli (а также бактерии группы кишечной палочки (БГКП) - p. Citrobacter, p. Enterobacter, p. Klebsiella);
б) Str. faecalis;
в) C. perfringens.
Эти бактерии имеют общий путь выведения с возбудителями кишечных инфекций (с фекалиями) и служат показателями фекальной загрязнённости почвы.
1. общее микробное число (омч) почвы - общее количество микроорганизмов в 1 г почвы.
2. коли-титр почвы, перфрингенс-титр почвы и др. (оценивают количество санитарно-показательных микробов почвы).
коли-титр почвы – наименьшее количество почвы в граммах, в котором определяется хоть одна жизнеспособная клетка кишечной палочки – E.coli.
перфрингенс-титр почвы - наименьшее количество почвы в граммах, в котором определяется хоть одна жизнеспособная клетка возбудителя газовой гангрены - C. perfringens.
Методы определения.
1. Определение ОМЧ почвы:
а) посев 10-кратных разведений почвы (1:10, 1:100 и т.д.) в чашки Петри на МПА (для бактерий) и на сусло-агар или среду Сабуро (для грибов);посев можно делать в глубину (1 мл) или на поверхность (0,1 мл) среды;
б) инкубация посевов (48 час) при 24°С для грибов и при 37°С для бактерий;
в) подсчет числа колонийдля каждого разведения;
в) расчет микробного числа почвы (с учетом навески почвы, разведения, объема посева), зная, что 1 колония – это 1 клетка.
2. Определение коли-титра почвы:
а) посев10-кратных разведений почвы на жидкую среду Кесслера (содержит желчь, лактозу, пептон, генциановый фиолетовый, который подавляет рост многих микробов, кроме кишечной палочки);
б) инкубация при 37°С, 24 часа;
в) пересев положительных проб (образование газа и диффузное помутнение) на среду Эндо иинкубацияпри 37°С, 24 часа;
г) на среде Эндо E. coli образует тёмно-красные колонии с металлическим блеском; проводят микроскопическоеподтверждение колоний E. coli (из подозрительной колонии готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют; под микроскопом видны мелкие грам"-" палочки);
д) расчет коли-титра (с учетом разведения и навески почвы определяют количество почвы в граммах, в котором обнаружена клетка кишечной палочки).
3. Определение перфрингенс-титра почвы:
а) почвенную суспензию прогревают 10-15 мин при 80°С для того, чтобы неспоровые бактерии не росли на среде;
б ) посев 10-кратных разведений почвы на среду Вильсона-Блера и инкубация при 37 - 43° С, 3-18часили посев на среду Тукаева(молочная среда) и инкубация 3 – 4 часа;
в) насреде Вильсона-Блера C. perfringensобразует чёрные колонии и газ разрывает среду, а на среде Тукаева наблюдается створаживание молока, а газ разрывает сгустки казеина и вытесняет в верхнюю часть пробирки; наличие C. perfringensподтверждается микроскопически (готовят мазок, окрашивают по Грамму и микроскопируют, под микроскопом видны крупные грам «+» палочки)
г) расчет перфрингенс-титра (с учетом разведения определяют количество почвы в граммах, в котором обнаружена клетка C. perfringens).Перфрингенс-титр определяется максимальным разведением почвенной суспензии, при посеве которого образуются на среде Вильсона-Блера характерные черные колонии.
49. Микрофлора воздуха. Воздух как фактор передачи респираторных инфекций. Санитарно-показательные мо. Методы оценки санитарно-бактериологического состояния воздуха.
В воздух попадают мо из почвы, воды, а также с поверхности тела, из дыхательных путей и с каплями слюны человека и животных.
Большее количество мо присутствует в воздухе крупных городов, меньшее – в воздухе сельской местности. Особенно мало мо в воздухе над лесами, горами и морями.
Воздух рассматривают как фактор передачи респираторных инфекций, при которых возбудитель передается воздушно-капельным путем или воздушно-пылевым. Здесь обнаруживаются кокковидные и палочковидные бактерии, бациллы, клостридии, актиномицеты, грибы и вирусы.
Для снижения микробной обсемененности воздуха проводят влажную уборку помещения в сочетании с вентиляцией и очисткой поступающего воздуха. Применяют аэрозольную дезинфекцию, обработку УФ-лучами.
Санитарно-показательные мо: Staphylococcusaureus, Streptococcusviridans
МБ методы оценки сан-бактериологического состояния возлуха:
Седементационный метод – основан на принципе осаждения. Две чашки Петри с питательным агаром оставляют открытыми в течение 60 минут, после чего инкубируют при 37 градусах 1 сутки. Результаты оценивают по суммарному числу колоний, выросших в обеих чашках:
менее 250 колоний – воздух чистый
250-500 колоний – загрязненный в средней степени
Более 500 колоний – загрязненный
Аспирационный метод является более точным. Посев производится автоматически с помощью специальных аппаратов. Примером может служить аппарат Кротова. Он устроен таким образом, что воздух с заданной скоростью просасывается через щель пластины, которая при этом вращается. Под пластиной находится чашка Петри. Т.о., происходит равномерное распределение мо по питательной среде.
Расчет производят по формуле:
Х= (а х 1000)/V, где
а- количество выросших колоний
V- объем пропущенного воздуха, дм
3(л)
1000 – искомый объем, дм
3(л)
При исследовании воздуха стационаров осуществляют непосредственное выделение патогенных и условно-патогенных бактерий – возбудителей внутрибольничных инфекций. При выявлении возбудителей выявляют источники и пути распространения инфекции.
-
Микрофлора воды. Санитарно-показательные мо. Методы оценки санитарно-бактериологического состояния воды.
Поверхностные воды рек, озер, водохранилищ загрязняются сточными водами. Микробное загрязнение воды возрастает после обильных дождей и весеннего половодья. Проточные водоемы также обладают способностью к самоочищению. Утилизация органических отходов связана с деятельностью постоянно обитающих в воде мо (аутохтонная микрофлора).