СОДЕРЖАНИЕ
Коротка ботанічна характеристика
Хімічний склад Грициків звичайних
Застосування Грицика звичайного у медицині
Застосування Грицика звичайного у народному господарстві
Заготівля сировини Грициків звичайних
Характеристика ліпофільних речовин грициків звичайних
Отримання ліпофільного екстракту
Вивчення хімічного складу ліпофільній фракції
Методи ідентифікації флавоноїдів
Кількісне та якісне визначення біологічно активних речовин ліпофільній фракції
Кількісне визначення флавоноїдів
Дослідження екстракційних препаратів Грицика звичайного
Вивчення екобіотічних особливостей Грицика звичайного
Визначення числових показниках ліпофільної фракції з рослинного матеріалу грициків звичайних
Визначення числових показників ліпофільній фракції зводиться до визначення кислотного числа, ефірного числа, числа омилення, йодного числа та ін. Вони є обов'язковими характеристиками для визначення речовин ліпофільній природи.
Кислотним числом називають кількість міліграмів їдкого калі, необхідне для нейтралізації вільних кислот, що містяться в 1 г досліджуваної речовини.
Кислотне число показує кількість вільних кислот в досліджуваній речовині і за його величиною судять про доброякісність речовини.
Свіже речовина вільних кислот майже не містить.
Методика визначення. Близько 2 г (точна наважка) ліпофільного екстракту з рослинної сировини Грициків звичайних розчиняли в 20 мл суміші рівних обсягів 96% спирту і ефіру, попередньо нейтралізованої за фенолфталеїном 0,1 н розчином їдкого натру, додавали 3-5 крапель розчину фенолфталеїну і титрували при постійному помішуванні 0,1 н розчином їдкого натру до появи рожевого забарвлення, не зникає протягом 30 секунд.
1 мл 0,1 н розчину їдкого натру відповідає 5,61 мг їдкого калі.
Кислотне число (к.ч.) обчислювали за формулою:
К.ч. = а * 5,61 / б
а - кількість мілілітрів 0,1 н розчину їдкого натру, витраченого на титрування;
б - навішування речовини в грамах [7].
В результаті визначення встановлено, що кислотне число становить 4,61 (таблиця 4.1.).
Числом омилення називають кількість міліграмів їдкого калі, необхідне для нейтралізації вільних кислот і омилення складних ефірів, що містяться в 1 г досліджуваної речовини.
Методика визначення. Близько 2 г (точна наважка) ліпофільній фракції з рослинної сировини Грициків звичайних змішували в колбі з шліфом місткістю 200-250 мл з 25 мл 0,5 н спиртового розчину їдкого калі. До колбі приєднували зворотний холодильник і занурювали її в киплячу водяну баню на 1,5-2 години, підтримуючи легке кипіння до повного омилення.
Паралельно в тих же умовах ставили контрольний досвід, тобто в іншій колбі нагрівали 25 мл 0,5 н спиртового розчину їдкого калі.
Обидва розчину відразу ж після припинення нагрівання розбавляли 25 мл свіжопрокип'яченої гарячої води, додавали по 5 крапель розчину фенолфталеїну і титрували 0,5 н розчином хлористоводневої кислоти до знебарвлення.
З кількості мілілітрів 0,5 н розчину хлористоводневої кислоти, витраченого у контрольному досвіді, вичитали кількість мілілітрів 0,5 н розчину хлористоводневої кислоти, який пішов на титрування досліджуваної ліпофільній фракції.
Отримана різниця являє собою кількість 0,5 н розчину їдкого калі, витрачений на омилення складних ефірів і нейтралізацію вільних жирних кислот, що містяться у взятій навішуванні ліпофільного екстракту.
1 мл 0,5 н розчину їдкого калі містить 28,05 мг їдкого калі.
Число омилення (Ч.О.) обчислювали за формулою:
Ч.о. = (а - б) *. 28,05 / в
а - кількість мілілітрів 0,5 н розчину хлористоводневої кислоти, витрачений на титрування в контрольному досліді;
б - кількість мілілітрів 0,5 н розчину хлористоводневої кислоти, витрачений на титрування досліджуваної речовини;
в - навішування речовини в грамах [7].
В результаті визначення встановлено, що число омилення становить 97,35 (таблиця 4.1.).
Ефірним числом називають кількість мілілітрів їдкого калі, витрачений на омилення складних ефірів, що містяться в 1 г досліджуваної речовини. Ефірне число (Е.ч.) визначають за різницею між число омилення і кислотним числом [6]. (таблиця 4.1.).
Е.ч. = Ч.О. - К.ч.
Йодним .
Методика визначення. моль /моль /.
Паралельно
З кількості мілілітрів розчину тіосульфату натрію (0,1 моль /моль /моль /
Йодне число
I = (а - б) * 0,01269 * 100 / В
амоль /
б - моль /
в
Примітка. моль /
В
Таблиця 4.1.
|
Числовий показник |
Значення |
|
|
1. Кислотне число |
4,61 |
|
|
2. Число омилення |
97,35 |
|
|
3. Ефірне число |
92,74 |
|
|
4. Йодне число |
152 |
Висновки
Визначено числові показники ліпофільній фракції з рослинної сировини Грициків звичайних
кислотне число - 4,61;
Число омилення - 97,35;
Ефірне число - 92,74;
Йодне число - 152.
Проведено аналіз літературних даних про поширення, хімічний склад і застосуванні рослинної сировини Грицика звичайного. У доступній нам літературі практично відсутні дані про вивчення хімічного складу ліпофільній фракції. Це і послужило поштовхом для поглиблених фітохімічних досліджень ліпофільній фракції рослинної сировини Грицика звичайної.
Показано, що в траві грициків, що виростає в Харківській області, присутні флавоноїди, кумарини, дубильні речовини, сапоніни, полісахариди, алкалоїди та вітамін К1.
Запропоновано об'єктивний метод оцінки якості сировини «Трава грициків». Розроблено методику кількісного визначення суми флавоноїдів, в перерахунку на рутин, спектрофотометричним методом. Відносна помилка методу не перевищує ± 2,64%. Вміст суми флавоноїдів у сировині коливається від 1,12 ± 0,02% до 2,48 ± 0,09%. Дана оцінка якості сировини грициків по кількісному змісту флавоноїдів, не менше 1%.
Вивчено накопичення флавоноїдів в різних органах грициків, по фазах вегетації і залежно від способу сушіння сировини. Максимальне накопичення флавоноїдів спостерігається в квітках: 2,98 + 0,62% і незрілих плодах: 1,11 ± 0,06%; найменше їх кількість: в стеблах - 0,47 ± 0,02%. Встановлено залежність між вмістом флавоноїдів і фазами розвитку рослини: найбільша кількість флавоноїдів накопичується в фази початку цвітіння і плодоношення (до побуріння плодів), які є раціональними термінами збору сировини. Температурний режим сушіння не робить достовірного впливу на вміст флавоноїдів у сировині.
Вивчено вміст флавоноїдів в екстракційних препаратах грициків: настої і рідкому екстракті промислового виробництва: 0,022 + 0,001% і 0,324 + 0,01%. Показано, що більша частина флавоноїдів не виймається і залишається в шроті: 85,2 + 2,25% і 64,44 + 0,49%. Досліджено фактори впливають на вихід флавоноїдів із сировини в рідкий екстракт. Максимальний вихід флавоноїдів із сировини досягається при ступеня подрібнення сировини 3 мм, час контакту фаз 8 годин, кількість перколяторів в батареї 4.
Розроблено технологію забезпечує отримання препаратів з максимальним вмістом суми флавоноїдів: 0,88 ± 0,01% і 0,83 + 0,01%, що підтверджує необхідність стандартизації сировини та екстракційних препаратів грициків по вмісту флавоноїдів для отримання більш ефективних лікарських форм.
Розроблені та апробовані уніфіковані методики кількісного спектрофотометричного визначення суми флавоноїдів для сировини та екстракційних форм грициків: рідкого екстракту і субстанції «сухий екстракт».
Встановлено, що метод кругової хроматографії на папері дозволяє достовірно ідентифікувати траву і екстракційні препарати грициків по комплексу фенольних сполук.
Вивчено екобіотіческіе особливості грициків по ресур-соведческім, фітоценотічскім, морфологічним і фотохимическим ознаками. Встановлено, що умови проживання у вивчених популяціях надають достовірне вплив на морфологічному рівні організації і не надають достовірного впливу на накопичення флавоноїдів у сировині.
Показано, що заготовку трави грициків раціонально проводити в фітоценозах, де рослина має велику кількість сміття 3, проективне покриття близько 80%, найбільшу щільність запасу сировини і, відповідно, вихід флавоноїдів з одиниці площі. Це має суттєве значення при промишлешшк заготовках сировини для потреб місцевого фармацевтичного виробництва.
Встановлено, що грицики відноситься до видів накопичують важкі метали, вміст яких залежить від віддаленості заростей від узбіччя дороги. Заготівлю трави грициків рекомендуємо проводити на відстані не ближче 25 метрів від узбіччя дороги.